據(jù)新華社訊 美國北卡羅來納大學(xué)近日報(bào)告說,該校的一個科研小組成功破譯了艾滋病病毒(HIV)的完整基因組。這對于人類理解HIV感染人體的機(jī)制,尋找抗艾新療法提供了有力幫助。相關(guān)論文發(fā)表在8月6日出版的英國《自然》雜志上。
研究小組負(fù)責(zé)人凱文·威克斯介紹說,HIV的遺傳信息由單鏈核糖核酸(RNA)分子攜帶,比雙鏈脫氧核糖核酸(DNA)分子攜帶遺傳信息的情況更難破譯。在此之前,一些研究人員僅僅解碼過HIV基因組某一小部分的遺傳信息。此次,威克斯等人采用新型化學(xué)技術(shù),得到了整個HIV基因組的編碼。結(jié)果顯示,HIV的整個基因組是由兩條單鏈RNA組成的,每一條都包含近一萬個核苷酸。
專家發(fā)現(xiàn),HIV的RNA結(jié)構(gòu)對病毒感染周期中的多個階段都有影響。所謂感染周期,是指病毒從識別到進(jìn)入細(xì)胞并進(jìn)行攻擊的一系列步驟。研究人員認(rèn)為,掌握完整的HIV基因組后,他們就可以設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn),查明某個特定基因在病毒感染人體過程中發(fā)揮什么作用,從而有望在這一基礎(chǔ)上開發(fā)出對付HIV的新藥。
松獅犬全身都是蓬松濃密的直毛,單一毛色,棕褐色、紅色、銀灰色和黑色都有;小耳朵混雜在長毛里,舌頭相當(dāng)特殊,是藍(lán)黑色。
西施犬 原產(chǎn)地:中國
用途: 中國宮廷犬
特征:曾是中國皇室最喜愛的品種。有較濃密、略帶波浪形的長毛,看起來有點(diǎn)像一朵菊花,所以又俗稱菊花狗。有敏銳的聽覺,可根據(jù)腳步聲識別自己的主人。
大麥町犬 原產(chǎn)地:前南斯拉夫
用途: 跟馬車
特征:毛皮平滑且有光澤,白底上有醒目的散點(diǎn)圖案,幼犬出生時(shí)是純白色,后來才會長出黑圓點(diǎn);耳朵呈錐形,耳尖為圓弧裝;個性冷靜,機(jī)敏。
迷你雪納瑞犬原產(chǎn)地:德國
用途: 捕鼠
起源: 迷你雪納瑞屬于梗犬類,源起于19世紀(jì)末期的德國,是唯一在梗犬類中不含英國血統(tǒng)的品種
體形知識:體形比例:體形為12至14英寸。身體結(jié)實(shí),差不多是正方形,身高和長差不多一樣,骨量充足。 頭部強(qiáng)壯、呈矩形,寬度從耳至眼逐漸縮小,至鼻尖近一步縮小 。
標(biāo)準(zhǔn):迷你雪納瑞是一種強(qiáng)健的、活潑的梗類犬,和其近親:標(biāo)準(zhǔn)雪納瑞在總體形態(tài)方面類似,并一樣具有機(jī)敏、活躍的性格。
1.HIV是艾滋病
人類免疫缺陷病毒
Human Immunodeficiency Virus(HIV)
1981年,人類免疫缺陷病毒在美國首次發(fā)現(xiàn)。該病毒破壞人體的免疫能力,導(dǎo)致免疫系統(tǒng)的失去抵抗力,而導(dǎo)致各種疾病及癌癥得以在人體內(nèi)生存,發(fā)展到最后,導(dǎo)致艾滋病(獲得性免疫缺陷綜合征)。在世界范圍內(nèi)導(dǎo)致了近1200萬人的死亡,超過3000萬人受到感染。
參見: 艾滋病
[編輯本段]一、生物學(xué)診斷
(一)形態(tài)結(jié)構(gòu)
病毒呈球形,直徑100~120nm,電鏡下可見一致密的圓錐狀核心,內(nèi)含病毒RNA分子和酶(逆轉(zhuǎn)錄酶、整合酶、蛋白酶),病毒外層囊膜系雙層脂質(zhì)蛋白膜,其中嵌有g(shù)p120和gp41,分別組成刺突和跨膜蛋白。囊膜內(nèi)面為P17蛋白構(gòu)成的衣殼,其內(nèi)有核心蛋白包裹RNA。
(二)基因結(jié)構(gòu)及編碼蛋白的功能
HIV基因組長約9.2~9.7kb,含gag、Pol、env、3個結(jié)構(gòu)基因,及至少6個調(diào)控基因(Tat Rev、Nef、Vif、VPU、Vpr)并在基因組的5′端和3′端各含長末端序列。HIV LTR含順式調(diào)控序列,它們控制前病毒基因的表達(dá)。已證明在LTR有啟動子和增強(qiáng)子并含負(fù)調(diào)控區(qū)。
1.gag基因能編碼約500個氨基酸組成的聚合前體蛋白,經(jīng)蛋白酶水解形成P17,P24核蛋白,使RNA不受外界核酸酶破壞。
2.Pol基因編碼聚合酶前體蛋白,經(jīng)切割形成蛋白酶、整合酶、逆轉(zhuǎn)錄酶、核糖核酸酶H,均為病毒增殖所必需。
