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      盤點生殖器皰疹有哪些發(fā)病特點
      
        
      
            健康生活
            2023-10-12 12:11:57
        
      

        
      
           
      生殖器皰疹在發(fā)病的時候，會有一些明顯的特點
      ，而且它還可能會出現(xiàn)其他的病發(fā)
      ，正比如爆震性宮頸炎
      ，或者是皰疹性直腸炎，會讓患者出現(xiàn)全身疼痛
      ，或者是周身不適的癥狀
      。
      1、診斷的難度大
      由于生殖器皰疹的不典型發(fā)作與女性病變所涉及的部位極其廣泛復雜
      ，因而使得本病的診斷的難度大大加大。
      2
      、可能并發(fā)：
      皰疹性宮頸炎、皰疹性直腸炎
      、新生兒皰疹感染與畸形死胎
      ，女性較男性更容易出現(xiàn)并發(fā)癥
      ，如蔓延形成：無菌性腦炎
      、骶神經(jīng)根?div   id="4qifd00"   class="flower right">
      。欢嘁姾喜⑴枨谎?div   id="m50uktp"   class="box-center">  、子宮附件炎
        、陰道反復難治愈的白色念珠菌與陰道加特納氏菌感染等等
        ，遠期如宮頸癌
        、糖尿病
        、其他腫瘤（合并消化道疾病而出現(xiàn)胃癌
        、結(jié)腸癌等等）
        。
      3、皰疹性宮頸炎：
      可以無癥狀
        ；70%--90%患者表現(xiàn)為彌漫性或者局限性的宮頸充血與脆性增加
        ，宮頸糜爛或者壞死性的宮頸炎
        ，檢查時可以引起嚴重的盆腔疼痛
        ，宮頸觸痛
        ，易出血。
      4、生殖器皰疹感染的一般癥狀：
      可以沒有癥狀
        ，也可以表現(xiàn)為頭疼、全身疼痛
        、發(fā)熱或伴有全身不適癥狀
        ；
      5
      、累及尿道出現(xiàn)排尿障礙及燒灼樣排尿疼痛，有的患者說經(jīng)常尿道火辣辣的
      ，就是這個意思！發(fā)展嚴重乃至出現(xiàn)尿潴留
      。
      針灸培訓
      生殖器皰疹的癥狀有哪些
      ？
      一、癥狀
      HSV感染是一種全身性疾病
      ，病毒經(jīng)呼吸道、口腔
      、生殖器粘膜或破損皮膚進入人體，可潛于人體正常粘膜
      、血液
      、唾液以及局部感覺神經(jīng)節(jié)和多數(shù)器官內(nèi)
      ，幾乎所有的內(nèi)臟和粘膜表皮內(nèi)都可分離到HSV
      。
      原發(fā)感染多為隱性
      ，大多無臨床癥狀或呈亞臨床表現(xiàn)，僅有少數(shù)(約1-10%)可以出現(xiàn)臨床癥狀
      。主要見于免疫功能低下嬰幼兒或嚴重營養(yǎng)不良或有其它感染的兒童
        ，成人罕見
        。原發(fā)感染消退后
        ，病毒可持續(xù)潛居體內(nèi)。正常人中約有半數(shù)以上為本病毒的攜帶者
        ，可通過口、鼻分泌物而成為傳染源
        ，由于HSV在人體中不產(chǎn)生永久免疫力
        ，故每當機體抗病能力減退時
      ，如患某種發(fā)熱性傳染病，胃腸功能紊亂
      、月經(jīng)
      、妊娠
      、病灶感染
      、過度疲勞
      、情緒環(huán)境改變時
      ，體內(nèi)潛伏的HSV即被激發(fā)而發(fā)病
      。
      HSV-1主要引起口唇皰疹
      ，咽炎
      ，角膜結(jié)膜炎和散發(fā)性腦炎
      ，而HSV-2感染主要引起生殖器皰疹
      ，但在臨床上也有相反情況
      。
      HSV感染的潛伏期為1-45天
      ，平均為6天
      ，HSV-1感染主要發(fā)生于口角
      、唇緣
      、鼻孔等皮膚粘膜交界處
      ，亦可見顏面或口唇
      ，開始局部先有灼癢及輕度緊張感
      ，偶有伴發(fā)神經(jīng)痛。隨即出現(xiàn)紅斑，在紅斑基礎(chǔ)上發(fā)生簇集性小丘疹
      ，迅速變?yōu)樗诹Ｖ辆G豆大小的水皰，內(nèi)容澄清
      ，水皰破裂后出現(xiàn)糜爛面
      ，數(shù)日后干燥結(jié)痂
      。自覺灼癢
      ，偶有倦怠
      ，不適和輕微發(fā)熱等全身癥狀
      ，愈合可遺留暫時性色素沉著
