中藥鑒定（一）－中藥理化鑒定

中藥鑒定（一）－中藥理化鑒定

中藥理化鑒定

理化鑒定是用物理的或化學(xué)的方法，對中藥材及其制劑所含的有效成分、主成分或特征性成分進(jìn)行定性、定量分析，以鑒定真?zhèn)?、評價品質(zhì)。

對于化學(xué)成分不清楚，或因次要成分的干擾而無法進(jìn)行主成分分析時，可選用一些特殊的色譜、波譜峰進(jìn)行鑒定和識別。

常用的理化鑒定方法主要有定性反應(yīng)、色譜法和波譜法。

（1）顏色或沉淀反應(yīng)

各類成分因結(jié)構(gòu)或功能團(tuán)的不同，常與某些特定試劑發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生不同的顏色或沉淀。如生物堿與碘化鉍鉀生成橙色沉淀；蒽醌類與堿液反應(yīng)生成橙、紅、藍(lán)色；黃酮類與鹽酸鎂粉的反應(yīng)，香豆精和內(nèi)酯類的異羥肟酸鐵反應(yīng)，皂甙類的Liebermann一Burchard反應(yīng)，強(qiáng)心甙的K一K反應(yīng)，酚類的三氯化鐵反應(yīng)，鞣質(zhì)的明膠沉淀反應(yīng)，氨基酸的茚三酮反應(yīng)，糖類的苯酚一硫酸反應(yīng)等。

（2）色譜法

已成為藥材和成藥鑒定中不可缺少的常規(guī)而有效的方法，特別是對成分復(fù)雜的中藥、天然藥物，有著分離、分析鑒定雙重的優(yōu)勢。常用的色譜鑒定方法有薄層色譜法、氣相色譜法、高效液相色譜法、紙色譜法、凝膠電泳、毛細(xì)管電泳等技術(shù)。①薄層色譜法：是中藥鑒定中最常用且簡便、直觀、經(jīng)濟(jì)的色譜法，樣品點(diǎn)樣展開后，可通過斑點(diǎn)的熒光或顯色反應(yīng)直接鑒定比較，也可通過掃描定性、定量分析，幾乎適用于所有的動、植物類藥材的鑒定。最常用的是硅膠薄層色譜法。②氣相色譜法：適合于揮發(fā)性成分或通過衍生化后能夠氣化的成分的定性、定量分析，具有靈敏度高、分離效率高等優(yōu)點(diǎn)，特別是氣相色譜-質(zhì)譜-計(jì)算機(jī)聯(lián)用技術(shù)的發(fā)展，對于富含揮發(fā)油類藥材的鑒別，氣相色譜已成為一種首選的方法。不揮發(fā)的成分，也可采用裂解氣相色譜或閃蒸氣相色譜來進(jìn)行鑒定。③高效液相色譜法：具有柱效高、分離度好、重現(xiàn)性好等特點(diǎn)，配以不同類型的檢測器，可對多種中藥成分進(jìn)行分析，尤其適合于具有紫外吸收的化合物的分析；一般常用于含量測定，但也可根據(jù)特征色譜峰和指紋圖譜進(jìn)行定性分析，特別是三維高效液相色譜（HPLC）的發(fā)展，使定性分析為方便。④紙色譜法：是一種分配色譜，可用于氨基酸、糖類等水溶性成分的分析。⑤凝膠電泳：適合于肽類、核酸、多糖等大分子化合物的分析鑒定。特別是分子生物學(xué)的發(fā)展，DNA指紋圖譜分析應(yīng)用于植、動物的鑒定，與次生代謝產(chǎn)物的分析相比，更能反映物種的內(nèi)在遺傳變異規(guī)律。③毛細(xì)管電泳：是近年發(fā)展起來的新的分析技術(shù)，它集HPLC與電泳技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)于一身，使中藥成分的分析范圍更廣闊、更靈敏，因?yàn)樗鼜母旧辖鉀Q了HPLC分析最頭痛的柱效問題。

（3）波譜法

根據(jù)中藥成分結(jié)構(gòu)的不同會產(chǎn)生特征的吸收峰。常見的有可見一紫外分光光度法、紅外分光光度法、串聯(lián)質(zhì)譜、核磁共振、調(diào)線分析等。①可見一紫外分光光度法：一般用于總提取物或部分提取物中某類成分的含量分析，也可通過導(dǎo)數(shù)光譜法進(jìn)行混合物中單一組分的測定，或通過指紋圖譜進(jìn)行定性分析。②紅外分光光度法：主要用于指紋圖譜的分析、鑒定。③串聯(lián)質(zhì)譜法（MS/MS）：可直接用于粉末藥材（成藥）的分析、鑒定，是一種新的質(zhì)譜技術(shù)。④核磁共振波譜法（NMR）：可用于具有特定結(jié)構(gòu)類型化合物的定性、定量分析，如藥用植物中吡咯里西啶生物堿的NMR分析。⑤X線分析法：主要適用于礦物類藥材的分析、鑒定，也可應(yīng)用于粉末藥物的直接分析。

中藥鑒定學(xué):皮類中藥

中藥鑒定學(xué)：皮類中藥——黃柏的鑒別

【性狀鑒別】
川黃柏

①　呈板片狀或淺槽狀，長寬不等，厚3mm～7mm.