3.env基因編碼約863個氨基酸的前體蛋白并糖基化成gp160,gp120和gp41。gp120含有中和抗原決定簇,已證明HIV中和抗原表位,在gp120 V3環(huán)上,V3環(huán)區(qū)是囊膜蛋白的重要功能區(qū),在病毒與細(xì)胞融合中起重要作用。gp120與跨膜蛋白gp41以非共價(jià)鍵相連。gp41與靶細(xì)胞融合,促使病毒進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。實(shí)驗(yàn)表明gp41亦有較強(qiáng)抗原性,能誘導(dǎo)產(chǎn)生抗體反應(yīng)。
4.TaT 基因編碼蛋白可與LTR結(jié)合,以增加病毒所有基因轉(zhuǎn)錄率,也能在轉(zhuǎn)錄后促進(jìn)病毒mRNA的翻譯。
5.Rev基因產(chǎn)物是一種順式激活因子,能對env和gag中順式作用抑制序(Cis-Acting repression sequance,Crs) 去抑制作用,增強(qiáng)gag和env基因的表達(dá),以合成相應(yīng)的病毒結(jié)構(gòu)蛋白。
6.Nef基因編碼蛋白P27對HIV基因的表達(dá)有負(fù)調(diào)控作用,以推遲病毒復(fù)制。該蛋白作用于HIv cDNA的LTR,抑制整合的病毒轉(zhuǎn)錄??赡苁荋IV在體內(nèi)維持持續(xù)感集體所必需。
7.Vif基因?qū)IV并非必不可少,但可能影響游離HIV感染性、病毒體的產(chǎn)生和體內(nèi)傳播。
8.VPU基因?yàn)镠IV-1所特有,對HIV的有效復(fù)制及病毒體的裝配與成熟不可少。
9.Vpr基因編碼蛋白是一種弱的轉(zhuǎn)錄激活物,在體內(nèi)繁殖周期中起一定作用。
HIV-2基因結(jié)構(gòu)與HIV-1有差別:它不含VPU基因,但有一功能不明VPX基因。核酸雜交法檢查HIV-1與HIV-2的核苷酸序列,僅40%相同。env基因表達(dá)產(chǎn)物激發(fā)機(jī)體產(chǎn)生的抗體無交叉反應(yīng)。
(三)培養(yǎng)特性
將病人自身外周或骨髓中淋巴細(xì)胞經(jīng)PHA刺激48~72小時(shí)作體外培養(yǎng)(培養(yǎng)液中加IL2)1~2周后,病毒增殖可釋放至細(xì)胞外,并使細(xì)胞融合成多核巨細(xì)胞,最后細(xì)胞破潰死亡。亦可用傳代淋巴細(xì)胞系如HT-H9、Molt-4細(xì)胞作分離及傳代。
HIV動物感染范圍窄,僅黑猩猩和長臂猿,一般多用黑猩猩做實(shí)驗(yàn)。用感染HIV細(xì)胞或無細(xì)胞的HIV濾液感染黑猩猩,或?qū)⒏腥綡IV黑猩猩血液輸給正常黑猩猩都感染成功,邊續(xù)8個月在血液和淋巴液中可持續(xù)分離到HIV,在3~5周后查出HIV特異性抗體,并繼續(xù)維持一定水平。但無論黑猩猩或長臂猿感染后都不發(fā)生疾病。
(四)抵抗力
HIV對熱敏感。56℃30分失去活性,但在室溫保存7天,仍保持活性。不加穩(wěn)定劑病毒-70℃冰凍失去活性,而35%山梨醇或50%胎牛血清中-70℃冰凍3個月仍保持活性。對消毒劑和去污劑亦敏感,0.2%次氯酸鈉0.1%漂白粉,70%乙醇,35%異丙醇、50%乙醚、0.3%H2O20.5%來蘇爾處理5′能滅活病毒,1%NP-40和0.5%triton-X-100能滅活病毒而保留抗原性。對紫外線、γ射線有較強(qiáng)抵抗力。
[編輯本段]二、病毒性與免疫性
(一)傳染源和傳播途徑
HIV感染者是傳染源,曾從血液、精液、陰道分泌液、眼淚、乳汁等分離得HIV。傳播途徑有:
1.性傳播:通過男性同性戀之間及異性間的性接觸感染。
2.血液傳播:通過輸血、血液制品或沒有消毒好的注射器傳播,靜脈嗜毒者共用不經(jīng)消毒的注射器和針頭造成嚴(yán)重感染,據(jù)我國云南邊境靜脈嗜毒者感染率達(dá)60%。
3.母嬰傳播:包括經(jīng)胎盤、產(chǎn)道和哺乳方式傳播。
(二)致病機(jī)制
HIV選擇性的侵犯帶有CD4分子的,主要有T4淋巴細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞等。細(xì)胞表面CD4分子是HIV受體,通過HIV囊膜蛋白gp120與細(xì)胞膜上CD4結(jié)合后由gp41介導(dǎo)使毒穿入易感細(xì)胞內(nèi),造成細(xì)胞破壞。其機(jī)制尚未完全清楚,可能通過以下方式起作用:
