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    文獻(xiàn)綜述冠突散囊菌研究進(jìn)展

    小小茶農(nóng) 2023-07-17 22:17:05

    在眾多茶種類中,以其獨(dú)具特色的冠突散囊菌( Eurotiumcristatum)及突出的降脂減肥功效而聞名

    ,冠突散囊菌的大小
    ,多少
    ,分布廣泛與否是最直接的判斷獲磚茶質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)
    。由于冠突散囊菌的存在,使得獲磚茶的色
    、香
    、味得以不同于其他茶類
    ,并且具有抗氧化促消化降脂減肥、抑菌
    、抗癌保健功效
    ,使人們?nèi)找嬷匾暪谕簧⒛揖墓δ苎芯俊?/p>

    劉石泉等采用改良PDA培養(yǎng)基平板梯度稀釋法對“金湘益’,牌獲磚茶中的真菌進(jìn)行了分離純化和計數(shù)

    。實(shí)驗(yàn)共分離得到了5種真菌,其中優(yōu)勢菌為蠟葉散囊菌(Eurotium herbariorum )}其在茶樣中的含量高達(dá)4.98 x10“個/g
    。并通過分子鑒定
    、平板形態(tài)特征鑒定、顯微形態(tài)特征鑒定及菌株聚類分析的方法鑒定了其余4種真菌分別為青霉(Peni-cillium sp .)
    、產(chǎn)紫青霉(Penicillium purpurogenum )
    、醬油曲霉( Aspergillus sojae )
    、產(chǎn)黃青霉( P._chrysogenum )
    。研究人員指出優(yōu)勢菌不是冠突散囊菌的可能原因?yàn)檫x菌時只是隨機(jī)挑選一個單菌落,且兩種菌的18 SrDNA相似度為99%
    。雖然不同獲磚茶種類中優(yōu)勢菌存在差異
    ,但其都是散囊菌的生理種或變異種
    。研究結(jié)果表明黑茶發(fā)酵是一個多種菌協(xié)同作用的過程

    黃浩等將從2008年的金湘益牌獲磚茶中分離純化得到的“金花”菌在PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng),并選取長勢較好的“金花”菌進(jìn)行繼代培養(yǎng)

    。之后將其轉(zhuǎn)接于20%蔗糖察氏培養(yǎng)基和察氏培養(yǎng)基上
    ,恒溫28℃培養(yǎng)并觀察
    、記錄
    。通過光學(xué)顯微鏡和掃描電鏡觀察結(jié)果結(jié)合DNA序列分析鑒定結(jié)果表明從發(fā)花散茶中分離得到的“金花”菌為散子囊菌屬(Eurotiumlink ex Fires)冠突散囊菌,與傳統(tǒng)獲磚茶中的“金花’
    ,菌為同一真菌

    湖南農(nóng)大的劉仲華等運(yùn)用分光光度法和薄層色譜法對獲磚茶發(fā)酵過程中的水溶性和脂溶性色素進(jìn)行了研究

    。其結(jié)果顯示,獲磚茶色澤品質(zhì)的形成與色素物質(zhì)的變化在很大程度上依賴于發(fā)花過程中冠突散囊菌的作用
    。主要表現(xiàn)為:經(jīng)發(fā)花過程
    ,葉綠色降解產(chǎn)物,尤其是深色降解產(chǎn)物脫鎂葉綠素a,b和脫鎂葉綠酸醋a, b顯著增加

    同時Q一胡蘿卜素和葉黃素也明顯增多

    。茶多酚經(jīng)發(fā)酵氧化為茶紅素、茶褐素和茶黃素
    。這些色素的形成使得獲磚茶外觀呈現(xiàn)黃褐色或黑褐色
    ,并使其湯色呈橙紅或橙黃色。隨著冠突散囊菌繁殖數(shù)量的增加
    ,上述色素的含量也隨之增加。

    劉作易等用PDA,CZqM3Y,M40Y和40%蔗糖蛋白脈培養(yǎng)基對冠突散囊菌進(jìn)行培養(yǎng)

    ,通過觀察菌落特征
    ,證明了冠突散囊菌在繁殖過程中分泌了褐色水溶性色素,這些色素可以改善茶湯顏色
    。同時在生長良好時產(chǎn)生濃郁香氣,增加茶香的同時減少了茶葉中的青草氣味
    ,改善茶葉品質(zhì)
    。另一方面,在用CZG和40%蔗糖蛋白脈液體培養(yǎng)基培養(yǎng)冠突散囊菌后發(fā)現(xiàn)菌絲體中富含巧種氨基酸
    ,且含有大量必需氨基酸
    ,其中谷氨酸含量最高可達(dá)4.32%
    。此研究在一定程度上為邊疆人民以冠突散囊菌多少來評價獲磚茶優(yōu)劣提供了理論依據(jù)

