新加坡研制出快速ＤＮＡ檢測器

新加坡研制出快速ＤＮＡ檢測器

新加坡微生物研究所研究人員最近利用生物芯片技術(shù)，研制出一種快捷有效的ＤＮＡ（脫氧核糖核酸）檢測器，它只需一滴血，即能在兩小時之內(nèi)知道ＤＮＡ檢測結(jié)果。

據(jù)新加坡《聯(lián)合早報》８日報道，這種檢測器的優(yōu)點是能快速地將含有ＤＮＡ的白細胞與紅細胞進行分離。其生物芯片可以先將白細胞過濾出來，然后從中提取出ＤＮＡ，再進一步進行分析即可，從而將以往長達兩天的檢測過程縮短到不足兩小時。該檢測器只有一個公文包大小，而且一般醫(yī)療人員或診所的護士都可以操作。

新加坡微生物研究所目前已經(jīng)授權(quán)當?shù)匾患疑锟萍脊旧a(chǎn)這種檢測器，估計可在今年年底之前推向市場。

高通量DNA測序和基因組學(xué)新型技術(shù)的目錄

現(xiàn)有技術(shù)
第一章概述：DNA測序技術(shù)進展
1　引言
1.1　超高通量測序能力的生物技術(shù)意義
2　測序前沿技術(shù)
2.1　毛細管電泳和Sanger測序法
2.2　高通量毛細管微陣列測序
2.3　染料和檢測器
2.4　微型芯片電泳
2.5　基于微型毛細管芯片的毛細管電泳測序
2.6　質(zhì)譜測序
3　固相陣列測序裝置
3.1　超敏感的檢測器和測序儀
3.2　合成測序
3.3DNA單分子測序
3.4　雜交重組測序
4　技術(shù)展望
4.1　納米孔膜
4.2　DNA合成的直接電學(xué)檢測
5　基因組短片段測序應(yīng)用
5.1　基于重測序的基因分型
5.1.1　polony基因分型
5.1.2　焦磷酸測序的基因分型
5.1.3　多態(tài)性比率測序
5.1.4　BEAMing
5.2　古生物基因組
5.3　洞人基因組
5.4　元基因組
5.5　重復(fù)DNA序列的SAM測序
5.6　轉(zhuǎn)錄組和表達RNA序列分析
5.7　MPSS和基因組分析
5.8　光學(xué)定位
6　小結(jié)
參考文獻
第二章　芯片毛細管電泳與系統(tǒng)遺傳分析系統(tǒng)
摘要
1　引言
1.1　各種基于芯片的毛細管電泳系統(tǒng)
2　芯片設(shè)計和流體操作
2.1　芯片設(shè)計
2.2　流體操作
3　材料和制作
3.1　材料
3.2　制作
3.2.1　玻璃材料的制作步驟
3.2.2　高分子材料的制作步驟
4　檢測
4.1　光學(xué)檢測
4.1.1　激光誘導(dǎo)的熒光檢測
4.1.2　吸光度檢測
4.1.3　化學(xué)發(fā)光檢測
4.2　電化學(xué)檢測
4.2.1電流檢測
4.2.2電導(dǎo)檢測
4.2.3電位檢測
4.3　質(zhì)譜
5　表面修飾
5.1　動態(tài)包被
5.1.1　玻璃/石英基片的包被
5.1.2　PMMA基片的包被
5.1.3　PDMS基片的包被
5.2　永久性包被
5.2.1　玻璃/石英基片的永久包被
5.2.2　PMMA基片的永久包被
5.2.3　PDMS基片的永久包被
6　應(yīng)用
6.1　核酸分析
6.1.1　篩分介質(zhì)
6.1.2　依大小排列DNA片段
6.1.3　基因分型
7　DNA測序
……
第三章　應(yīng)用MALDI-TOF質(zhì)譜法比較序列分析——利用知己序列尋找新的序列
第四章　基于核苷酸偶聯(lián)染料的DNA測序進展
合成測序技術(shù)平臺
第五章　454生命科學(xué)（454LifSciences）皮升級測序系統(tǒng)
第六章　合成法DNA測序的集成系統(tǒng)
單分子測序
第七章　單分子熒光顯微鏡及其在基于循環(huán)合成的單分子測序中的應(yīng)用
第八章　基于單個DNA鏈的納米級核苷酸序列快速測序
第九章　全基因組水平的單分子測序系統(tǒng)
序列驗證和分析
第十章　測序和誘導(dǎo)突變相結(jié)合有利于短讀長獲得全新百萬級的DNA片段序列
第十一章　基因組測序和拼接
第十二章　具有高污染風險的樣品——古DNA和環(huán)境DNA核酸序列信息的有效測定

法醫(yī)常用的DNA檢測試劑盒及其原理

原理

細胞核染色質(zhì)DNA斷裂是細胞凋亡的標志特征。在細胞發(fā)生凋亡時，核酸內(nèi)切酶被激活，選擇性降解染色質(zhì)DNA，形成50-300 kb的大片段，并進而在核小體連接處斷裂，形成180-200 bp或其整倍數(shù)的DNA片段，這些DNA片段可從細胞中提取出來，通過瓊脂糖凝膠電泳，溴化乙啶染色呈現(xiàn)為梯狀條帶（DNA Ladder），并據(jù)此判斷細胞凋亡產(chǎn)生。凱基細胞凋亡DNA Ladder檢測試劑盒提供了一種簡便、快速地提取染色質(zhì)DNA的方法，并增加對小片段DNA的回收，從而增強了檢測的敏感性。
操作步驟

1． 離心收集105~106細胞（1500×g，5min）于1.5mL微量離心管中；

2． 用PBS洗滌細胞二次（離心1500×g，5min），棄上清；

3． 沉淀的細胞中加入100μL Lysis Buffer，渦旋振蕩器上劇烈混合10秒，離心1000×g，5min）移上清于另一1.5mL微量離心管中；

4． 沉淀再加入100μL Lysis Buffer重復(fù)上步，合并兩次的上清液；

5． 在上述合并的上清液中加入20μL Solution A，再加入20μL Enzyme A， 55℃反應(yīng)1小時；

6． 加入20μL Enzyme B,37℃，1小時；

7． 加入130μL Precipitant和950μL冷乙醇, 混勻， 置—20℃,1小時以上或過夜；

8． 4℃，12，000-14，000 rpm離心15-30min，小心地棄去上清，收集沉淀的DNA；

9． 加入0.5mL 70%的冷乙醇，洗DNA沉淀，再12，000-14，000 rpm離心20min；

10．棄上清，DNA沉淀于室溫干燥10 min后，加入10-15μL TE Buffer，充分攪拌溶解DNA；

11．取上述10-15μL樣品加入2-3μL Loading Buffer， 1.5%瓊脂糖凝膠電泳（凝膠和電泳緩沖液TBE均加入0.5μg/mL的溴化乙啶）;

12．5V/cm電泳1小時，紫外燈下觀察并拍照。

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