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      血清微小差異將改變實驗結(jié)果(血液標(biāo)本放置時間對檢驗結(jié)果的影響)
      
        
      
            夕陽紅
            2024-05-29 12:12:45
        
      

        
      
           
      血清微小差異將改變實驗結(jié)果
      2016年10月11日訊 當(dāng)Alastair Khodabukus試著在美國加州大學(xué)戴維斯分校新實驗室制作肌肉纖維時，他發(fā)現(xiàn)一些奇怪的事情：這些組織在痙攣
      。數(shù)年來
      ，他一直在用同樣的鼠源克隆技術(shù)培養(yǎng)纖維，但這些卻與眾不同
      。與之前他在英國鄧迪的實驗室培育出的纖維相比
      ，它們需要更多的葡萄糖，而包含的能促進(jìn)更快放松及不易疲勞的蛋白質(zhì)更少
      。Khodabukus認(rèn)為
      ，這些不同歸因于美國牛的飼養(yǎng)方式不同。
      大多數(shù)大學(xué)實驗室采用牛胎兒血清（FBS）培養(yǎng)細(xì)胞
      。牛的飲食
      、地理位置、年齡
      、是否使用激素或抗體
      ，以及牛胎兒孕周等均會產(chǎn)生影響。FBS被作為培養(yǎng)基的補充物
      ，它能影響人造組織的厚度
      ，并能使產(chǎn)物模擬細(xì)胞活動，甚至影響表面接受器對給定化合物的響應(yīng)
      。
      “FBS就像籠罩在頭上的烏云
      ，我們不知道它實際是什么或不是什么
      。”Khodabukus說
        。
      而血清只是研究人員在研究細(xì)胞時需要考慮的諸多因素之一
        。在去年召開的美國國立衛(wèi)生研究院（NIH）細(xì)胞培養(yǎng)和再生研討會上，生物制藥公司“吉利德科學(xué)”的癌癥生物學(xué)家Richard Neve就擔(dān)憂
        ，研究人員將變得不堪重負(fù)
        。“很多實驗室面臨大量問題
        ?div   id="m50uktp"   class="box-center">  ！?/p>
      一般而言，相關(guān)研究的最基本步驟是確保細(xì)胞的基因一致性
        。而且
        ，細(xì)胞行為也會受到濃度、增殖率
        、培養(yǎng)基
        、污染物和培養(yǎng)時間等的影響。而血清是細(xì)胞培養(yǎng)基中最常見的補充物
        ，并至少應(yīng)保持一致
        。通常，人類血清包含數(shù)千不同的蛋白質(zhì)和小分子
        。而FBS復(fù)雜性相似
        ，且富含支持胎兒快速生長的物質(zhì)。
      致力于研發(fā)血清替代物的Essential制藥公司的首席科學(xué)館Adam Elhofy表示
        ，在血清中
        ，大部分細(xì)胞并不與血液直接接觸，而是被液體包裹著
      ?div   id="d48novz"   class="flower left">
      ！把謇镞€富含荷爾蒙、生長因子和其他信號分子
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      ！?/p>
      走向無血清
      為了克服障礙，試劑公司已經(jīng)開發(fā)出無血清培養(yǎng)基
      ?div   id="4qifd00"   class="flower right">
      ？茖W(xué)家也在追求“生物工藝”的應(yīng)用，例如
      ，藥用蛋白質(zhì)和疫苗的生產(chǎn)
      。而那些了解細(xì)胞對培養(yǎng)條件微小變化十分敏感的干細(xì)胞研究者也對此十分熱衷。
      出于對一致性的擔(dān)憂和推動轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)的愿望
      ，越來越多的研究者開始注意如何對待他們的細(xì)胞
      。MilliporeSigma 公司研究部戰(zhàn)略營銷主管Ken Yoon表示
      ，這些都在鼓勵科學(xué)家遠(yuǎn)離血清。
      但無血清培養(yǎng)基并非總是可行的或?qū)嶋H的
      ?div   id="4qifd00"   class="flower right">
