1 染色原理
Giemsa染色法 :吉姆薩染液由天青,伊紅組成染色原理和結(jié)果與瑞特染色法基本相同。嗜酸性顆粒堿性蛋白質(zhì),與酸性染料伊紅結(jié)果,染粉紅色,稱為嗜酸性物質(zhì);細(xì)胞核蛋白和淋巴細(xì)胞胞漿為酸性,與堿性染料美藍(lán)或天青結(jié)合,染紫藍(lán)色,稱為嗜堿性物質(zhì);中性顆粒呈等電狀態(tài)與伊紅和美藍(lán)均可結(jié)合,染淡紫色,稱為中性物質(zhì)。
PH對細(xì)胞染色有影響。細(xì)胞各成分均不蛋白質(zhì),由于蛋白質(zhì)系兩性電解質(zhì),所帶電荷隨溶液PH而定,在偏酸性環(huán)境中下在電荷增,易與伊紅結(jié)合,染色偏紅;在偏三性環(huán)境中負(fù)電荷增多,易與美藍(lán)或天青結(jié)合,染色 偏藍(lán)。因此細(xì)胞染色對氫離子濃度十分敏感,染色用正經(jīng)片必須清潔,無酸堿污染。配制頊特液必須用優(yōu)質(zhì)甲醇,稀釋染色必須用緩沖液,沖洗用水應(yīng)近中性,否則可導(dǎo)致各種細(xì)胞染色反應(yīng)異常,以致識別困難,甚至造成錯(cuò)誤。
2 介紹
MGG由May-Grunwald染料和Giemsa染料組成。前者化學(xué)名為曙紅亞甲基藍(lán)Ⅱ,對胞質(zhì)著色較好;后者對胞核著色較好。因此MGG染色,可兼兩者的優(yōu)點(diǎn),常用于細(xì)胞涂片染色。
2.1 1.染液配制
I液的配制:
邁格染料 lg
甲醇 100ml
在研缽內(nèi)用少量純甲醇將染料充分研磨成均勻一致的懸液,倒人燒瓶中,加入其余的甲醇后置入37℃溫箱4-6小時(shí),每隔半小時(shí)研磨半小時(shí),然后放入深棕色瓶內(nèi),在室溫下保存,2周后使用。臨用前取上液40ml,加純甲醇20ml混合用作工作液。
Ⅱ液的配制:
姬氏染粉 0.6g
甘油 50ml
甲醇100ml
將姬氏染粉溶于甘油內(nèi),在研缽內(nèi)研磨3-4小時(shí),使之磨勻,加入純甲醇后攪拌均勻,放入深棕色瓶內(nèi),室溫下保存,2周后即可使用。
磷酸緩沖液配制:1%磷酸氫二鈉20ml,l%磷酸二氫鈉30ml,加蒸餾水至1000ml,調(diào)整pH 6.4-6.8(用蒸餾水代替緩沖液,效果亦佳)。
2.2 2.染色步驟
(1)自然干燥的細(xì)胞涂片(預(yù)先滴加甲醇固定更好)水平置于染色架上。
(2)將I液(用緩沖液或蒸餾水5-10倍稀釋)滴蓋涂片上,lO-30分鐘。
(3)倒棄涂片上的I液,自來水漂洗干凈。
(4)立即滴蓋Ⅱ液(用緩沖液或蒸餾水5-10倍稀釋)在涂片上染色10-30分鐘。
(5)倒棄涂片上的Ⅱ液,自來水漂洗干凈。
(6)趁濕加蓋片或待干后鏡檢。
2.3 3.染色結(jié)果
MGG染色將細(xì)胞核染成紫紅色,細(xì)胞質(zhì)和核仁染成藍(lán)紫色。
2.4 4.MGG染色特點(diǎn)
染色方法簡單,且兼有瑞氏、姬氏兩種染色的優(yōu)點(diǎn),并且涂片可保存十多年而不退色。MGG染色對胞質(zhì)胞核染色效果均較好,結(jié)構(gòu)清晰,所染細(xì)胞亦比HE染色的細(xì)胞大;同時(shí)對細(xì)菌、霉菌及膽固醇結(jié)晶的顯示也很清楚。因此適用于淋巴造血系統(tǒng)的細(xì)胞標(biāo)本、胸腹水、穿刺標(biāo)本等。尤其對鑒別惡性淋巴瘤的類型,MGG染色更有幫助。
你好,你問的是Giemsa染色和Hoechst染色對比,優(yōu)缺點(diǎn)是什么嗎?Giemsa染色和Hoechst染色對比,Giemsa氏染色的染色過程比Hoechst染色更易控制、不污染,是其最大的優(yōu)點(diǎn);Giemsa染色的染色時(shí)間比Hoechst染色長,是其缺點(diǎn)。Giemsa染色法染液由May-Grunwald染料和Giemsa染料組成。前者化學(xué)名為曙紅亞甲基藍(lán)Ⅱ,對胞質(zhì)著色較好;后者對胞核著色較好。Hoechst染色是熒光染色中的一種類型,專門用來在熒光顯微觀察下標(biāo)示DNA。由于可將DNA標(biāo)示,此種染色方式也可以用來辨識內(nèi)含DNA的細(xì)胞核及線粒體的位置。
別名:姬姆薩染色液,吉姆薩染色液,姬姆薩染原液。 吉姆薩染液為天青色素、伊紅、次甲藍(lán)的混合物,本染色液最適于血液涂抹標(biāo)本、血球、瘧原蟲、立克次體以及骨髓細(xì)胞、脊髓細(xì)胞等的染色。染前用蛋白酶等進(jìn)行處理,然后再用姬姆薩染液染色,在染色體上,可以出現(xiàn)不同濃淡的橫紋樣著色。姬姆薩染液可將細(xì)胞核染成紫紅色或藍(lán)紫色,胞漿染成粉紅色,在光鏡下呈現(xiàn)出清晰的細(xì)胞及染色體圖像。
吉姆薩染色帶即染色體帶型。是根據(jù)細(xì)胞學(xué)的特殊處理程序,使染色體顯現(xiàn)出深淺不同的染色帶。染色帶的數(shù)目、部位、寬窄和著色深淺均具有相對穩(wěn)定性,所以每一條染色體都有固定的分帶模式,即稱帶型。染色體帶型是鑒別染色體的重要依據(jù)。通過分帶機(jī)理的研究,可獲得染色體在成分、結(jié)構(gòu)、行為和功能等方面的許多信息。
染色方法的基礎(chǔ)是組織結(jié)構(gòu)對不同染料的結(jié)合程度不同。染料蘇木精可以將嗜堿性結(jié)構(gòu)染成藍(lán)紫色,而伊紅可以將嗜酸性結(jié)構(gòu)染成粉紅色。
嗜堿性結(jié)構(gòu)通常包括含有核酸的部分,如核糖體、細(xì)胞核及細(xì)胞質(zhì)中富含核糖核酸(RNA)的區(qū)域等。
嗜酸性結(jié)構(gòu)則通常由細(xì)胞內(nèi)及細(xì)胞間的蛋白質(zhì),如路易體(Lewy body)、酒精小體(Mallory body)、細(xì)胞質(zhì)的大部分等。
G帶即吉姆薩帶,是將處于分裂中期的細(xì)胞經(jīng)胰酶或堿、熱、尿素等處理后,再經(jīng)吉姆薩染料染色后所呈現(xiàn)的區(qū)帶。
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