      。全病程1-2周左右
      。
      HSV-2感染主要發(fā)生于生殖器部位
      ，患部先有燒灼感，很快在紅斑的基礎(chǔ)上發(fā)生成群的小水皰
      ，多見男性包皮、龜頭
      、冠狀溝、陰莖等處
      ，偶見于尿道;女性常見于陰唇、陰蒂
      、陰道、宮頸等處
      。水皰可逐漸變成膿皰
      ，約6天左右破潰而形成糜爛或淺的潰瘍
      ，自覺疼痛
      。病人可發(fā)生尿道炎
      ，出現(xiàn)排尿困難
      。多數(shù)人有腹股溝淋巴結(jié)腫大疼痛，有的病人可出現(xiàn)發(fā)熱
      、肌肉痛及腦膜炎癥狀。如發(fā)于女性宮頸者可形成潰瘍壞死
      ，陰道分泌物增多
      ，可有下腹痛
      。應(yīng)注意有無宮頸癌發(fā)生
      。孕期患生殖器皰疹時易致流產(chǎn)
      、早產(chǎn)或死胎
      ，并易使新生兒感染
      ，發(fā)生新生兒單純皰疹
      。本病一般經(jīng)過3周左右可以痊愈
      ，但常有反復發(fā)作
      ，一般原發(fā)疹后1-4個月內(nèi)復發(fā)
      ，癥狀較原發(fā)者輕
      ，范圍亦小，局限于生殖器部位
      ，有時僅有1-2個皰疹，病程亦短
      ，自發(fā)病至愈合8-12天。本病也可伴有生殖器以外部位的感染
      ，如口唇
      、臂部及中樞神經(jīng)系統(tǒng)等。
      二
      、體征
      皮損為紅斑基礎(chǔ)上可見成群的水皰或膿皰或成糜爛及潰瘍
      。女性患者約90%伴有HSV宮頸炎
      ，宮頸可見發(fā)紅
      、糜爛
      、潰瘍
      ，有膿性陰道分泌物。有的患者可有腹股溝淋巴結(jié)腫大壓痛或體溫升高
      。皮膚病變也可出現(xiàn)在口唇
      、手指
      、臀部
      、大腿
      、手臂
      ，甚至眼部與咽喉
      。并發(fā)腦膜炎或橫貫性脊髓炎
      ，一般于發(fā)疹后3-12天出現(xiàn)頸項強直等顱內(nèi)壓增高的現(xiàn)象
      。
      三
      、潛伏感染和復發(fā)
      HSV感染人體后1周左右
      ，血中出現(xiàn)中和抗體
      ，3-4周達高峰
      ，可持續(xù)多年
      ，這些抗體能清除病毒和使機體康復
      ，但大多數(shù)個體不能徹底消滅病毒，也不能阻止復發(fā)
      ，病毒以潛伏狀態(tài)長期存在宿主體內(nèi)。不同亞型HSV感染者急性首發(fā)生殖器皰疹的臨床過程相似
      ，但生殖器病變復發(fā)率不同，首發(fā)HSV-2感染者約90%
        ，在12個月內(nèi)會出現(xiàn)一次復發(fā)(平均復發(fā)4次)，而初次感染HSV-1者僅50%出現(xiàn)類似復發(fā)(平均復發(fā)次數(shù)小于1)
        。不同個體及同一病人一生中生殖器HSV-2感染的復發(fā)率變化很大，大多數(shù)年復發(fā)5-9次
        ，一般在原發(fā)皰疹消退后1-4個月內(nèi)發(fā)生
        ，有些患者受到促發(fā)因素，如發(fā)熱
        、月經(jīng)、日曬
        、寒冷
        、某些病毒感染等的影響而復發(fā)
        ，其特點是每次復發(fā)往往發(fā)生在同一部位
      ，復發(fā)前可有前驅(qū)癥狀如局部瘙癢
      ，發(fā)疹前數(shù)小時感染部位有灼燒
      ，麻刺感
      。
      復發(fā)生殖器皰疹(GH)對患者心理影響較大
      ，由于目前尚無預(yù)防復發(fā)的有效療法及可能有誘發(fā)生殖器惡變的危險性
      ，故給患者帶來心理影響
      ，患者多有抑郁
      、恐懼等心理障礙
      ，這又直接影響HSV的復發(fā)
      。我們的治療經(jīng)驗
      ，只要患者堅持規(guī)律治療
      ，都能治愈
      。
      四
      、HSV與HIV感染：
      HSV常與HIV-1同時感染
      ，并能促進病情發(fā)展
      ，引起嚴重的局部和播散性感染
      。目前認為HSV是一種調(diào)節(jié)因素
      ，能激活HIV復制
      ，Heng對6例AIDS合并生殖系統(tǒng)HSV皮膚損害患者進行皮膚活檢
        ，發(fā)現(xiàn)角化細胞和巨噬細胞均有HIV-1和HSV-1雜交后使HIV-1保留其感染性
        ，而無需與CD4分子結(jié)合即能進入細胞內(nèi)。此外HSV-1能刺激潛伏型HIV-1
        ，而增加HIV-1/HSV-1共同感染和在組織中的復制。