      ！叭绻覀兡懿辉儆肍BS，而是有一些更確定的東西
      ，所有人都同意這是件大事
      。”美國國家綜合醫(yī)學(xué)科學(xué)研究所Jon Lorsch說
      ，“問題是這有多切合實際
      ？我們不知道答案?div   id="4qifd00"   class="flower right">
      ！?/p>
      大部分無血清劑型只針對特定細(xì)胞類型或相關(guān)細(xì)胞系群
      。例如，供應(yīng)商為中國倉鼠卵巢細(xì)胞提供無血清培養(yǎng)基
      。但ScienCell實驗室研發(fā)副總監(jiān)Jennifer Welser-Alves指出
      ，這些培養(yǎng)基并不適用于所有細(xì)胞類型：許多原始細(xì)胞被移出后，仍需要血清才能生長
      ?div   id="m50uktp"   class="box-center">  ！澳隳茏龅脑黾蛹?xì)胞并保持其增長的所有事情都是必要的?div   id="d48novz"   class="flower left">
      ！彼f。一些培養(yǎng)基要求增加至少2%的FBS
      ，低劑量的血清有助于減少可變性
      。
      不過，芒特普林森的培養(yǎng)基顧問Paul Price指出
      ，即便具有可行性
      ，很多研究者也不希望花費時間或冒著風(fēng)險，掐斷細(xì)胞的血清供應(yīng)
      ?div   id="d48novz"   class="flower left">
      ！白?980年以來，人們一直說血清將成為歷史
      ，但到現(xiàn)在它仍然流行
      。”
      另外
      ，Khodabukus提到
      ，骨骼肌纖維尚沒有商用培養(yǎng)制劑。他花費兩年時間修改了配方
      ，結(jié)合了數(shù)十種生長因子和其他信號分子
      。但當(dāng)纖維的性能隨不同血清出現(xiàn)變化時
      ，打亂了他的研究計劃?div   id="d48novz"   class="flower left">
      ！拔矣媱澯媒窈笏袝r間研究這一領(lǐng)域
      ，如果能成功，則將能用于全世界每個實驗室
      ?div   id="d48novz"   class="flower left">
      ！?/p>
      無法擺脫的血清
      Khodabukus 前博士后導(dǎo)師、加州大學(xué)戴維斯分校的Keith Baar則依靠一種更普通的解決方案：將實驗室溫度降低以儲存血清
      。當(dāng)血清快要用盡時
      ，他會訂購和檢驗至少4批貨源，觀察它們培養(yǎng)的細(xì)胞的效能
      ，找出與當(dāng)前實驗最匹配的
      。
      之后購買100瓶同樣的血清。雖然這會花費其實驗室2.5萬美元
      ，但這也意味著他們能繼續(xù)實驗
      ，不用花數(shù)月時間檢驗更多的血清?div   id="jfovm50"   class="index-wrap">？屏_拉多大學(xué)癌癥生物學(xué)家Matthew Sikora指出
      ，不檢驗其血清的研究者可能陷入麻煩。
      Sikora使用乳腺癌細(xì)胞系研究“弱雌激素”的效應(yīng)
      。他購買了經(jīng)過木炭處理的血清
      ，以便剝離類膽固醇激素和其他多脂分子。然后他檢驗了血清中的細(xì)胞含有或缺乏雌激素受體
      ，如果血清中的激素能被有效移除
      ，那么這些細(xì)胞的增值效率應(yīng)該一致。
      去年
      ，他和同事不得不停止試驗6個月
      ，當(dāng)時連續(xù)批次的血清均無法達(dá)到其實驗?zāi)繕?biāo)。不同的荷爾蒙容量會“完全推翻”對一種癌癥藥物如何工作的解釋
      。Sikora認(rèn)為
      ，血清中的未知變化能解釋他與合作者不能得到一致結(jié)果的原因。
      即便研究人員進(jìn)行批次檢驗
      ，他們也可能不知道應(yīng)當(dāng)注意什么
      。但奧蘭治兒童醫(yī)院細(xì)胞和發(fā)育生物學(xué)家Mariella Simon表示，研究人員永遠(yuǎn)需要仔細(xì)
      。理論上
      ，他們應(yīng)該準(zhǔn)備充足的血清完成整個實驗。如果在使用一批新血清時，他們應(yīng)該確保沒有試劑發(fā)生變化
      ，并有足夠的就血清進(jìn)行比對