1.由于HIV包膜蛋白插入細(xì)胞或病毒出芽釋放導(dǎo)致細(xì)胞膜通透性增加,產(chǎn)生滲透性溶解。
2.受染細(xì)胞內(nèi)CD-gp120復(fù)合物與細(xì)胞器(如高爾基氏體等)的膜融合,使之溶解,導(dǎo)致感染細(xì)胞迅速死亡。
3.HIV感染時(shí)未整合的DNA積累,或?qū)?xì)胞蛋白的抑制,導(dǎo)致HIV殺傷細(xì)胞作用。
4.HIV感染細(xì)胞表達(dá)的gp120能與未感染細(xì)胞膜上的CD4結(jié)合,在gp41作用下融合形成多核巨細(xì)胞而溶解死亡。
5.HIV感染細(xì)胞膜病毒抗原與特異性抗體結(jié)合,通過激活補(bǔ)體或介導(dǎo)ADCC效應(yīng)將細(xì)胞裂解。
6.HIV誘導(dǎo)自身免疫,如gp41與T4細(xì)胞膜上MHCⅡ類分子有一同源區(qū),由抗gp41抗體可與這類淋巴細(xì)胞起交叉反應(yīng),導(dǎo)致細(xì)胞破壞。
7.細(xì)胞程序化死亡(programmed cell death ):在艾滋病發(fā)病時(shí)可激活細(xì)胞凋亡 (Apoptosis) 。如HIV的gp120與CD4受體結(jié)合;直接激活受感染的細(xì)胞凋亡。甚至感染HIV的T細(xì)胞表達(dá)的囊膜抗原也可啟動正常T細(xì)胞,通過細(xì)胞表面CD4分子交聯(lián)間接地引起凋亡CD+4細(xì)胞的大量破壞,結(jié)果造成以T4細(xì)胞缺損為中心的嚴(yán)重免疫缺陷,患者主要表現(xiàn):外周淋巴細(xì)胞減少,T4/T8比例配置,對植物血凝素和某些抗原的反應(yīng)消失,遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)下降,NK細(xì)胞、巨噬細(xì)胞活性減弱,IL2、γ干擾素等細(xì)胞因子合成減少。病程早期由于B細(xì)胞處于多克隆活化狀態(tài),患者血清中l(wèi)g水平往往增高,隨著疾病的進(jìn)展,B細(xì)胞對各種抗原產(chǎn)生抗體的功能也直接和間接地受到影響。
艾滋病人由于免疫功能嚴(yán)重缺損,常合并嚴(yán)重的機(jī)會感染,常見的有細(xì)胞(鳥分枝桿菌)、原蟲(卡氏肺囊蟲、弓形體)、真菌(白色念珠菌、新型隱球菌)、病毒(巨細(xì)胞病毒、單純皰疹病毒,乙型肝炎病毒),最后導(dǎo)致無法控制而死亡,另一些病例可發(fā)生Kaposis肉瘤或惡性淋巴瘤。此外,感染單核巨噬細(xì)胞中HIV呈低度增殖,不引起病變,但損害其免疫功能,可將病毒傳播全身,引起間質(zhì)肺炎和亞急性腦炎。
HIV感染人體后,往往經(jīng)歷很長潛伏期(3~5年或更長至8年)才發(fā)病,表明HIV在感染機(jī)體中,以潛伏或低水平的慢性感染方式持續(xù)存在。當(dāng)HIV潛伏細(xì)胞受到某些因素刺激,使?jié)摲腍IV激活大量增殖而致病,多數(shù)患者于1-3年內(nèi)為死亡。
(三)免疫性
HIV感染后可刺激機(jī)體生產(chǎn)囊膜蛋白(Gp120,Gp41)抗體和核心蛋白(P24)抗體。在HIV攜帶者、艾滋病病人血清中測出低水平的抗病毒中和抗體,其中艾滋病病人水平最低,健康同性戀者最高,說明該抗體在體內(nèi)有保護(hù)作用。但抗體不能與單核巨噬細(xì)胞內(nèi)存留的病毒接觸,且HIV囊膜蛋白易發(fā)生抗原性變異,原有抗體失去作用,使中和抗體不能發(fā)的應(yīng)有的作用。在潛伏感染階段,HIV前病毒整合入宿主細(xì)胞基因組中,不被免疫系統(tǒng)識別,逃避免疫清除。這些都與HIV引起持續(xù)感染有關(guān)。
[編輯本段]三、微生物學(xué)診斷
檢測HIV感染者體液中病毒抗原和抗體的方法,操作方便,易于普及應(yīng)用,其中抗體檢測尤普通。但HIv P24抗原和病毒基因的測定,在HIV感染檢測中的地位和重要性也日益受到重視。
(一)抗體檢測