    1冠突散囊菌的發(fā)酵條件研究

    楊撫林等對冠突散囊菌的生長條件進(jìn)行了闡述。調(diào)研結(jié)果顯示冠突散囊菌為好氧菌

    ,其耐干燥
    、耐高溫且滲透能力強(qiáng)
    。試驗(yàn)優(yōu)化培養(yǎng)條件結(jié)果顯示:冠突散囊菌最適生長溫度為28-30℃
    ,最高生長溫度為38℃;最適生長pH值5,生長pH值范圍為3-6;生長初期溫度應(yīng)控制在25℃
    ,濕度為70%
    ,中期將溫度提高到28-32。而在之后對冠突散囊菌液體發(fā)酵工藝優(yōu)化試驗(yàn)探索了不同發(fā)酵條件及不同培養(yǎng)基對“金花”均菌絲體生長的影響
    ,并確定了最優(yōu)發(fā)酵條件為:在含黑茶0.8%并以6%蔗糖為碳源的液體培養(yǎng)基中生長效果最佳;培養(yǎng)溫度為恒溫30℃、初始pH值為5.5,接種量1%(抱子濃度為5.0-6.0 X 180 mL)
    、轉(zhuǎn)速為120 r/min
    。本研究首次對“金花”菌液體發(fā)酵工藝進(jìn)行了優(yōu)化研究,為今后的冠突散囊菌相關(guān)研究提供了理論支持

    王增盛等用HPLC等方法研究了獲磚茶發(fā)酵過程中含碳和含氮化合物的變化與其品質(zhì)形成之間的關(guān)系

    。結(jié)果顯示:在獲磚茶發(fā)花過程中游離氨基酸含量顯著降低;而咖啡堿雖含量較大但變化幅度很小,茶堿和可可堿雖含量較小但變化幅度很大;粗纖維的變化總趨勢為顯著下降;兒茶素各組分也均呈減少趨勢
    。試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)在發(fā)酵過程中含氮量相較于原料提高了28%
    ,說明微生物在生長繁殖過程中雖然將有機(jī)氮源消耗但同時又將無機(jī)氮源轉(zhuǎn)化為了自身所需蛋白質(zhì)。兒茶素的變化則形成了獲磚茶特有的色澤及湯色
    。同時,由于微生物胞外酶的作用增加了獲磚茶中的可溶性物質(zhì)并降低了難容大分子或高分子物質(zhì)的含量

    呂嘉楊等通過保溫提取法

    ,優(yōu)選出冠突散囊菌所產(chǎn)黃色系物質(zhì)的最佳提取工藝條件為:料液比1:30,溫度600C
    ,提取時間1h
    ,最高得率可達(dá)0.83
    。通過TLC法
    、HPLC法、紅外光譜及紫外光譜法
    ,選取口一胡蘿卜素和番茄紅素為標(biāo)準(zhǔn)品
    ,對黃色系物質(zhì)進(jìn)行結(jié)構(gòu)驗(yàn)證分析及可能結(jié)構(gòu)的預(yù)測。結(jié)果表明
    ,冠突散囊菌中黃色系物質(zhì)的最大吸收波長為394nm,并且含有C-O, C = C
    ,不含C二C
    ,因此不是口一胡蘿卜素、番茄紅素
    ,可能是葉黃素一類

    李玉婷等以麥鼓為培養(yǎng)基

    。研究了發(fā)酵時間和培養(yǎng)基中營養(yǎng)物對冠突散囊菌產(chǎn)消化酶活性的影響
    。進(jìn)而探明該菌產(chǎn)消化酶的能力。其結(jié)果表明
    ,冠突散囊菌產(chǎn)脂肪酶的活性在發(fā)酵6d時達(dá)到11.42U/g
    。淀粉酶的活性在發(fā)酵Sd時達(dá)到254 U/g。而在最適培養(yǎng)基條件下發(fā)酵7d產(chǎn)中勝蛋白酶的酶活力達(dá)到237U/g
    。產(chǎn)堿性蛋白酶的酶活力達(dá)到236U/g。經(jīng)過對獲磚茶中冠突散囊菌對消化酶活性的研究
    ,進(jìn)一步揭示了其具有調(diào)節(jié)人體消化等功效

    曹聰?shù)妊芯苛斯谕簧⒛揖腆w培養(yǎng)的培養(yǎng)條件,發(fā)現(xiàn)PDA及CZG培養(yǎng)基均適合冠突散囊菌的培養(yǎng)

    ,其生長最適溫度為25-35℃
    ,在28℃時生長較快
    ,且最適生長pH值為5
    ,這與楊撫林先前研究的液體培養(yǎng)條件結(jié)果相近。另外
    ,相較于無機(jī)氮源
    ,有機(jī)氮源可以更好的促進(jìn)“金花”均的生長,且氨態(tài)氮
    、酞胺態(tài)氮和無機(jī)態(tài)氮可促進(jìn)菌袍子的萌發(fā)。研究同時發(fā)現(xiàn)
    ,該菌在D一果糖碳源上生長最好
    ,而不能將瓊脂糖、淀粉和單寧用作碳源
    。培養(yǎng)基中NaCI的濃度為2%時“金花”均生長較好,Zn和Mn也可明顯促進(jìn)菌絲生長

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