      ，以避免因血清變化而出現(xiàn)的奇怪結(jié)果。
      另外
      ，污染也會擾亂實驗
      。最陰險的破壞者之一就是支原體。這種微小的細(xì)菌能偷偷溜過消毒器的邊緣
      ，并能抵御多種抗生素
      。它能吃掉細(xì)胞的營養(yǎng)并能改變DNA及蛋白質(zhì)合成。
      傳統(tǒng)的支原體檢驗需要數(shù)周
      ，并仍會遺漏一些稀有菌株
      。美國模式培養(yǎng)物保藏所標(biāo)準(zhǔn)化工作負(fù)責(zé)人Yvonne Reid提到，基于聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）的檢驗?zāi)芨焖贉?zhǔn)確地找到答案
      。
      為了避免血清被污染
      ，一些研究人員還選擇使用伽馬射線。包括支原體在內(nèi)的一些普通污染物均對射線十分敏感
      。但射線也會損害蛋白質(zhì)和生物活性分子的生長
      。許多供應(yīng)商也提供經(jīng)過伽馬射線照射過的血清，國際血清產(chǎn)業(yè)聯(lián)盟也成立了工作組檢驗這些血清的效果
      。
      錯誤無處不在
      細(xì)胞的物理環(huán)境影響深遠(yuǎn)
      。美國波士頓威斯研究所研究人員發(fā)現(xiàn)，培養(yǎng)基僅出現(xiàn)變形和流動就會改變細(xì)胞
      。不同品牌的實驗室器皿能將不同的化學(xué)物質(zhì)釋放到培養(yǎng)基中
      ，并擾亂細(xì)胞代謝研究。
      經(jīng)過認(rèn)真考慮的試劑添加也能以意想不到的方式改變細(xì)胞代謝：抗生素能損害線粒體活性
      。即便實驗室冰箱的玻璃門也能摧毀研究
      ，原因是培養(yǎng)基中的一些化學(xué)物質(zhì)對光線十分敏感。 此外
      ， 細(xì)胞在給定的培養(yǎng)皿中的生長也不相同。
      在這些實驗中
      ，細(xì)胞本身就變成最大的變數(shù)
      。英國倫敦大學(xué)學(xué)院癌癥研究員John Masters指出，沒有簡單快速的方法能知道細(xì)胞是否符合要求
      。
      美國猶他州細(xì)胞培養(yǎng)顧問Leland Foster則認(rèn)為
      ，“實驗室要遠(yuǎn)離這種變量，需要有專業(yè)人員指導(dǎo)
      ?div   id="jfovm50"   class="index-wrap">！彼赋觯囵B(yǎng)細(xì)胞最好由細(xì)胞培養(yǎng)專家進(jìn)行
      ，而非實習(xí)生
      ，前者能分辨出細(xì)胞在“微笑還是皺眉頭”
      。
      在快速生長或相對穩(wěn)定階段的細(xì)胞，其反應(yīng)并不相同
      。如果它們在培養(yǎng)基中的時間過長
      ，還會發(fā)生其他變化，并影響增殖
      。即便能確證細(xì)胞的遺傳統(tǒng)一性
      ，細(xì)胞的其他重要屬性也無法確證。
      Reid提到
      ，由于存在如此多的不確定性
        ，研究人員需要一周或更多時間優(yōu)化細(xì)胞生長，并在實驗開始前總結(jié)生長概況
        。生長概況能告知研究人員何時收獲細(xì)胞
        ，何時檢測等。
      而重要的是
      ，研究人員必須時刻保持警惕
      。“沒有一套實驗規(guī)程適合所有人
      ?div   id="jpandex"   class="focus-wrap mb20 cf">！盢eve說。但忽視細(xì)胞的研究人員將會遇到更多困難
      ?div   id="jpandex"   class="focus-wrap mb20 cf">！坝腥说牟┦繉W(xué)位泡湯了、撥款丟了
      ，甚至幾年的工作白干了
      ，原因就是沒有進(jìn)行簡單的質(zhì)量控制?div   id="jpandex"   class="focus-wrap mb20 cf">！盡asters說
      。
      血液標(biāo)本放置時間對檢驗結(jié)果的影響
       血液標(biāo)本放置時間對檢驗結(jié)果的影響
                             　　你知道血液標(biāo)本放置時間對檢驗結(jié)果有什么影響嗎?你對血液標(biāo)本放置時間對檢驗結(jié)果的影響了解嗎?下面是我為大家?guī)淼难簶?biāo)本放置時間對檢驗結(jié)果的影響的知識，歡迎閱讀
      。
          