主要有酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)和免疫熒光試驗(yàn)(IFA)。ELISA用去污劑裂解HIV或感染細(xì)胞液提取物作抗原,IFA用感染細(xì)胞涂片作抗原進(jìn)行抗體檢測,如果發(fā)現(xiàn)陽性標(biāo)本應(yīng)重復(fù)一次。為防止假陽性,可做Western blot (WB,蛋白印跡法)進(jìn)一步確證。
WB法是用聚丙烯酰胺凝膠電泳將HIV蛋白進(jìn)行分離,再經(jīng)傳移電泳將不同蛋白條帶轉(zhuǎn)移于硝酸纖維膜上,加入病人血清孵育后,用抗人球蛋白酶標(biāo)抗體染色,就能測出針對不同結(jié)構(gòu)蛋白抗體,如抗gp120、gp41、P24抗體,特異性較高。
(二)抗原檢測
用ELISA檢測P24抗原,在HIV感染早期尚未出現(xiàn)抗體時(shí),血中就有該抗原存在.由于P24量太少,陽性率通常較低。現(xiàn)有用解離免疫復(fù)合物法或濃縮P24抗原,來提高敏感性。
(三)核酸檢測
用PCR法檢測HIV基因,具有快速、高效、敏感和特異等優(yōu)點(diǎn),目前該法已被應(yīng)用于HIV感染早期診斷及艾滋病的研究中。
(四)病毒分離
常用方法為共培養(yǎng)法,即用正常人外周血液分離單個核細(xì)胞,加PHA刺激并培養(yǎng)后,加入病人單個核細(xì)胞診斷及艾滋病的研究中。
[編輯本段]四、艾滋病毒的特點(diǎn)
HIV是艾滋病毒的英文縮寫,它的特點(diǎn)主要為以下幾點(diǎn):
1、主要攻擊人體的T淋巴細(xì)胞系統(tǒng)。
2、一旦侵入機(jī)體細(xì)胞,病毒將會和細(xì)胞整合在一起終生難以消除。
3、病毒基因變化多樣。
4、廣泛存在于感染者的血液、精液、陰道分泌物、唾液、尿液、乳汁、腦脊液、有神經(jīng)癥狀的腦組織液,其中以血液、精液、陰道分泌物中濃度最高。
5、對外界環(huán)境的抵抗力較弱,對乙肝病毒有效的消毒方法對艾滋病病毒消毒也有效。
6、感染者潛伏期長,死亡率高。
7、艾滋病病毒的基因組比已知任何一種病毒基因都復(fù)雜。
[編輯本段]五、“窗口期”
人體感染了艾滋病病毒后,一般需要2周時(shí)間才能逐漸產(chǎn)生病毒抗體?!按翱谄凇笔侵笍娜梭w感染艾滋病毒后到外周血液中能夠檢測出病毒抗體的這段時(shí)間,一般為2周—3個月。在這段時(shí)間內(nèi),血液中檢測不到病毒抗體,但是人體具有傳染性。只有等到“窗口期”過后,血液中才會有足夠數(shù)量的艾滋病毒抗體可以檢測出來。但是不能忽視的是,不同個體對艾滋病毒的免疫反應(yīng)不一,抗體出現(xiàn)的時(shí)間也不一致,尤其對近期具有高危行為的人,一次實(shí)驗(yàn)結(jié)果陰性不能輕易排出感染,應(yīng)隔2—3個月再檢查一次。
[編輯本段]六、提示可能患有艾滋病的癥狀
艾滋病的常見癥狀有:
(1)持續(xù)廣泛淋巴結(jié)腫大,特別是頸、腋和腹股溝淋巴結(jié)。淋巴結(jié)腫大直徑1厘米左右,堅(jiān)硬、不痛、可移動,時(shí)間超過三個月。
(2)數(shù)周以來不明原因發(fā)熱和盜汗。
(3)數(shù)周以來出現(xiàn)難以解釋的嚴(yán)重疲乏。
(4)食欲下降,2個月內(nèi)體重減輕超過原體重的10%。
(5)數(shù)周以來出現(xiàn)不明原因的慢性腹瀉,呈水樣,每日10次以上。
(6)氣促、干咳數(shù)周。
(7)皮膚、口腔出現(xiàn)平坦和隆起的粉紅、紫紅色大斑點(diǎn),不痛不癢。
(8)咽、喉部出現(xiàn)白斑。男性陰部出現(xiàn)鱗屑性斑,癢。 女性肛門瘙癢,陰道癢,白帶多。
(9)頭痛、視線模糊。 當(dāng)出現(xiàn)上面三個以上癥狀又有不潔性接觸史時(shí),應(yīng)及時(shí)去醫(yī)院檢查。
[編輯本段]七、艾滋病病毒感染人體后的癥狀
艾滋病病毒感染早期,亦稱急性期,多數(shù)無癥狀,但有一部分人在感染數(shù)天至3個月時(shí),出現(xiàn)像流感或傳染性單細(xì)胞增多癥樣癥狀,如發(fā)熱,寒戰(zhàn)、關(guān)節(jié)疼、肌肉疼、頭疼、咽痛、腹瀉、乏力,夜間盜汗和淋巴結(jié)腫大,皮膚疹子是十分常見的癥狀,這之后,進(jìn)入無癥狀感染期。
[編輯本段]八、艾滋病病潛伏期或無癥狀期的時(shí)長
