平邑甜茶谷氨酸受體同源基因(MhGLR36)的克隆、表達(dá)及轉(zhuǎn)化
根據(jù)GenBank中檢索到的蘋果谷氨酸受體基因(GLRs)的EST序列,采用RACE方法克隆平邑甜
茶谷氨酸受體同源基因MhGLR。該基因全長(zhǎng)3600 bp,編碼946個(gè)氨基酸,推測(cè)分子質(zhì)量為107.809 ku。將MhGLR編碼氨基酸與其他已知的谷氨酸受體氨基酸進(jìn)行同源性比較,發(fā)現(xiàn)MhGLR屬于谷氨酸受體第三亞家族(GLR3),且與擬南芥AtGLR3.6的同源關(guān)系最近,故將其命名為MhGLR3.6(GenBank注冊(cè)號(hào):EF432572)。親水性分析表明,MhGLR3.6包含有動(dòng)物離子型谷氨酸受體(iGLuRs)的6個(gè)具有重要功能的保守結(jié)構(gòu)域。熒光定量PCR結(jié)果顯示,MhGLR3.6在根、莖、葉中均有所表達(dá),且在葉中的表達(dá)量最高;L-谷氨酸和IBA處理能夠誘導(dǎo)根中MhGLR3.6的表達(dá)。成功構(gòu)建了35S::MhGLR3.6反義表達(dá)載體,并對(duì)‘皇家嘎拉’蘋果進(jìn)行農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化。
完成機(jī)構(gòu):[1]山東農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝科學(xué)與工程學(xué)院國(guó)家作物生物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,泰安271018 [2]山東省沂水縣果茶服務(wù)中心,沂水276400
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