，涂抹后直徑約為1 cm的薄層。

固定

將載玻片在火焰上方快速來回通過一兩次

，以載玻片的加熱面接觸手背皮膚，不覺過燙為佳，待冷卻后再在火焰上方來回通過一兩次，再冷卻，這樣重復(fù)操作直到薄層干了為止。

染色

在制好的片上滴一滴草酸銨結(jié)晶紫

，染色1 min后用水洗，注意水流不要直接對(duì)準(zhǔn)薄層。

媒染

加路哥式碘液大概一滴

，作用1 min后用水沖洗，注意流水不要直接往薄層上沖，用過濾紙吸干。

脫色

用95%乙醇脫色，一般脫色時(shí)間大概為30 s。這一步是革蘭氏染色的關(guān)鍵

，必須嚴(yán)格掌握好，如果脫色時(shí)間過長(zhǎng)則會(huì)把陽(yáng)性菌誤認(rèn)為陰性菌;如果脫色不夠則容易被誤認(rèn)為是陽(yáng)性菌。

水洗后用過濾紙吸干

。

復(fù)染

滴加0.5%的番紅染色一滴

，液染色10～30 s后，用自來水沖洗。

觀察

干燥后

，用油鏡鏡檢觀察，并做好記錄。

白色念珠菌和革蘭氏菌都是真菌嗎

真菌

，是一種真核生物。真菌是生物界中很大的一個(gè)類群，世界上已被描述的真菌約有 1萬屬12萬余種（屬與種都是單位，且屬大于種）真菌的形態(tài)多樣，一般分為單細(xì)胞和多細(xì)胞，酵母菌屬于單細(xì)胞，而霉菌和蕈菌（大型真菌）都屬于多細(xì)胞的真菌，它們歸屬于不同的亞門。大型真菌是指能形成肉質(zhì)或膠質(zhì)的子實(shí)體或菌核，大多數(shù)屬于擔(dān)子菌亞門，少數(shù)屬于子囊菌亞門。
白色念珠菌，是一種真菌，通常存在于正常人口腔，上呼吸道，腸道及陰/道，一般在正常機(jī)體中數(shù)量少，不引起疾病，當(dāng)機(jī)體免疫功能或一般防御力下降或正常菌群相互制約作用失調(diào)，則本菌大量繁殖并改變生長(zhǎng)形式（芽生菌絲相）侵入細(xì)胞引起疾病。
革蘭氏陽(yáng)性菌和革蘭氏陰性菌是利用革蘭氏染色法來鑒別的兩大類細(xì)菌。自然界存在多種多樣病菌，如何將這些病菌加以鑒別、分類，并選擇有效藥物進(jìn)行治療這是很重要的問題。革蘭氏染色法的意義就在于鑒別細(xì)菌，把眾多的細(xì)菌分為兩大類，革蘭氏陽(yáng)性菌和革蘭氏陰性菌。

革蘭氏染色的介紹

革蘭氏染色法是細(xì)菌學(xué)中廣泛使用的一種鑒別染色法，1884年由丹麥醫(yī)師Gram創(chuàng)立

。未經(jīng)染色之細(xì)菌，由于其與周圍環(huán)境折光率差別甚小，故在顯微鏡下極難觀察。染色后細(xì)菌與環(huán)境形成鮮明對(duì)比，可以清楚地觀察到細(xì)菌的形態(tài)、排列及某些結(jié)構(gòu)特征，而用以分類鑒定。革蘭氏染色屬?gòu)?fù)染法。

什么是革蘭氏染色體

你說的是不是革蘭氏染色法啊?
革蘭氏染色法是細(xì)菌學(xué)中廣泛使用的一種鑒別染色法,1884年由丹麥醫(yī)師Gram創(chuàng)立.未經(jīng)染色之細(xì)菌,由于其與周圍環(huán)境折光率差別甚小,故在顯微鏡下極難觀察.染色后細(xì)菌與環(huán)境形成鮮明對(duì)比,可以清楚地觀察到細(xì)菌的形態(tài)

、排列及某些結(jié)構(gòu)特征,而用以分類鑒定.革蘭氏染色屬?gòu)?fù)染法.
方法簡(jiǎn)介
是細(xì)菌學(xué)中廣泛使用的一種鑒別染色法,這種染色法是由一位丹麥醫(yī)生漢斯·克里斯蒂安·革蘭（Hans Christian Gram,1853年－1938年）于1884年所發(fā)明,最初是用來鑒別肺炎球菌與克雷白氏肺炎菌之間的關(guān)系.
未經(jīng)染色之細(xì)菌,由于其與周圍環(huán)境折光率差別甚小,故在顯微鏡下極難觀察
陽(yáng)性紫色陰性紅色
.染色后細(xì)菌與環(huán)境形成鮮明對(duì)比,可以清楚地觀察到細(xì)菌的形態(tài)、排列及某些結(jié)構(gòu)特征,而用以分類鑒定.
原理 通過結(jié)晶紫初染和碘液媒染后,在細(xì)胞壁內(nèi)形成了不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物,革蘭氏陽(yáng)性菌由于其細(xì)胞壁較厚、肽聚糖網(wǎng)層次較多且交聯(lián)致密,故遇乙醇或丙酮脫色處理時(shí),因失水反而使網(wǎng)孔縮小,再加上它不含類脂,故乙醇處理不會(huì)出現(xiàn)縫隙,因此能把結(jié)晶紫與碘復(fù)合物牢牢留在壁內(nèi),使其仍呈紫色；而革蘭氏陰性菌因其細(xì)胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄且交聯(lián)度差,在遇脫色劑后,以類脂為主的外膜迅速溶解,薄而松散的肽聚糖網(wǎng)不能阻擋結(jié)晶紫與碘復(fù)合物的溶出,因此通過乙醇脫色后仍呈無色,再經(jīng)沙黃等紅色染料復(fù)染,就使革蘭氏陰性菌呈紅色.

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