艾滋病病毒侵入人體后一部分人出些流感樣或傳染性單核細(xì)胞增多癥樣癥狀,一些人一直無癥狀,直接進(jìn)入無癥狀期。艾滋病潛伏期的長短個體差異極大,這可能與入侵艾滋病病毒的類型、強(qiáng)度、數(shù)量、感染途徑以及感染者自身的免疫功能、健康狀態(tài)、營養(yǎng)情況、年齡、生活和醫(yī)療條件、心理因素等有關(guān)。一般為6-10年,但是有大約5-15%的人在2-3年內(nèi)就進(jìn)展為艾滋病,我們稱為快速進(jìn)展者,另外還有5%的患者其免疫功能可以維持正常達(dá)12年以上,稱為長期不進(jìn)展者。
[編輯本段]九、艾滋病病毒的消毒方法
艾滋病病毒在外界抵抗力較弱,比乙型肝炎病毒的抵抗力低得多。所以,使用對乙肝病毒的消毒和滅活方法完全可以對付艾滋病病毒。艾滋病病毒有不耐酸、較耐堿、對紫外線不敏感等特點(diǎn),酒精對其具有較好的滅活作用。國際衛(wèi)生組織推薦對艾滋病病毒滅活加熱100℃持續(xù)20分鐘,效果較理想。艾滋病病毒的消毒主要是針對被艾滋病病毒感染者和艾滋病病人的血液、體液污染的醫(yī)療用品、生活場所等。例如,輔料、紗布、衣物等。對艾滋病病毒的消毒可以根據(jù)消毒物品選擇適當(dāng)?shù)奈锢矸椒ɑ蚧瘜W(xué)方法。需要重復(fù)使用的物品可用煮沸或高壓蒸汽消毒。不宜煮沸的物品可用2%戊二醛、75%酒精等進(jìn)行消毒。
[編輯本段]十、可以做HIV抗體檢測的機(jī)構(gòu)
各省、自治區(qū)、直轄市的疾病控制中心(或衛(wèi)生防疫站)、國境衛(wèi)生檢疫機(jī)構(gòu)、各級血站和血液中心、具備HIV抗體實(shí)驗(yàn)室檢測初篩資格的醫(yī)院,均可從事HIV抗體檢測,各省、市、區(qū)的其他具體檢測機(jī)構(gòu)可向上述單位詢問。目前,大部分省市都有一個確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室,一般設(shè)在省級疾病預(yù)防與控制中心,負(fù)責(zé)本省陽性標(biāo)本的復(fù)核和確認(rèn)工作。上述機(jī)構(gòu)在提供HIV抗體檢測同時(shí)也提供有關(guān)艾滋病方面的咨詢,包括電話咨詢、信函咨詢和門診咨詢等。
[編輯本段]十一、檢測結(jié)果不確定的原因
(1) 感染還處于窗口期:從HIV進(jìn)入體內(nèi)到檢測這段時(shí)間還不夠長,因此血清還沒有形成典型的抗體反應(yīng);
(2) 艾滋病進(jìn)展到終末期,抗體水平下降;
(3) 存在HIV2型或其他亞型(例如O亞型),而所使用的檢測試劑無法檢測;
(4) 其他非病毒蛋白抗體的交叉反應(yīng):自身免疫性疾病、某些惡性疾病、懷孕、輸血或器官移植等情況下,身體可以產(chǎn)生一些抗體,其反應(yīng)與HIVP24核心蛋白抗體引起的反應(yīng)很相似;
(5) 以前接種過HIV(試驗(yàn)性)疫苗。
出現(xiàn)不確定結(jié)果,應(yīng)建議其3個月后復(fù)查。
[編輯本段]十二、艾滋病存活時(shí)間
艾滋病患者的存活時(shí)間長短與其被感染的亞型病毒種類有很大的關(guān)系。艾滋病患者的平均存活時(shí)間因被感染的亞型種類不同而有很大的差異,盡管這些研究對象被感染的病毒數(shù)量基本上是一樣的。A亞型病毒感染者的平均存活時(shí)間為8.8年,而D亞型病毒感染者的平均存活時(shí)間降至為6.9年,而D亞型和A亞型病毒的混合感染者的存活時(shí)間更短,平均只有5.8年。
一般在室溫條件下血液中的HIV可存活15d
[編輯本段]十三、艾滋病病毒存活的條件
HIV對熱敏感,在56℃下經(jīng)30分鐘可滅活,50%乙醇或乙醚、0.2%次氯酸鈉、0.1%家用漂白粉,0.3%雙氧水、0.5%來蘇處理5分鐘即可滅活,但對紫外線不敏感。
在室溫合適的液體環(huán)境中可存活15天以上。
[編輯本段]十四、艾滋病毒藏身之所
長期以來,醫(yī)學(xué)界在臨床治療時(shí)發(fā)現(xiàn),所有接受強(qiáng)化治療的艾滋病病毒攜帶者在停止治療后身體中很快又重新出現(xiàn)艾滋病病毒,并由此推斷在感染者的機(jī)體中不但存在艾滋病病毒的藏身之所,而且機(jī)體的免疫系統(tǒng)難以對其進(jìn)行有效控制。
