一、生殖器皰疹是長了一個(gè)小丘疹嗎
一些男性發(fā)現(xiàn)自己的生殖器周圍有紅色的丘疹出現(xiàn),因?yàn)槭窍奶煅谉岬脑?,就沒有放在心上,導(dǎo)致自己的疾病逐漸發(fā)展下去,等到嚴(yán)重的時(shí)候才發(fā)現(xiàn)原來自己是患上了生殖器皰疹疾病。
患者在生殖器皰疹開始發(fā)病時(shí)局部會發(fā)紅、灼熱及輕微的瘙癢,迅速變?yōu)槊琢4笮〖t色丘疹后來會隨著病情的發(fā)展,而逐漸擴(kuò)散,到最后連成幾塊比較明顯的紅色丘疹。并很快變成水皰幾天后,形成潰爛、潰瘍、結(jié)痂,有疼痛,伴有局部淋巴結(jié)腫大。
原發(fā)性生殖器皰疹:通過調(diào)查,發(fā)現(xiàn)患有這種疾病首次感染HSV-1或HSV-2。潛伏期2-14天,平均3-5天。皮損為簇集或散在的小水皰,2-4天后破潰形成糜爛或潰瘍,后結(jié)痂自愈,自覺疼痛。
復(fù)發(fā)性生殖器皰疹:指原發(fā)性生殖器皰疹皮損消退后1-4個(gè)月內(nèi)病情復(fù)發(fā),皮損一般于原部位出現(xiàn)。皮損類似于原發(fā)性生殖器皰疹,但病情比原發(fā)性皰疹要輕。
二、生殖器皰疹有哪些臨床表現(xiàn)
1.初發(fā)生殖器皰疹
初發(fā)生殖器皰疹分為原發(fā)性生殖器皰疹和非原發(fā)的初發(fā)生殖器皰疹。前者為第一次感染HSV而出現(xiàn)癥狀者為原發(fā)性生殖器皰疹。其病情相對嚴(yán)重。而部分病人既往有過HSV-1感染(主要為口唇或顏面皰疹)又再次感染HSV-2而出現(xiàn)生殖器皰疹的初次發(fā)作,為非原發(fā)的初發(fā)生殖器皰疹,其病情相對較輕。
(1)潛伏期3~14天。
(2)外生殖器或肛門周圍有群簇或散在的小水皰,2~4天后破潰形成糜爛或潰瘍,自覺疼痛。
(3)腹股溝淋巴結(jié)常腫大,有壓痛。
(4)患者可出現(xiàn)發(fā)熱、頭痛、乏力等全身癥狀。
(5)病程2~3周。
2.復(fù)發(fā)性生殖器皰疹
原發(fā)皮損消退后皮疹反復(fù)發(fā)作,復(fù)發(fā)性生殖器皰疹較原發(fā)性全身癥狀及皮損輕,病程較短。
(1)起疹前局部有燒灼感,針刺感或感覺異常。
(2)外生殖器或肛門周圍群簇小水皰,很快破潰形成糜爛或淺潰瘍,自覺癥狀較輕。
(3)病程7~10天。
三、生殖器皰疹疾病的流行病學(xué)是什么
1.傳染源
人是單純皰疹病毒的惟一自然宿主。發(fā)作期、恢復(fù)期患者,以及無明顯癥狀的感染病毒者為該病的傳染源。主要通過病損處的水皰皰液、局部滲出液、病損皮膚黏膜表面等存在的病毒進(jìn)行傳播。該病主要通過性行為傳染,通過被污染物品的間接傳染較少。此外,患生殖器皰疹的母親,在分娩過程中,經(jīng)過產(chǎn)道可將病毒直接傳染給新生兒,或懷孕過程中患病,病毒可通過胎盤傳給胎兒。
2.傳播途徑
感染者主要通過性接觸而傳染給其性伴侶。男性同性性行為者傳染的危險(xiǎn)性也很大。有時(shí)在口唇及其周圍患有皰疹的人,可通過口-生殖器性交,使對方感染生殖器皰疹。因此,不同方式的異性或同性性行為,都可以傳播生殖器皰疹。由于有感染性的病毒能在潮濕的環(huán)境中存活數(shù)小時(shí),因而也有可能在少數(shù)情況下通過污染物而間接傳播。
四、生殖器皰疹的治療辦法
主要采用抗病毒治療。治療的目的主要是緩解癥狀,減輕疼痛,縮短病程及防止繼發(fā)感染等。目前的治療方法尚不能達(dá)到徹底清除病毒、消除復(fù)發(fā)的效果。
1.一般療法
(1)主要是保持局部清潔、干燥??擅刻煊玫葷B生理鹽水清洗,疼痛者可口服止痛藥,給予精神安慰。
(2)并發(fā)細(xì)菌感染者,可外用抗生素藥膏。
(3)局部疼痛明顯者,可外用5%鹽酸利多卡因軟膏或口服止痛藥。
(4)心理支持,說明疾病的性質(zhì)、復(fù)發(fā)的原因和如何治療及處理,增強(qiáng)與疾病斗爭的信心。
2.抗病毒藥治療
推薦采用的治療方案包括:阿昔洛韋,口服,每天5次;或阿昔洛韋,口服,每日3次;或伐昔洛韋,口服,每天2次;或泛昔洛韋,口服,每天3次。如果是初發(fā)生殖器皰疹,療程為7~10天;復(fù)發(fā)性生殖器皰疹療程為5天。頻發(fā)復(fù)發(fā)者則需以較低的劑量服用較長時(shí)間的療程。
是 皰疹:
皰:是指皮膚上長的象水泡樣兒的小疙瘩.