      表皮細胞發(fā)生氣球樣變性
        ，其中可見有嗜酸性包涵體
        。表皮開始為網(wǎng)狀變性形成的多房性水皰
        ，以后聚合為單房性水皰
        。真皮乳頭層有輕度水腫
        ，有輕重不等炎性細胞浸潤
        。反應(yīng)嚴重時可有嚴重血管炎表現(xiàn)
        。
      HSV感染的診斷要依據(jù)病史
        、臨床表現(xiàn)和實驗室檢查結(jié)果而定
        。有不潔性交史
        ，而且在生殖器部位出現(xiàn)皮膚紅斑和原發(fā)性水皰
        ，易復發(fā)等不難診斷
        。必要時可作皰液涂片
        ，培養(yǎng)
      、接種
      、免疫熒光檢查
      。血清免疫抗體測定等
      ，均有助于診斷和確定病毒類型。
      一
      、細胞學方法
      對皮損刮片做Wright-Gemsa(Tzanck試驗)或Papanicolaou染色，可檢出HSV感染特征的巨細胞包函體
      ，但不能區(qū)別HSV感染或水痘―帶狀皰疹病毒感染，敏感性僅為病毒分離的60%
      。
      二
      、培養(yǎng)法
      從水皰底部取材做組織培養(yǎng)分離病毒，為目前較敏感
      、最特異的檢查方法，需5-10天
      ，因其技術(shù)條件要求高
      ，價格昂貴
      ，不能普遍使用
      。
      三
      、抗體檢測
      目前最廣泛的是HSV-2抗體檢測
      ，如蛋白印跡法也可用gD2作抗原檢測HSV-2抗體
      ，具有敏感性
        ，且能區(qū)分HSV-1和HSV-2的優(yōu)點
        。
      四
        、基因診斷
      (一)用PCR分型檢測單純皰疹病毒
      PCR是一種敏感性高
      ，特異性強的快速檢測方法，標本中含有1fgHSV-DNA就可以檢出
      ，其在HSV感染的診斷研究中發(fā)展較快
      ，且分型檢測HSV是發(fā)展的趨勢
      。
      1
      、標本采集和處理
      (1)標本采集
      ①腦脊液：直接無菌采取患者0.5ml腦脊液標本于無菌試管送檢.如肉眼可見血色
      ，應(yīng)離心取上清
      。
      ②羊水及嬰兒血清:同上
      ，應(yīng)避免溶血.
      ③腦組織:腦組織尸檢
      、活檢標本
      ，加1mlPBS標本緩沖液研磨后
      ，待檢。
      ④眼及皮膚病灶分泌物：用預(yù)測(半干)棉拭子直接取患處分泌物
      ，置1mlPBS標本緩沖液中送檢
      。
      ⑤生殖器(宮頸
      、陰道
      、外陰
      、陰莖)標本：先用消毒棉拭子擦去病變部位表面粘液
      、污垢
      ，再用預(yù)潮棉拭子用力擦拭患處分泌物
      ，置1mlPBS標本緩沖液中送檢
      。
      (2)標本處理
      ①預(yù)處理：所有液體標本均可直接進行模板制備;可以取100μl標本液
      ，離心5000r/min×5min后，去上清
      ，取沉淀物進行模板制備
      。
      ②模板制備：a:蛋白酶K消化裂解法：沉淀物加100μl蛋白酶K消化裂解液，55℃1h后
      ，煮沸10min
      ，離心5000r/min×5min
      ，收集上清
      。b:水煮法：沉淀物加100μl蒸餾水
      ，搖均水煮20min
      ，離心5000r/min×5min收集上清。c:1%TritonX-100裂解法:取采集的標本液100μl
      ，加入1μlTritonX-100，水煮20min
      ，5000r/min×5min，收集上清
      。d:5%NP-40裂解法：取采集的標本液100μl
      ，加5μlNP-40
      ，水煮20min，5000r/min×5min收集上清
      。e:如標本溶血嚴重經(jīng)上述裂解處理后
      ，再加等體積酚-氯仿抽提
      、冷乙醇沉淀DNA
      ，加10μlDW溶解待檢
      。
      2
      、PCR擴增
      (1)引物設(shè)計
      。以HSVDNA聚合酶的高保守區(qū)為檢測靶序列以確保特異性
      。設(shè)計3個引物，一個上游共同性引物
      ，DNAP5(5′ATGGTGAAAACATCGACATGTACGG3′)：二個下游特異性引物，DNAP3-1(5′CCTCGCGTTCGTCCTCGTCCTCC3′)和DNAP3-2(5′CCTCCTTGTCGAGGCCCCGAAAC3′)