為解開這一難題,法國科學(xué)家進(jìn)行了大量試驗(yàn)。結(jié)果發(fā)現(xiàn),腸淋巴結(jié)為艾滋病病毒提供了一個絕好的保護(hù)屏障,不但艾滋病病毒檢測呈陽性者體內(nèi)的該病毒無法被徹底消滅,一些感染艾滋病病毒10年后血檢仍為陰性者的腸淋巴結(jié)中也藏匿著艾滋病病毒。
科學(xué)家經(jīng)過進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),腸淋巴結(jié)中的T-CD8淋巴細(xì)胞(細(xì)胞毒素T淋巴細(xì)胞)活力較差,其他組織中的這種被稱為殺手的淋巴細(xì)胞通常能夠消滅被感染的細(xì)胞,控制病毒,但腸淋巴結(jié)中的這種淋巴細(xì)胞缺乏這一能力,從而導(dǎo)致艾滋病病毒在其中藏身,并逐漸擴(kuò)散到其他器官,使病情加重。
隨后,研究人員證實(shí)導(dǎo)致腸淋巴結(jié)中T-CD8淋巴細(xì)胞功能缺損的是TGF-β細(xì)胞因子,正是它抑制了T-CD8淋巴細(xì)胞的活性,導(dǎo)致其早衰。
法國科學(xué)家表示,他們的研究為徹底戰(zhàn)勝艾滋病提供了新思路,比如抑制TGF-β細(xì)胞因子,修復(fù)功能受損的T-CD8淋巴細(xì)胞,以及加強(qiáng)針對腸淋巴結(jié)的治療等。這也將是他們下一步的主攻課題。
[編輯本段]十五、艾滋病疫苗研制
據(jù)《科學(xué)》雜志報(bào)道,2007年底,艾滋病疫苗研究領(lǐng)域的科學(xué)家們只能帶著沉重的心情邁向新的一年。9月中旬,默克制藥公司宣布,其耗時(shí)10年研制的艾滋病疫苗中期臨床試驗(yàn)失??;9月底,美國國立衛(wèi)生研究院(NIH)在最后一刻決定:停止一項(xiàng)耗資達(dá)1.3億美元的艾滋病疫苗試驗(yàn)。艾滋病疫苗研究接連受到重創(chuàng)。
據(jù)最新出版的《科學(xué)》雜志報(bào)道,該疫苗由NIH研究人員研制,NIH停止這項(xiàng)試驗(yàn)的原因是:該試驗(yàn)類似于默克公司疫苗的臨床試驗(yàn),可能會增加部分人感染艾滋病病毒(HIV)的風(fēng)險(xiǎn)。
12月底,NIH艾滋病疫苗研究小組委員會成員在NIH位于馬里蘭州貝塞斯達(dá)的總部開會,討論NIH疫苗的未來命運(yùn)。盡管本次會議沒有形成最后決定,但成員們還是達(dá)成共識:重新設(shè)計(jì)一套方案,繼續(xù)進(jìn)行這項(xiàng)艾滋病疫苗試驗(yàn),但要盡量減少受試者受傷害的風(fēng)險(xiǎn)。
“每個人似乎都認(rèn)為我們的產(chǎn)品(與默克公司的產(chǎn)品相比)有足夠多的不同之處,可以進(jìn)行下一步試驗(yàn)?!盢IH艾滋病項(xiàng)目負(fù)責(zé)人佩吉·約翰斯頓說,“現(xiàn)在的問題是:應(yīng)該設(shè)計(jì)什么樣的試驗(yàn)?這樣的設(shè)計(jì)切實(shí)可行嗎?”
資料顯示,目前全世界大約有4000萬人感染HIV,如果按目前的感染速度計(jì)算,未來5年中還將有3000萬人感染。也正是由于艾滋病在全球的蔓延,使得艾滋病疫苗市場越來越被制藥企業(yè)看好。數(shù)據(jù)分析表明,2006年全球艾滋病疫苗市場的容量為100億美元。
默克公司花了10年時(shí)間研制了一種名為V520的艾滋病疫苗。2004年,默克公司、美國國家過敏和傳染性疾病研究所及一個名為HIV疫苗聯(lián)盟的學(xué)術(shù)機(jī)構(gòu)組成團(tuán)隊(duì),開始實(shí)施一項(xiàng)名為“步伐”的V520全球性人體試驗(yàn);今年9月18日,默克制藥公司和合作方共同宣布,對V520進(jìn)行的臨床試驗(yàn)失敗,因?yàn)樵撛囼?yàn)的一項(xiàng)中期安全分析顯示,該疫苗既無法保護(hù)志愿者免遭致命病毒的侵襲,也不能減少HIV感染者體內(nèi)的病毒數(shù)量。
對艾滋病疫苗研究領(lǐng)域來說,這是一場災(zāi)難性的打擊,因?yàn)槟说囊呙绫徽J(rèn)為是最有希望的艾滋病疫苗。艾滋病疫苗試驗(yàn)網(wǎng)絡(luò)發(fā)言人莎拉·亞歷山大說,對制藥業(yè)來說,這是一個悲哀的日子,因?yàn)槟斯镜囊呙缫扬@示,它能夠激發(fā)免疫系統(tǒng)。