皰疹:
一是指皮膚表面出現(xiàn)的黃白色或半透明的小水皰,常成片出現(xiàn),里面充滿液體.天花水痘等都有這種癥狀;
二是指一種皮膚病,病原體是一種病毒,多發(fā)生在上唇或面部,癥狀是局部先發(fā)癢,然后出現(xiàn)水泡狀的隆起,內(nèi)含透明的液體,有微痛,一兩周后結(jié)痂自愈.
泡疹分為生殖器皰疹、單純皰疹、汗皰疹、帶狀皰疹。
生殖器皰疹: 一、概述
生殖器皰疹(genitalherpes)是常見的性傳播疾病。病原體是單純皰疹病毒(HSV),90%病例由HSV-2型引起,10%病例由HSV-1型引起。在歐美,生殖器皰疹的發(fā)病率僅次于淋病及非淋菌性尿道炎,是最為常見的性傳播疾病之一。在我國,生殖器皰疹的發(fā)病率近年呈上升趨勢。由于患者癥狀不明顯,不常到醫(yī)院去就診,因此實(shí)際的發(fā)病人數(shù)要遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于統(tǒng)計(jì)數(shù)字。生殖器皰疹一旦染上,可反復(fù)發(fā)作。在女性,生殖器皰疹病毒的感染已證實(shí)與宮頸癌的發(fā)生有關(guān)。
二、診斷要點(diǎn)
(一)臨床特點(diǎn)
初次感染生殖器皰疹的患者中,80%~90%為隱性感染,即沒有臨床癥狀,顯性感染只是少數(shù),一般初次感染恢復(fù)后多數(shù)轉(zhuǎn)為潛伏感染。
1.原發(fā)性生殖器皰疹潛伏期2~7天,原發(fā)損害是1個(gè)或多個(gè)小而瘙癢的紅丘疹,迅速變成小水皰,3~5天后可形成膿皰,破潰后形成糜爛、潰瘍、結(jié)痂,伴有疼痛。皮損單發(fā)或融合,男性好發(fā)于龜頭、冠狀溝、陰莖體或尿道口,女性多在陰唇、肛周或陰道發(fā)疹,約90%同時(shí)侵犯子宮頸,也可累及直腸粘膜。常伴有發(fā)熱、頭痛、乏力、肌痛、腹股溝淋巴結(jié)腫大和壓痛。癥狀持續(xù)1~2周,一般3~4周皮損結(jié)痂、愈合。
2.復(fù)發(fā)性生殖器皰疹多在原發(fā)感染后1~4個(gè)月內(nèi)復(fù)發(fā)。復(fù)發(fā)性生殖器皰疹的臨床表現(xiàn)與原發(fā)性的相似,但癥狀輕,皮疹范圍小,病程也短,一般在數(shù)日內(nèi)可自愈。復(fù)發(fā)前1~2天,局部常有刺癢或燒灼感等前驅(qū)癥狀。臨床上所見到的復(fù)發(fā)性生殖器皰疹患者絕大部分為男性,女性患者由于癥狀不明顯常不來就診。復(fù)發(fā)與發(fā)熱、月經(jīng)、日曬、寒冷、某些病毒感染有關(guān)。
3.直腸肛門皰疹病毒感染發(fā)生在男性同性戀者?;颊吒亻T直腸疼痛,肛門有分泌物,大便時(shí)有里急后重感。
4.孕婦、新生兒HSV感染孕婦發(fā)生原發(fā)性生殖器皰疹??蓪?dǎo)致流產(chǎn)、早產(chǎn)、胎兒異常甚或死胎。50%新生兒感染是發(fā)生在經(jīng)原發(fā)感染孕婦產(chǎn)道分娩時(shí),可出現(xiàn)高熱、皰疹、肝脾淋巴結(jié)腫大、腦炎,甚或敗血癥,可致死亡。而孕婦復(fù)發(fā)感染時(shí),新生兒感染的機(jī)會只有5%。
(二)組織病理表皮內(nèi)水皰,系細(xì)胞的氣球變性及網(wǎng)狀變性所致,皰內(nèi)可見棘層松解細(xì)胞及多核上皮巨細(xì)胞。真皮乳頭水腫,可見血管外紅細(xì)胞,真皮內(nèi)程度不等炎癥細(xì)胞浸潤,有嗜中性白細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等。