      ，可以分別擴增出HSV-1469bpDNA片段(1981～2359)、HSV-2391bp片段(1561～1953)：從二型PCR擴增產(chǎn)物中設(shè)計了一個不分型的特異性探針HSVP35‘GGCGTAGTAGGCGGGGATGTCGCG3‘)
      。
      (2)PCR實驗體系。取模板10μl：DNAP50.5(0.2μmol/L)：DNAP3-10.5μl(0.2μmol/L)：DNAP3-20.5μl(0.2μmol/L)：4×dNTP8μl(4×200μmol/L)：10×dNTP8μl(4×200μmol/L);10×緩沖液10μl：DMSO4μl;加DW65.5μl;石蠟油30μl.
      。
      水煮(96℃～100℃)7min
      加TaqDNA聚合酶1μl;(2.5U)
      72℃4min
      ↓
      95℃40s
      ↓
      65℃60s→72℃70s
      ↓33個循環(huán)
      70℃4min
      3.擴增產(chǎn)物的檢測和分析
      (1)瓊脂糖凝膠電泳染色法：取擴增產(chǎn)物20μl加樣品緩沖液4μl混勻后，點樣于2%瓊脂糖凝膠板
      ，70V電泳15～20min
      ，溴化乙錠(EB)染色5min
      ，于紫外燈下觀察結(jié)果在溴酚藍后面有一條或二條亮紅帶為陽性結(jié)果
      ，HSV-2帶在前
      ，HSV-1帶在后
      ，無帶則為陰性結(jié)果
      。
      (2))XhoI酶譜法：取HSV-1型PCR產(chǎn)物50μl加XhoI50U
      ，37℃1h后，置3%瓊脂糖凝膠中
      ，70V電泳15～20min
      ，可產(chǎn)生46bp片段帶(引物后面);與正常PCR產(chǎn)物比較
      ，XhoI酶切后的大片段電泳位置前移
      。
      (3)Southern印跡法：PCR產(chǎn)物20μl經(jīng)電泳分離后
      ，用變性液處理60min
      ，再用中和液處理90min
        ，轉(zhuǎn)移至硝酸纖維素膜上：80℃烤膜2h
        ，42℃預(yù)雜交(雜交液中)30min，加入32p標記HSVP3探針后
      ，42℃雜交過夜;次日用1%SDS/PBSpH7.2，42℃洗15min
      ，0.5%SDS/PBSpH7.2，42℃洗15min;膜置X線暗盒內(nèi)放射性自顯影12～15h
      ，顯影為陽性，不顯影為陰性
      。
      (二)套式PCR
      套式PCR(nestedprimers-polymerasechainreaction
      ，NP-PCR)是通過“外側(cè)”
      、“內(nèi)側(cè)”兩對引物
      ，即一對擴增較大DNA片段的“外側(cè)”引物和一對位于擴增產(chǎn)物中再擴增小片段的“內(nèi)側(cè)”引物
      ，這樣兩次連續(xù)放大可以提高PCR檢測的靈敏度
      ，保證產(chǎn)物的特異性
      。但該方法不能分型
      ，能100%檢出HSV-1，50%檢出HSV-2
      ，應(yīng)改進分型檢測HSV，更好地在臨床應(yīng)用和基礎(chǔ)研究中推廣應(yīng)用
      。
      1
      、標本處理：
      (1)標本采集同上
      (2)DNA制備：①腦脊液：取100μlCSF水煮15min，加入250μl無水乙醇
      ，放-30℃10min;離心10000g30min
      ，去上清
      ，30℃干燥后
        ，加入10μlDW;②腦組織細胞：取沉淀物加100μl蛋白酶K消化裂解液
        ，56℃作用1h
        ，水煮10min;取上清加入等體積酚一氯仿(V/V)
        ，輕搖10min
        ，離心10000r/min×10min;取水相
        ，加入250μlDW溶解
        。
      2
        、PCR擴增
      (1)引物設(shè)計：選擇HSV1糖蛋白D基因為檢測靶基因。
      NP-PCR的引物和探針序列
      “外”引物
      BJHSV1.1ATCACGGTAGCCCGGCCGTGTGACA19-43
      BJHGV1.2CATACCGGAACGCACCACACAA218-239
      “內(nèi)引物”
      BJHSV1.3CCATACCGACCACACCGACGA51-79
      BJHSV1.4CGTAGTTGGTCGTTCGCGCTGAA166-188
      探針
      BJHSV-1PROTACGAGGAGGAGCTGTATAACAAAGTCTGT96-125
