完成機(jī)構(gòu):[1]吉首大學(xué)林產(chǎn)化工工程省級重點實驗室,湖南張家界427000 [2]吉首大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院,湖南吉首416000
原兒茶醛和原兒茶酸是茶葉中的兩種主要成分,常常需要進(jìn)行分離和純化。以下是一種可能的分離方法:
1.提取茶葉:將茶葉用乙醇或乙酸乙酯等有機(jī)溶劑提取,得到茶葉浸膏。
2.分離:將茶葉浸膏經(jīng)過萃取、柱層析或高效液相色譜等方法進(jìn)行分離。其中一種可能的方法是用正己烷/乙酸乙酯(3:1,體積比)作為移動相,在硅膠柱上進(jìn)行分離。在分離過程中,原兒茶醛和原兒茶酸會發(fā)生不同程度的吸附和洗脫,從而實現(xiàn)分離。
3.純化:得到分離后的原兒茶醛和原兒茶酸后,可以通過再結(jié)晶、萃取等方法進(jìn)一步純化。例如,可以用乙醇或乙酸乙酯進(jìn)行再結(jié)晶,或用酸性溶液進(jìn)行萃取。
1MIPs用作化學(xué)仿生傳感器
化學(xué)或生物傳感器是由分子識別元件和信號轉(zhuǎn)換器所組成。近十幾年來,生物傳感器以其突出的靈敏度和特異性引起了廣泛的關(guān)注,使傳感技術(shù)的研究不斷升溫。分子印跡聚合物敏感材料與近年來研究較熱的生物敏感材料相比,具有耐高溫、高壓、酸、堿和有機(jī)溶劑,不易被生物降解破壞,可多次重復(fù)使用,易于保存等優(yōu)點。
1.1電化學(xué)傳感器:
在電導(dǎo)傳感器方面,Piletsky等將MIPs膜用于電導(dǎo)傳感器,可用來定性檢測核苷酸、氨基酸和除草劑。1年之后,通過改進(jìn),他們將atrazine的MIP膜制成電導(dǎo)傳感器,檢測溶液中除草劑atrazine的線性范圍為0.01~0.05mg/L,響應(yīng)時間為30min。而以苯基丙氨酸、6-氨基-1-丙基尿嘧啶、莠去津、唾液酸為印跡分子制備的MIPs膜電導(dǎo)傳感器,其檢測溶液中印跡分子的濃度為150μmolΠL。最近,他們通過進(jìn)一步改進(jìn),制成了一種對atrazine敏感的傳感器,其檢測限可達(dá)到5nM,響應(yīng)時間視其膜的厚度不同縮短到6~15min,其使用壽命長達(dá)6個月之久。
1.2光化學(xué)傳感器:
Kriz等發(fā)展了一種基于分子印跡技術(shù)的光纖傳感器。這種傳感器具有手性識別能力,能識別熒光標(biāo)記的氨基酸衍生物。其原理是當(dāng)熒光標(biāo)記的氨基酸結(jié)合到附著于石英窗上的MIPs時,熒光信號隨其濃度而變。以D型的氨基酸衍生物作參比便實現(xiàn)了手性識別。其檢測丹酰-L-苯基丙氨酸的濃度范圍為0~30μg/ml。
Dickert等在多種以有機(jī)溶劑印跡過的MIPs中添加有機(jī)染料,使其成為光敏物質(zhì),然后制成光化學(xué)傳感器,通過對光吸收量的變化來檢測有機(jī)溶劑蒸汽,檢測限達(dá)μg/ml數(shù)量級。2年后,他們又將MIPs與熒光光譜技術(shù)結(jié)合,發(fā)展了一種用于檢測水中多環(huán)芳烴的靈敏的光化學(xué)傳感器。
1.3 質(zhì)量型傳感器
目前研究報道的最多的是分子印跡技術(shù)與石英微量天平(quartzcrystalmicrobalance,QCM)及表面聲波(surfaceacousticwave,SAW)結(jié)合的技術(shù)。將MIPs與QCM結(jié)合,可構(gòu)成能夠檢測特定分子的MIPs質(zhì)量敏感型傳感器。Feng等以二氧化鈦為印跡基質(zhì),研制MIPs修飾壓電傳感器,用于谷氨酸的測定,檢測范圍為10~200μmol/L。其它基于分子印跡膜的傳感器還有MIPs橢圓偏光傳感器(ellipsometry)、MIPs表面聲波傳感器(Surfaceacousticwave)、MIPs中紅外消失波傳感器(infraredevanescentwave)、MIPs體聲波傳感器(bulkacous-ticwave)等。
2 MIPs在化學(xué)模擬酶催化方面的應(yīng)用
化學(xué)模擬酶催化劑與天然的生物酶催化劑相比,具有抗惡劣環(huán)境的能力,表現(xiàn)出高度的穩(wěn)定性和長的使用壽命,因此分子印跡技術(shù)則是設(shè)計新型人工模擬酶材料的最有效手段之一,具有廣泛的應(yīng)用前景。該方法是將功能單體與某一待催化的反應(yīng)物之間形成過渡態(tài)復(fù)合物,然后再在過渡態(tài)復(fù)合物的周圍交聯(lián)制得MIPs,洗去模板分子后,MIPs留下的識別位點能夠與待催化反應(yīng)的反應(yīng)物之間重新形成過渡態(tài),再與另一物質(zhì)發(fā)生催化反應(yīng)。由于與識別位點生成了活化能較低的過渡態(tài),因而起到了催化的作用。但由于單體與反應(yīng)物之間形成的過渡態(tài)復(fù)合物極不穩(wěn)定,這給MIPs在該領(lǐng)域的應(yīng)用受到了限制。MIPs在模擬酶催化方面的應(yīng)用極具發(fā)展前景.
3MIPs在分離領(lǐng)域的應(yīng)用
膜分離和固相萃取
色譜分離
在臨床藥物分析中的應(yīng)用
由于許多藥物都是具有手性活性的化合物,而MIPs正好可以為這些手性藥物定做模板。因此,MIPs目前已廣泛應(yīng)用于臨床藥物的手性分離和分析。Mosbach等已用分子印跡聚合物提供的立體專一性進(jìn)行了血清中藥物水平測定,用茶堿或安定作模板分子,甲基丙烯酸作功能單體,在氯仿中聚合得到分子印跡聚合物,可用于放射配基結(jié)合測定人體血清的模板藥物。用嗎啡和內(nèi)源性的神經(jīng)肽為模板制備的以甲基丙烯酸為功能單體的印跡聚合物可以模擬生物體內(nèi)鴉片受體的生物活性,對其聚合物的識別特性能通過放射配基結(jié)合分析,結(jié)果表明,在水緩沖溶液中也有很高的親和性和選擇性,這是一個突破性的進(jìn)展 。
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