然而,打擊還在繼續(xù)。NIH的艾滋病疫苗是由NIH疫苗研究中心的加里·勒貝爾小組研制的,與默克公司的疫苗一樣,這兩種疫苗都是用感冒病毒作為載體,將HIV的基因送進(jìn)受試者體內(nèi)。腺病毒5型(Ad5)是一種非常流行的感冒病毒,它的亞型超過50種,且變化很快,部分地區(qū)可能有1/3的人感染上這種病毒,有些地方甚至每個人都曾被感染過。
在默克疫苗的試驗(yàn)里,具有高水平Ad5抗體的受試者在接種了艾滋病疫苗后變得更容易感染HIV。研究人員現(xiàn)在還沒有弄明白這一過程的機(jī)理,也不清楚新發(fā)現(xiàn)是否具有統(tǒng)計(jì)學(xué)上的重要性。但是,為了預(yù)防萬一,NIH艾滋病疫苗小組委員會要求,在艾滋病疫苗研究中心的試驗(yàn)中排除對Ad5有抗體的人。
哥倫比亞大學(xué)的斯科特·漢默是NIH疫苗研究中心艾滋病疫苗試驗(yàn)項(xiàng)目負(fù)責(zé)人,他最初計(jì)劃在美國和非洲進(jìn)行這項(xiàng)試驗(yàn),受試者有8500多人?,F(xiàn)在,漢默小組的一位成員解釋說,他們認(rèn)為在美國和非洲進(jìn)行一項(xiàng)只有2000~3300名受試者的試驗(yàn)是比較穩(wěn)妥的,而且受試者必須對Ad5抗體呈陰性,受試者將包括異性戀者和男同性戀者。
NIH艾滋病疫苗研究小組委員會的部分成員提出,試驗(yàn)?zāi)芊窦杏诟M窄的范圍,比如美國的男同性戀者。委員會成員之一、NIH的疫苗專家Jeffrey Lifson警告說,默克公司的結(jié)果正在造成混亂,部分原因在于疫苗是在如此多的不同人群和地區(qū)進(jìn)行試驗(yàn)。“我真的很擔(dān)心……這是否表明我們能夠作好這項(xiàng)研究?!?br>大衛(wèi)·沃特金斯是威斯康星大學(xué)的靈長類動物研究專家,他完全反對作這樣的試驗(yàn),因?yàn)榧词共豢紤]安全因素,對猴子的試驗(yàn)已表明NIH疫苗研究中心的試驗(yàn)將會失敗。他對《科學(xué)》雜志說:“我不明白他們?yōu)槭裁催€要這樣做??茖W(xué)似乎真的被忽略了。”美國過敏和傳染性疾病研究所所長安東尼·費(fèi)希認(rèn)為,這個領(lǐng)域還沒有“奢侈”到足以等到證明來自猴子研究的數(shù)據(jù)是有效的,這需要10年的時(shí)間。但費(fèi)希沒有在小組會上談自己的觀點(diǎn),他解釋說:“我準(zhǔn)備回去作最后的決定,我不想早于任何人得出結(jié)論?!?br>《科學(xué)》的文章指出,2008年1月,哥倫比亞大學(xué)的小組將向NIH的這個小組委員會報(bào)告重新設(shè)計(jì)的方案,屆時(shí),費(fèi)希將宣布NIH疫苗研究中心的艾滋病疫苗的命運(yùn)。
我國艾滋病疫苗還要等多久?
2000年,在中國科學(xué)院第11次院士大會上,中國科學(xué)院院士曾毅報(bào)告說,由于病毒變異太快,有效的艾滋病疫苗在今后10年內(nèi)不會問世。
2006年,在中科院第13次院士大會學(xué)術(shù)會上,曾毅院士再次報(bào)告了“艾滋病的預(yù)防與控制”。防治艾滋病的疫苗還要等多久?曾毅院士沒有給出答案,任何科學(xué)家也很難給出答案。
人類研究艾滋病疫苗已有20余年了,現(xiàn)國際上已進(jìn)行了120多個艾滋病疫苗的臨床測試,測試疫苗包括重組病毒載體疫苗、DNA疫苗、蛋白/多肽疫苗以及不同疫苗的組合。無論是艾滋病抗體疫苗還是細(xì)胞免疫疫苗均尚處于早期階段,所研制的疫苗在理論上均難以克服艾滋病毒所帶來的挑戰(zhàn)。因?yàn)榘滩《綢型至少包括9個亞型和眾多的重組型(我國的主要流行株即是B`/C重組型)。而且,病毒可不斷通過遺傳變異,逃逸免疫系統(tǒng)的識別與控制。研發(fā)有效艾滋病疫苗,已成為人類面臨的最重大挑戰(zhàn)之一。
從21世紀(jì)始,各國政府和國際組織紛紛加大了對艾滋病疫苗研究的經(jīng)費(fèi)投入,形成了全球合作攻關(guān)的良好態(tài)勢。近年,很多大型制藥與疫苗公司也紛紛加入或加大了艾滋病疫苗研發(fā)的投資。