      (2)PCR實驗體系和程序:反應(yīng)體積為50μl;模板10μl;BJHSV1.10.5μl(0.2pmol/L);BJHSV1.20.5μl(0.2pmol/L);10×緩沖液5μl;4×dNTP4μl(4×200mmol/L);DW27μl;石蠟油30μl
        。循環(huán)參數(shù)為95℃30s;55℃30s;72℃60s;循環(huán)20次，取其擴增產(chǎn)物1μl加入含有BJHSV1.3和BJHSV1.4反應(yīng)體系中進行套式擴增
        ，先95℃變性2min，循環(huán)參數(shù)為95℃30s;55℃30s;72℃60s;循環(huán)30次后
        ，72℃延伸5min;。
      (3)擴增產(chǎn)物分析：
      ①瓊脂糖凝膠電泳染色法：
      取擴增產(chǎn)物10μl點樣于2%瓊脂糖凝膠中
        ，70V電泳15-20min
        ，溴化乙錠染色5min
      ，于紫外燈下觀察結(jié)果
      ，在溴酚蘭后面有一條
      ，或二條亮紅條帶為陽性結(jié)果
      ，HSV-2帶在前
      ，HSV-1帶在后
      ，無帶則為陰性結(jié)果。
      ②Southern印跡法：
      PCR產(chǎn)物20μl經(jīng)電泳分離后
      ，用變性液處理60min
      ，再用中和液處理90min
      ，轉(zhuǎn)移至硝酸纖維素膜上
      ，80℃烤膜2h
      ，42℃預(yù)雜交(雜交液中)30min
      ，加入32P標記HSV探針后，42℃雜交過夜
      ，次日用1%SDS/PBSpH7。2
      ，42℃洗15min，0.5%SDS/PBSpH7.2
      ，42℃洗15min;膜置X線暗盒內(nèi)
      ，放射性自顯影12-15h
        ，
        ，顯影為陽性
        ，不顯影為陰性
        。
      (三)、聚合酶鏈反應(yīng)―酶譜法(polymerasechainreaction-endonucleasecleavagePCR-EC)
      具有經(jīng)濟廣泛等特點;不僅能一次性分型檢測HSV-1
        ，HSV-2，EBV
        ，CMV四種病毒，而且方法本身快速
        、方便
        、無放射線損傷
        ，易被實驗室接受
        ?div   id="m50uktp"   class="box-center">  ？蓹z出3個CFU的HSV1
      ，靈敏度高
      ，能檢測出中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染第1dCSF中HSVDNA陽性結(jié)果
      ，并可用于藥物治療效果的評價
      。由于病毒的變異性
      ，會出現(xiàn)酶切點突變丟失現(xiàn)象
      ，從而造成酶切陰性結(jié)果
      。對此可以通過型特異性探針或序列分析解決
      。
      1.標本處理
      (1)標本采集
      ，方法同上。
      (2)DNA模板制備：每份標本取200μl
      ，按200μg/ml加入蛋白酶k，56℃作用1h;
      加入等體積的酚―氯仿(v/v)輕搖10min
      ，離心1000r/min×5min;取水相加入500μl(2.5倍體積)無水乙醇
      ，-20℃過夜沉淀DNA
      ，離心15000r/min×5min
      ，吸去液體
      ，30℃干燥后
      ，加蒸餾水25μl溶解，待檢
      。
      2.引物設(shè)計：
      P1，5′CGACTTTGCCAGCCTGTACC3′
      P2
      ，5′AGTCCGTGTCCCCGTAGATG3′
      (1)PCR實驗體系：
      反應(yīng)體積100μl;模板10μl;P10.5μl(10pmol/L)，P20.5μl(10pmol/L);4×dNTP4μl(4×200mmol/L);10×緩沖液10μl
      ，DMSD5μl
      ，DW65μl
      ，循環(huán)參數(shù)為94℃60s;60℃60s;72℃60s;循環(huán)40次72℃延伸4min
      。
      (2)擴增產(chǎn)物檢測與酶切分型.
      ①第一步電泳鑒定:取10μlPCR產(chǎn)物加4μl樣品緩沖液
      ，加入2%瓊脂糖凝膠板
      ，70V電泳(5-20min)加EB染色5min后，紫外燈下觀察
      ，可初步鑒定擴增產(chǎn)物大小
      。
      ②酶切分析：分別取20μlPCR產(chǎn)物于2個Eppendorf管中
      ，加入50μl無水乙醇
      ，-20℃沉淀DNA，再分別用20μlSmal和BamHI反應(yīng)緩沖液溶解
      ，加入SmaI或BamHI50U于相應(yīng)Eppendorf管內(nèi)，37℃作用1h