②　外表面黃棕色或黃褐色，較平坦，皮孔橫生，嫩皮較明顯，有不規(guī)則的縱向淺裂紋，偶有殘存的灰褐色的粗皮。

③　內(nèi)表面暗黃色或黃棕色，具細(xì)密的縱紋。體輕，質(zhì)較硬，斷面深黃色，裂片狀分層，纖維性。

④　氣微，味苦；粘液性，可使唾液染成黃色。

關(guān)黃柏

通常較川黃柏薄，厚約2mm～4mm.外表面深黃棕色，具不規(guī)則的縱裂紋，時有暗灰色的栓皮殘留，栓皮厚，有彈性，皮孔小而少見，內(nèi)表面黃色或黃棕色。體輕，質(zhì)硬，斷面鮮黃色或黃綠色。

均以皮厚、斷面色黃者為佳。

【顯微鑒別】

川黃柏橫切面

①　未去凈外皮者，木栓層由多列長方形細(xì)胞組成，內(nèi)含棕色物質(zhì)。栓內(nèi)層細(xì)胞中含草酸鈣方晶。

②　皮層比較狹窄，散有纖維群及石細(xì)胞群，石細(xì)胞大多分枝狀，壁極厚，層紋明顯。

③　韌皮部占樹皮的極大部分，外側(cè)有少數(shù)石細(xì)胞，纖維束切向排列呈斷續(xù)的層帶，纖維束周圍薄壁細(xì)胞中常含草酸鈣方晶。

④　射線寬2～4列細(xì)胞，常彎曲而細(xì)長。薄壁細(xì)胞中含有細(xì)小的淀粉粒，粘液細(xì)胞隨處可見。

關(guān)黃柏與川黃柏相似，不同點(diǎn)是：關(guān)黃柏木栓細(xì)胞呈方形，皮層比較寬廣，石細(xì)胞較川黃柏略少，射線較平直，硬韌部不甚發(fā)達(dá)。

關(guān)黃柏粉末：呈綠黃色或黃色。

①　石細(xì)胞眾多，鮮黃色，長圓形、紡錘形或長條形，直徑35μm～80μm，有的呈分枝狀，枝端鈍尖，壁厚，層紋明顯。

②　纖維鮮黃色，直徑16μm～38μm，常成束，周圍的細(xì)胞含草酸鈣方晶，形成晶纖維。

③　草酸鈣方晶極多，直徑12μm～24μm～30μm.

④　淀粉粒細(xì)小。

⑤　粘液細(xì)胞可見，呈類球形，直徑32μm～42μm.

川黃柏不同于關(guān)黃柏的特征是：石細(xì)胞大多呈分枝狀，呈圓形者直徑40μm～128μm，孔溝不明顯。黃色粘液細(xì)胞多單個散離，遇水漸膨脹呈類圓形或矩圓形，直徑40μm～72μm，壁薄，有時脹裂，胞腔可見無定形粘液質(zhì)。

【成分】

關(guān)黃柏樹皮含多種生物堿，主要為小檗堿（berberine）約0.6％～2.5％，并含少量黃柏堿（phellodendrine）、木蘭堿（magnof1orine）、掌葉防己堿（即棕櫚堿，palmatine）等，另含苦味質(zhì)黃柏酮、黃柏內(nèi)酯（即檸檬苦素）、白鮮內(nèi)酯、青熒光酸等。此外，還有α-及β-谷甾醇、豆甾醇等。

川黃柏樹皮含小檗堿約1.4％～5.8％、黃柏堿、木蘭堿、掌葉防己堿等生物堿。

【理化鑒別】

取黃柏斷面，置紫外光燈下觀察，顯亮黃色熒光。

取粉末1g，加乙醚10ml，振搖后，分取浸出液，揮去乙醚，殘?jiān)颖姿崾谷芙猓偌訚饬蛩?滴，放置，溶液呈紫棕色，（黃柏酮及植物甾醇的反應(yīng)）

取粉末0.1g，加乙醇10ml，振搖數(shù)分鐘，濾過，濾液加硫酸1ml，沿管壁滴加氯試液1ml，在兩液接界處顯紅色環(huán)。（檢查小檗堿）

本品粉末的甲醇提取液作供試品溶液，另取黃柏對照藥材的乙醇提取液，再取小檗堿對照品溶液，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以苯-醋酸乙酯-甲醇-異丙醇-濃氨試液（6：3：1.5：1.5：0.5）為展開劑，置氨蒸氣飽和的層析缸內(nèi)展開，置紫外光燈（365nm）下觀察，供試品色譜中，在與對照藥材及對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的斑點(diǎn)。

中藥鑒定學(xué)

中藥鑒定學(xué)是研究和鑒定中藥的品種和質(zhì)量，制定中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) ，尋找和擴(kuò)大新藥源的應(yīng)用學(xué)科。中藥鑒定學(xué)的研究方法和內(nèi)容是：在繼承祖國醫(yī)藥學(xué)遺產(chǎn)和傳統(tǒng)鑒別經(jīng)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，運(yùn)用現(xiàn)代自然科學(xué)的理論、知識、方法和技術(shù)，系統(tǒng)地整理和研究中藥的歷史、來源、品種形態(tài)、性狀、顯微特征、理化鑒別、檢 查、含量測定等 ，建立規(guī)范化的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)以及尋找和擴(kuò)大新藥源的理論和實(shí)踐問題 。簡而言之，就是一門對中藥進(jìn)行“保質(zhì)、尋新、整理、提高”的學(xué)科。

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