              　　血液標(biāo)本放置時間對檢驗結(jié)果的影響        　　1
      、對血清電介質(zhì)濃度測定的影響，試驗結(jié)果表明血清鉀放置1h 后與即刻比較明顯升高
      ，差異有顯著意義( P<0.05 )
      ，血清氯放置5h 后即刻比較明顯下降，差異有顯著意義(P<0.05 )
      ，所以標(biāo)本采集后應(yīng)在允許留置時間內(nèi)送檢
      。
             　　2、 對乳酸濃度的影響，血樣在室溫下放置 15min 
      ，乳酸濃度明顯升高
      ，高差異有顯著意義( P<0.05 )，在 4 ℃ 冰箱內(nèi)放置 30min 
      ，乳酸濃度升高不明顯
      ，放置 1h 差異有顯著意義( P<0.05 )。故采血后應(yīng)立即檢測
        ，室溫下送檢時間不超過 15 min 
        ，在 4 ℃ 低溫條件下送檢時間可延長 30min .
             　　3 、對血糖測定結(jié)果的.影響
        ，血清葡萄糖因血細(xì)胞的糖酵解每小時會降低 7% 
        ，故采血后應(yīng)立即檢測，如無條件
        ，應(yīng)及時分離血清
        。
             　　4 、對心肌酶譜的影響
        ，試驗結(jié)果顯示肌酸激酶的活性隨時間的延長而不斷下降
        ，乳酸脫氫酶由于紅細(xì)胞的通透性改變，血清中酶活性不斷上升
        ，羥丁酸脫氫酶活性也在放置過程中不斷上升
        ，谷草轉(zhuǎn)氨酶的活性影響不大。血標(biāo)本如不能及時測定
        ，有必要將血清分離出來保存
        。
             　　5 、對血氨測定結(jié)果的影響
        ，試驗結(jié)果顯示標(biāo)本放置不同時間血氨測定結(jié)果均較即刻測定明顯升高
        ，因此為了保證測定結(jié)果的準(zhǔn)確性，采血后必須密封并立即送檢
        。
             　　6 
        、采集的血液標(biāo)本，要檢測多種項目時
        ，最好一種項目一管血液
        ，防止標(biāo)本污染。在不能分開時
      ，要注意檢驗的順序
      ，如一管血液要檢測生化和 PCR 
      ，那必須先檢測 PCR 后再檢測生化
      ，防止檢測生化后的標(biāo)本污染對 PCR 檢測結(jié)果的影響。
             　　7、 各實驗室的防寒
      、降溫設(shè)備不同
      ，因而應(yīng)注意溫度對檢驗標(biāo)本的影響、溫度達(dá) 30 ℃ 以上時
      ，對一些試驗項目有顯著影響
      。
             　　8、據(jù)報道
      ，測定總蛋白的標(biāo)本在 30℃ 以上室溫放置 8h 后
      ，對結(jié)果就有影響， 24h 后更顯著
      。
          ;
      

          
      本文地址:http://www.mcys1996.com/jiankang/293859.html.
      
          
      
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      手出好多小水泡
        ，還特別癢
        ？一定要分清是汗皰疹還是手蘚！
      
                        
      對于女性朋友來講手可謂是“第二張臉”
        ，白皙
        、光滑、修長的雙手
        ，不僅看起來十分靈巧而且還能提升個人氣質(zhì)
        。不過生活中也有很多人，不僅手部皮膚特別粗糙
                
                  ，還特別癢一定要分清是汗皰疹還是手蘚
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      ，還特別癢？一定要分清是汗皰疹還是手蘚
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      ？如何才能緩解
      ？一文科普，不妨看看
      ！
      
                        
      癌痛指的是癌性疼痛
      ，是由于患上各種癌癥，引起了神經(jīng)受壓等問題
      ，從而使患者產(chǎn)生的疼痛現(xiàn)象
      。有很多人認(rèn)為，癌痛屬于陣發(fā)性的疼痛
      ，只要適當(dāng)服用藥物就能夠起到快速止痛的作用
      。但有不少人認(rèn)為，癌痛屬于劇烈且持續(xù)性的疼痛
                
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