      。
      ③第二步電泳分型，取10μlPCR酶切物加4μl樣品緩沖液
      ，加到2%瓊脂糖凝膠中
      ，70V電泳
      ，15-20min后
      ，EB染色5min
      ，與同步加入未酶切的PCR產(chǎn)物相對照
      。紫外燈下觀察，結(jié)果如下:
      PCR-EC法檢測四種病毒結(jié)果
      病毒型號靶片段SmaIBamHI
      HSV1518bp476bp+42bp
      HSV2518bp―225+293bp
      EBV524bp100bp+424bp277bp+247bp
      CMV589bp不需酶切
      ，第一步電泳就可以區(qū)分
      (四)用RT-PCR檢測單純皰疹病毒
      RNA的聚合酶鏈反應(yīng)(RNA-PCR)，可能通過檢測HSV不同期的RNA
      ，這不僅可診斷HSV感染，而且有利于HSV的潛伏期感染機制的深入研究
      。
      RT-PCR是以RNA為模板經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)(RT)產(chǎn)生cDNA
      ，再以cDNA為模板進行PCR擴增以達到檢測目的。因此
      ，RNA-PCR也可稱為RT-PCR。
      1
      、標本處理：
      組織塊細胞總RNA提取
      ，取100mg組織標本
      ，加1ml硫氰酸胍變性液
      ，于勻漿器中，室溫研磨均勻后
      ，移入2.5mlEppendorf管中
      。依次加入0.1ml3mol/L(pH4.0)NaAc
      ，1ml水飽和酚和0.2ml氯仿一異戊醇混勻
      ，用力振搖10s，置冰浴15min
      。10000g4℃，離心20min
      ，取上清水相(上層DNA、下層DNA和變性蛋白質(zhì))加入等體積異丙醇置-20℃1h
      ，沉淀RNA
      。離心15000r/min×10min
      ，棄上清，RNA重新用0.3ml硫氰酸胍變性液溶解
      ，再加0.3ml異丙醇沉淀，-20℃1h
      ，沉淀RNA.離心15000r/min×10min
      ，去上清
      ，沉淀RNA用75%冷乙醇洗一次
      ，真空干燥。.加10μlTE緩沖液(pH7.4)溶解
      ，低溫保存?zhèn)溆?臨用前冰浴溶解。
      2
      、PCR擴增:
      (1)引物設(shè)計:選擇HSV-1ICPO基因(極早期)為檢測靶基因.設(shè)計2個引物，
      P15′GGATCCTCACGTGGTTACCCGCGGTCT3′
      P25′AAGCTTCCGGGGCCGTCCCCGCGGGCG3′可以擴增ICPO中266bp序列
      。
      1個探針：5′CCGGCTGGAGCCGCCGCACCCTGCT3′
      。
      (2)PCR實驗體系：總反應(yīng)體積為50μl
      ，模板10μl(0.25-1.0μg)P11μl(20pmol/L);P21μl(20pmol/L);4×dNTP4μl(200μmol/L);10×緩沖液5μl;AMV(逆轉(zhuǎn)錄酶)2μl(50U);DW26μl;循環(huán)參數(shù)
      ，94℃變性2min后94℃50s，60℃60
      ，72℃60s
      ，循環(huán)40次后72℃延伸5min
      。
      3
      、擴增產(chǎn)物的鑒定：
      (1)瓊脂糖凝膠電泳染色法：取10μlPCR擴增產(chǎn)物加4μl樣品緩沖液，混勻后加樣2%瓊脂糖凝膠板
      ，70V電泳15-20min，EB染色5min
      。紫外燈下觀察擴增條帶。
      (2)Southern印跡雜交法：用32P標記的特異性探針檢測PCR產(chǎn)物
      ，方法同上
      。
      總之
      ，在HSV感染性疾病的臨床診斷中
      ，PCR能對前病毒或潛伏期低復制的HSV特異性靶DNA片段進行擴增檢測，遠較DNA探針敏感
      ，并能在血清中抗體出現(xiàn)前就可以檢出。因此
        ，PCR無論是作為基礎(chǔ)研究手段，還是作為臨床檢驗診斷方法
        ，均具有廣闊的前景
        。
      五、病理組織學診斷
      細胞內(nèi)水腫
        ，基底層形成大水皰，病灶周圍有多核巨細胞浸潤
      ，特別是多核白細胞與淋巴細胞充斥于病灶中間。
      1.原發(fā)性GH
      (1)潛伏期：為2～7天
      ，常為3～5天
      。
      (2)好發(fā)部位：男性多發(fā)生于龜頭
      、冠狀溝
      、尿道口
      、陰莖體及陰囊