(三)實(shí)驗(yàn)室檢查典型病例一般不需做實(shí)驗(yàn)室檢查,有條件可做病毒分離,用免疫熒光檢查病毒包涵體,電鏡檢查病毒顆粒,酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)或放射免疫、聚合酶聯(lián)反應(yīng)(PCR)測定檢測病毒抗原以及核酸雜交技術(shù)檢測病毒型等。
三、治療
目前尚無特殊治療方法,也不能防止復(fù)發(fā)。治療目的主要是緩解癥狀、減輕疼痛、縮短病程及防止繼發(fā)感染等。
(一)一般療法主要是保持局部清潔、干燥及皰壁完整??擅刻煊玫葷B生理鹽水清洗2~3次并吸干。并發(fā)細(xì)菌感染時(shí),應(yīng)用敏感抗生素。局部止痛可用5%鹽酸利多卡因軟膏或口服止痛藥。另一要點(diǎn)是給予精神安慰,說明復(fù)發(fā)的治療方法與處理,以免精神上恐懼。女性復(fù)發(fā)性生殖器皰疹需做婦科檢查,包括定期子宮頸涂片檢查,以除外早期宮頸癌。
(二)抗病毒藥物治療
1.無環(huán)鳥苷(ACV)是一種開鏈嘌呤核苷,能抑制病毒脫氧核糖核酸合成,而對宿主細(xì)胞DNA的合成作用較少。被認(rèn)為是目前最有效的抗HSV藥物。病情嚴(yán)重者可靜脈給藥,劑量為每公斤體重5mg,每8小時(shí)1次,共5~7天。一般病人可口服,每次200mg,每日5次,或每次800mg,每日2次,共服5~7天。能使病毒迅速減少,癥狀減輕,愈合時(shí)間縮短。外用3%~5%ACV軟膏也能減輕癥狀和縮短病程。該藥無明顯副作用。
對復(fù)發(fā)次數(shù)較為頻繁的患者,可預(yù)防性的服藥。方法是每次200mg,每日3次,連續(xù)服用6~12個(gè)月,部分病人可得到完全抑制復(fù)發(fā)。近年來新開發(fā)出無環(huán)鳥苷的類似物,如萬乃洛韋(valaciclovir)、法昔洛韋(famicidovir)、潘昔洛韋(pencidovir)等,具有療效確切、生物利用度高、用量小、半衰期長、服藥次數(shù)少等優(yōu)點(diǎn),已有報(bào)告用于生殖器皰疹的治療。
2.三氮唑核苷是一種鳥嘌呤核苷的類似物,有抗DNA和RNA病毒的作用。每天服800mg,共10天,能減輕疼痛和縮短病程。
3.酞丁安搽劑能明顯抑制皰疹病毒的復(fù)制,對原發(fā)性皰疹效果較好。
(三)疫苗與免疫抑制劑對嚴(yán)重的原發(fā)性生殖器皰疹和反復(fù)發(fā)作的病人,可試用非特異性疫苗如卡介苗、脊髓灰質(zhì)炎疫苗,以提高機(jī)體非特異性免疫力,但其效果不太可靠,有免疫抑制和免疫缺陷的病人慎用。
(四)免疫增強(qiáng)劑對復(fù)發(fā)性生殖器皰疹患者可采用免疫增強(qiáng)劑以提高機(jī)體免疫調(diào)節(jié)功能。如左旋咪唑,每次50mg,每天3次,每連服3天后停藥11天,即每2周服藥3天。也可用左旋咪唑涂布液,涂于前臂屈側(cè),每天1次,連續(xù)3天。每周用藥3天。
(五)中醫(yī)藥治療
1.內(nèi)服藥可分兩型辨證論治:①肝熱感毒型:多見于本病原發(fā)性者,治宜清肝瀉火,除濕解毒。方用龍膽草10g、黃芩10g、柴胡10g、山梔子10g、生地10g、車前子10g、木通10g、馬齒莧30g、生苡仁30g、板蘭根30g。②氣虛蘊(yùn)毒型:多見于本病復(fù)發(fā)性者,治宜益氣化瘀、除濕解毒。方用生黃芪30g、生苡米30g、白術(shù)10g、當(dāng)歸10g、白芷10g、紅花10g、炒皂刺10g、豬苓30g、土伏苓15g、板藍(lán)根30g、草河車15g。