在發(fā)展中國家中具備疫苗研究經(jīng)驗(yàn)、生產(chǎn)條件、評價(jià)隊(duì)伍和管理體系的國家十分有限,國際機(jī)構(gòu)普遍認(rèn)為中國是最有潛力的合作伙伴之一。第一個由長春百克生物公司與美國霍普金斯大學(xué)合作研制的DNA和安卡那株痘苗病毒艾滋病疫苗已于2005年3月正式啟動I期臨床試驗(yàn),疫苗沿用國外成熟的技術(shù)平臺,采用DNA與非復(fù)制型重組安卡那株痘苗病毒為載體,插入我國流行株CRF08—BC來源的免疫原基因進(jìn)行聯(lián)合免疫。研究已基本結(jié)束,標(biāo)志著我國境內(nèi)T細(xì)胞疫苗臨床試驗(yàn)的開始。
此外,我國在復(fù)制型和非復(fù)制型天壇株痘苗疫苗、腺病毒載體疫苗、腺病毒相關(guān)病毒載體疫苗、仙臺病毒載體疫苗、多肽表位疫苗、蛋白疫苗等方面的艾滋病疫苗臨床前研究上均取得一定的進(jìn)展。
曾毅院士談到,盡管我國HIV疫苗研究取得了一定的成績,但從總體上說,在國際上影響力有限,試驗(yàn)的疫苗均沒有我國的自主知識產(chǎn)權(quán)。造成這種現(xiàn)狀的原因,包括上游研發(fā)資金的投入嚴(yán)重不足、研究創(chuàng)新不夠、隊(duì)伍間缺乏合作、疫苗研發(fā)上下游脫節(jié)等。
[編輯本段]十六、HIV抗體
HIV只襲擊特定的細(xì)胞。不同的細(xì)胞表面有著不同的蛋白質(zhì),這些稱為“受體”的蛋白質(zhì)是細(xì)胞身份的標(biāo)識,好像士兵不同顏色和式樣的盔甲。HIV進(jìn)入免疫細(xì)胞、摧毀人體免疫系統(tǒng)的主要通道,是稱為CD4和CCR5的兩個受體。CCR5-△32變異,就是編碼CCR5受體的基因發(fā)生的一個微小變異———丟失了32個堿基對。其結(jié)果是形成一種較小的蛋白質(zhì),它并不位于免疫細(xì)胞表面。這樣,大多數(shù)HIV毒株就失去門路,無法感染細(xì)胞。
一般地,人體中每個基因都有兩個副本。擁有一個CCR5-△32變異副本,人對HIV的抵抗力就會增強(qiáng),即使受到感染,發(fā)病過程也會比普通人緩慢。如果有兩個變異副本,就基本上對HIV免疫了(并非完全免疫,有兩個變異副本而仍死于艾滋病,這樣的例子雖然罕見但的確存在,有的HIV毒株可能并不需要以CCR5為通道)。
這個變異對HIV以及古代瘟疫的抵抗力,促使科學(xué)家調(diào)查了它在不同人群中出現(xiàn)的頻率。結(jié)果顯示,非洲土著、東亞、印度等人群里都不存在這個變異,它僅僅存在于歐洲人和居住在美洲的歐洲移民后裔中。也就是說,它是歐洲人特有的。在歐洲不同地區(qū),它出現(xiàn)的頻率也不一樣,其中以北歐高達(dá)14%,地中海沿岸則僅為2%。平均說來,約有10%的歐洲人擁有一個變異副本,1%的人擁有兩個副本。
CCR5-△32剛被發(fā)現(xiàn),制藥企業(yè)就紛紛試著模擬它的作用,來制造新的抗艾滋病疫苗或藥物。很多擁有兩個變異副本的人健康地活著,似乎顯示該變異并無有害影響,這一點(diǎn)尤其有利。不過,它究竟從何而來?這個變異僅在歐洲人中廣泛存在,對此的合理解釋是,在歷史上的歐洲,擁有這個變異的人有更大的機(jī)會生存下來、留存后代。它是偶然出現(xiàn)的,起初只存在于極少數(shù)人身上,但某種嚴(yán)酷事件產(chǎn)生了強(qiáng)大的“選擇壓力”,使得這個能帶來一定生存優(yōu)勢的變異在人群中頻率不斷升高。
這個變異可以增進(jìn)人對HIV的抵抗力,但據(jù)估計(jì)它有幾百年甚至上千年歷史了。那么歷史上有什么疾病足以產(chǎn)生這樣的壓力?流感、麻疹、猩紅熱、傷寒、霍亂……許多傳染病襲擊過歐洲,但致死率和流行程度足夠高的,目前只有兩個候選者:黑死病和天花。
梅毒介紹:/view/23940.htm
結(jié)構(gòu):直徑約120納米,大致呈球形,病毒外膜是類脂包膜,來自宿主細(xì)胞,并嵌有病毒的蛋白gp120與gp41。gp41是跨膜蛋白,gp120位于表面,并與gp41通過非共價(jià)作用結(jié)合。向內(nèi)是由蛋白p17形成的球形基質(zhì),以及蛋白p24形成的半錐形衣殼,衣殼在電鏡下呈高電子密度,衣殼內(nèi)含有病毒的RNA基因組、酶以及其他來自宿主細(xì)胞的成分。
HIV,指人類免疫缺陷病毒,即艾滋病病毒,是造成人類免疫系統(tǒng)缺陷的一種病毒,1981年,人類免疫缺陷病毒在美國首次發(fā)現(xiàn),是一種感染人類免疫系統(tǒng)細(xì)胞的慢病毒,屬
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