離子交換色譜法一步純化PK簡(jiǎn)單易控

上海松力生物技術(shù)有限公司與上海第一生物化學(xué)藥業(yè)公司日前采用離子交換色譜法制備出比活達(dá)300單位/毫克蛋白質(zhì)的高純度胰激肽原酶（PK）。研究人員稱，這一工藝操作簡(jiǎn)便、易控，適用于大生產(chǎn)，至今在國內(nèi)還未見相關(guān)研究結(jié)果的報(bào)道。

胰激肽原酶（PK）又稱為胰激肽釋放酶（商品名為血管舒緩素），其普遍存在于人體的胰臟、頜下腺與唾液中，其中以胰臟中含量最高。PK在體內(nèi)作用于激肽原釋放出激肽，從而起到擴(kuò)張毛細(xì)血管、增加血管的通透性、改善微血管循環(huán)、調(diào)整血壓的作用。其還可作用于活化因子激活纖溶酶原，缺乏這一因子將使纖溶時(shí)間延長。

據(jù)技術(shù)人員介紹，提純PK的方法很多，但在1998年一些相關(guān)研究進(jìn)展使該品比活提高后，近年來相關(guān)工藝研究較少。

研究人員采用離子交換樹脂120毫升處理PK粗品3克，上樣時(shí)峰形很好，各種蛋白質(zhì)峰充分拉開，而PK的活性峰集中在3、4號(hào)峰上。用丙酮沉淀后，效價(jià)近300單位/毫克，這為制備高純度的PK提供了可能。同時(shí)，其他蛋白質(zhì)峰的峰形也保持很好，從而有助于實(shí)現(xiàn)在分離PK的同時(shí)分離出其他有用的蛋白酶，實(shí)現(xiàn)多酶聯(lián)產(chǎn)。

在該工藝流程中，上樣量與樹脂體積比為1誜25，上樣量大是該方法用于大生產(chǎn)的優(yōu)勢(shì)。另外，在純化中間體的過程中，流速可達(dá)3毫升/分鐘以上，這種快速的處理方法可使生產(chǎn)周期大為縮短，而且采用這種方法純化中間體只需一步就可獲得符合中國藥典要求的產(chǎn)品，方法簡(jiǎn)便、易控。

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