2.外用藥可用雄黃解毒散或青黛散水調(diào)外敷。
四、預(yù)防
避免與發(fā)作期生殖器皰疹患者發(fā)生性接觸。復(fù)發(fā)性生殖器皰疹患者行性生活時(shí)應(yīng)使用避孕套。早期妊娠婦女患生殖器皰疹最好中止妊娠,晚期妊娠感染HSV者宜做剖腹產(chǎn)。對復(fù)發(fā)性病人在前驅(qū)期口服無環(huán)鳥苷,有部分或完全保護(hù)作用。
單純皰疹:【概述】
單純皰疹(Herpes Simplex)是一種由單純皰疹病毒所致的病毒性皮膚病。中醫(yī)稱為熱瘡。
【診斷】
根據(jù)皮膚粘膜交界處的簇集性水皰群,自覺癥狀輕,皮損局部有灼熱感。病程短、反復(fù)再發(fā),在發(fā)熱或胃腸功能紊亂時(shí)發(fā)生,即可診斷。
【治療措施】
1.全身治療 本病有自限性,約2周即可自愈。一般給予對癥治療,無需特殊處理。對嚴(yán)重泛發(fā)性的除給予支持療法外,也可口服無環(huán)鳥苷,每次200mg,每日5次,連服5~7天。也可靜脈滴注,每次5mg/kg體重,每8小時(shí)1次,共5天(濃度1~6mg/mL,1小時(shí)注射完畢)。左旋咪唑,每次50mg,每日3次,每周連續(xù)口服3天。聚肌胞2mg qd iM10天為一療程??蓽p輕癥狀,抑制病毒擴(kuò)散,但不能控制復(fù)發(fā)。
2.局部治療 治則以干燥、收斂和預(yù)防感染為主。外用1%氯鋅油,紫草油等方法。
汗皰疹:
汗皰疹是皮膚濕疹的一種,對稱性的發(fā)生于手或腳的側(cè)面。是發(fā)生在掌跖的水皰性皮膚病。因?yàn)樗l(fā)生的部位在手腳這種汗腺特別發(fā)達(dá)的地方,又以水泡為主要的表現(xiàn),所以在以前一度以為它和汗腺流汗有關(guān),而將它命名為汗皰疹?,F(xiàn)今已經(jīng)證實(shí)它和汗腺、流汗這些因素都沒有關(guān)聯(lián)。其臨床表現(xiàn)為深在性小水皰,粟粒至米粒大小,略高出皮膚表面,常無紅暈。對稱發(fā)生于掌跖及指(趾)側(cè)。,1-2周后干涸成屑,并可反復(fù)發(fā)生,伴不同程度的灼熱及瘙癢,常連續(xù)發(fā)作數(shù)年。
當(dāng)前醫(yī)學(xué)對于汗皰疹的病因尚不十分清楚,只有少數(shù)病人發(fā)現(xiàn)和身體他處的霉菌感染或金屬過敏甚至情緒壓力有關(guān)。可能與精神緊張、手足多汗、真菌感染及變態(tài)反應(yīng)等因素有關(guān)。夏季多見。
預(yù)防汗皰疹的方法,主要就是根據(jù)它的相關(guān)特性來預(yù)防。1.情緒的控制。2,做飲食日記,找出自己的汗皰疹和金屬是否相關(guān),如果有相關(guān)要盡量避免。 3.在季節(jié)交替時(shí),要少碰水少碰清潔劑,多擦乳霜。
治療:
1、避免搔抓:搔抓往往是病情惡化以及發(fā)生并發(fā)癥的主因,所以盡可能減少搔抓是相當(dāng)重要的,
2、手腳保養(yǎng)盡可能手部少碰水和清潔劑,腳部要保持通風(fēng)涼爽,并且多擦乳霜。如此不但能減低癢感,還能避免發(fā)生慢性濕疹或霉菌感染的并發(fā)癥。
3、局部類固醇藥膏:在劇癢的狀況下,靠單純的保養(yǎng)要減低癢感相當(dāng)圈難,這時(shí)候需要局部類固醇藥膏采減少癢感并且控制病情。
4、壓力的控制:-壓力的控制對緩和病情、減少復(fù)發(fā),有很大的幫助。