      。女性好發(fā)于外陰
      、陰道及宮頸
      。兩性均可見于肛周
      、大腿及臀部。
      (3)皮損形態(tài)及演變：患處先有燒灼感
      ，隨即出現(xiàn)多個群集的紅色斑丘疹，并迅速變成小水皰
      。皰液起初清亮，以后漸變?yōu)槟撔?div   id="jpandex"   class="focus-wrap mb20 cf">。水皰易破潰
      ，形成糜爛或淺潰瘍
      ，伴明顯疼痛
      。之后結(jié)痂而愈，病程約2～4周
        。
      (4)全身癥狀：發(fā)病前或發(fā)病時可有全身癥狀，如發(fā)熱
        、頭痛、全身不適
        、頸項強直和骶2～4段感覺異常，或有排尿困難和白帶增多
        。幾乎所有患者均可伴腹股溝淋巴結(jié)腫大及壓痛。
      2.復發(fā)性GH
      約在原發(fā)性GH痊愈后1～4個月發(fā)生
        。首次HSV-2感染后1年內(nèi)近60%的患者復發(fā)
        ，第1年內(nèi)可復發(fā)4～6次
        ，以后復發(fā)次數(shù)減少
        。eves等發(fā)現(xiàn)在生殖器感染者中，HSV-1感染者復發(fā)率為14%
        ，而HSV-2感染者則有60%復發(fā)
        。
      復發(fā)性GH患者可有上述激發(fā)因素，或有前驅(qū)癥狀
        ，全身癥狀較輕，復發(fā)部位多在原處
        ，病程也較短
        ，皮損約經(jīng)10天左右即消退
        。由于病損反復發(fā)作
        ，難以控制
      ，患者易出現(xiàn)精神負擔和性功能障礙
      ，甚至發(fā)生抑郁癥等。但其損害與原發(fā)性者甚為相似
      。
      3.特殊型GH
      (1)男性同性戀者GH：本病僅次于淋球菌引起的肛門直腸炎。有人從62例有肛門直腸癥狀但淋球菌檢查陰性的男性同性戀者中
      ，29%檢出了HSV-2
      。臨床表現(xiàn)多為嚴重的肛門、直腸疼痛
      ，其他癥狀為便秘
      、肛門內(nèi)有分泌物
      、里急后重和發(fā)熱等
      。部分病人肛周有水皰或潰瘍
      。
      (2)孕婦和新生兒GH：孕婦患GH后
      ，其后果嚴重。對妊娠GH患者HSV-2攜帶者來說
      ，最重要的是傳染給新生兒。當產(chǎn)道內(nèi)存在HSV-2時
      ，可有40%～60%的新生兒遭受感染
      ，感染嚴重者可致死亡
        。
      在妊娠早期，患GH的孕婦可影響胎兒
        ，導致流產(chǎn)或死胎
        。新生兒的先天性感染，出生時可出現(xiàn)帶狀分布的皰疹
        、癲癇發(fā)作、出血傾向與肝脾腫大
        。如通過產(chǎn)道感染或胎膜早破而發(fā)生逆行感染時，輕者出生后數(shù)日至數(shù)周可無臨床癥狀
      ，早期可僅有吃奶較差
      、興奮
      ，以后可發(fā)生病毒血癥或皰疹性腦炎
      ，重者發(fā)生播散性HSV感染，可出現(xiàn)高熱
      、呼吸困難、出血及中樞神經(jīng)系統(tǒng)病變
      ，預(yù)后不良
      。
      因此
      ，妊娠足月患GH者
      ，如時間允許，應(yīng)每周從陰道及子宮頸取材
      ，檢查有無病毒感染，若細胞學或病毒培養(yǎng)陽性而羊膜尚完整
      ，或破裂后不足6h
      ，建議剖宮產(chǎn)
      ，以避免胎兒經(jīng)陰道分娩而發(fā)生新生兒HSV感染。
      HSV-2感染與宮頸癌：有證據(jù)表明
      ，生殖器HSV-2感染可能與宮頸癌的發(fā)生有關(guān)。血清流行病學檢查發(fā)現(xiàn)，宮頸癌患者血清中抗HSV-2抗體較對照組婦女明顯增高
      。Nahmias等發(fā)現(xiàn)，GH患者發(fā)生宮頸非典型增生者為對照組的2倍
      ，而發(fā)生原位癌者則為對照組的8倍
      。近年來研究證明
      ，患侵襲性宮頸癌和癌前期病變的婦女宮頸脫落細胞中,HSV-2抗原陽性率明顯高于對照組
      ，這種HSV-2抗原位于腫瘤細胞的胞質(zhì)內(nèi)，提示為腫瘤細胞表達的病毒抗原
      。有人發(fā)現(xiàn)，宮頸有高度非典型增生
      、原位癌及鱗狀細胞癌者的活檢組織中，用間接免疫熒光染色可發(fā)現(xiàn)其中的HSV-2抗原
      。應(yīng)用DNA-RNA原位雜交技術(shù)在宮頸癌和癌前期組織中67%可發(fā)現(xiàn)HSV-2特異性mRNA
      。Frenkel等在宮頸癌組織中檢出HSV-2的DNA。還有作者從手術(shù)切除后經(jīng)放射的宮頸癌病變組織中分離出了HSV-2
      。
      HSV-2感染與HIV感染與其他生殖器潰瘍性疾病一樣，GH增加了HIV感染的危險性
      。HSV感染是HIV感染的輔助因子。在HIV感染者尤其是HIV感染的同性戀者中
      ，HSV-2感染率更高
      ，且GH的并發(fā)癥多而嚴重
      。在AIDS患者中
      ，耐阿昔洛韋(無環(huán)鳥苷)的HSV毒株感染多見。
      根據(jù)病史
      、癥狀和皮膚或黏膜表現(xiàn)，一般不難作出診斷
      。必要時可進行實驗室檢查
      ，以明確病原體
      。
      中醫(yī)病機和辨證本病多因體內(nèi)蘊熱
      ，外感毒邪
      ，熱毒相結(jié)
      ，肝膽二經(jīng)濕熱下注而生;或因肌膚虛弱
      ，邪毒留膚，遇熱即發(fā)
      。
      中醫(yī)辨證分型
      1.濕熱下注型
      主證：患處水皰、糜爛
      、癢痛交作
      ，大便秘結(jié)
      ，小便短赤
      。舌紅，苔黃膩
      ，脈弦滑數(shù)。
      辨證：濕熱下注
      ，外感毒邪
      。
      2.肝腎虧損型
      主證：病情反復發(fā)作
      ，兼有心煩寐少
      ，腰酸頭昏
      ，食少乏味
      ，口干咽燥。舌質(zhì)淡
      ，脈沉細。
      辨證：清熱化濕
      ，養(yǎng)肝滋腎
      。
      生殖器皰疹的癥狀
      1.原發(fā)性生殖器皰疹：從感染到發(fā)病一般為3-5天
      ，患處先有燒灼感
      ，然后出現(xiàn)紅斑，繼之在紅斑的基礎(chǔ)上發(fā)生多群紅色丘疹
      ，并感到熱癢，不久即可變成小水庖
      ，數(shù)日后水皰變?yōu)槟撔裕坪罂尚纬擅訝€,最后可結(jié)痂痊愈
      。整個病程15-20天
      。
      2.復發(fā)性生殖器皰疹。大約有60%的原發(fā)患者,會在一年內(nèi)再次復發(fā),第1年至少復發(fā)數(shù)次,第2年則逐漸減少
      。復發(fā)后一般癥狀比較輕，也沒有淋巴結(jié)腫大
      ，病程也短
      。
      引起復發(fā)的誘因
      ，多為感冒發(fā)燒
      、上火、月經(jīng)來潮
      、性交過頻、疲勞過度
      、消化不良和氣候干燥等
      。
      復發(fā)時
      ，患處可感到有熱刺和癢感
      。
      看你那癥狀，有很大的可能是
      ，這個是傳染的。所以
      ，趕緊去當?shù)卣?guī)的大醫(yī)院
      ，檢查去
      。要真是
      ，就趕緊治。真的傳染的
      。
      是否可以解決您的問題？
      

          
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      。不過，出汗過多和過少
      ，其實都不是好現(xiàn)象
      。我們也可以從一些出汗的部位，來判斷我們的身體是否健康      
 
                
            
      
                
      
                    
                        
      中老年人容易牙齒松動,教你方法預(yù)防
      
                        
      牙齒松動的情況是現(xiàn)在很多人都存在的問題了
        ，特別是對于中老年人來說，往往牙齒松動的情況是比較嚴重的了
        ，在這時候我們很多人都沒有辦法很好的去吃飯了
 
                
            
      
                
      
                    
                        
      盤點帶狀皰疹癥狀有哪些,如何預(yù)防
        ？
      
                        
      帶狀皰疹是很常見的，一般是病毒引起的皮膚病
        。帶狀皰疹感染后有一定的潛伏性，當患者出現(xiàn)抵抗力差以及疲憊
        、感冒時
 
                
            
 
                
            
 
                
            
      
                



 

 






      


   

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