5、低金屬飲食:根據(jù)統(tǒng)計(jì),此種方法對于合并金屬過敏體質(zhì)的病人,具有高度療效。
癥狀:雙手同時(shí)長紅色水皰,有劇烈瘙癢的感覺。
治療:和手愛出汗、敏感體質(zhì)有關(guān),需要在醫(yī)生指導(dǎo)下外涂、口服藥物。
其發(fā)病主要是由血虛血燥、皮膚失養(yǎng)、燥熱生風(fēng)所致,治宜養(yǎng)血潤燥、疏風(fēng)止癢。雙手脫皮的常見原因有真菌感染引起的手癬;化學(xué)損傷引起的接觸性皮炎;先天遺傳因素引起的剝脫性角質(zhì)松解癥
【治療方法】手掌脫皮有季節(jié)性,可有自愈傾向,一般不需要特殊治療。對比較嚴(yán)重或反復(fù)發(fā)作者,西醫(yī)藥多采用鎮(zhèn)靜劑、抗組織胺類藥物以及抗膽堿類藥物治療。
1、 水皰階段應(yīng)以收斂、止癢為主,可用中藥膚康潔涂液外搽,也可用10%明礬溶液浸泡。
2、脫皮階段以外用藥保護(hù)新生長的表皮,可以膚康潔軟膏外涂。
3、皮膚干燥角質(zhì)增厚有小裂口的患者,可采用保濕防裂的“膚康美軟膏”外搽。另外要注意不要去撕脫尚未完全剝離的角質(zhì)層,以免引起疼痛或流血。
4、較嚴(yán)重或反復(fù)發(fā)作者,可服用六味地黃丸或六味地黃湯加減:熟地20克、山藥15克、山茱萸10克、丹皮10克、澤瀉10克、茯苓15克。防風(fēng)15克、蒺藜30克,將上方加水后煎煮服用。一般情況下3-5劑即可見效。
5、維生素C注射液搽涂患處,每日2次,3天一個(gè)療程。對皮損的恢復(fù)有較好的效果。 方法:先將手洗干凈,待稍干后,用維生素C注射液倒人手掌內(nèi),然后雙掌將藥液擦勻,待藥液干后發(fā)白時(shí)洗掉。每日2次,每次2毫升。 療效:有報(bào)告用維生素C治療手脫皮患者,輕者1次顯效,重者3次顯效,數(shù)日可愈。
6、患者還應(yīng)保持樂觀情緒,避免精神緊張及情緒激動,盡量少接觸堿性洗滌劑??煞乐乖摪Y的發(fā)生。
7、生姜切碎放白酒內(nèi)泡24小時(shí)后涂在患處,每天1—2次,療效十分顯著。
8.鮮韭菜汁加紅白糖適量每日服一次連服4次有效。
帶狀皰疹:
帶狀皰疹(Herpes Zoster)是由水痘帶狀皰疹病毒引起的急性炎癥性皮膚病,中醫(yī)稱為”纏腰火龍”“纏腰火丹”,俗稱”蜘蛛瘡”。其主要特點(diǎn)為簇集水泡,沿一側(cè)周圍神經(jīng)作群集帶狀分布,伴有明顯神經(jīng)痛。初次感染表現(xiàn)為水痘,以后病毒可長期潛伏在脊髓后根神經(jīng)節(jié),免疫功能減弱可誘發(fā)水痘帶狀皰疹病毒可再度活動,生長繁殖,沿周圍神經(jīng)波及皮膚,發(fā)生帶狀皰疹。帶狀皰疹患者一般可獲得對該病毒的終生免疫。
〖病因〗
系由水皰-帶狀皰疹病毒所致。對此病毒免疫力的兒童被感染后,發(fā)生水痘。部分患者被感染后成為帶病毒者而不發(fā)生癥狀。由于病毒具有親神經(jīng)性,感染后可長期潛伏于脊髓神經(jīng)后根神經(jīng)節(jié)的神經(jīng)元內(nèi),當(dāng)機(jī)體抵抗力下降后,病毒活動繁殖而激發(fā)帶狀皰疹。
〖臨床表現(xiàn)〗
好發(fā)年齡中老年居多。長期服用類固醇皮質(zhì)激素或免疫抑制劑者多見。
病程一般為半個(gè)月左右。
好發(fā)部位肋間神經(jīng)及三叉神經(jīng)可支配的皮膚區(qū)域。
皮疹特點(diǎn)潮紅斑的基礎(chǔ)上出現(xiàn)群集的丘疹、水皰,粟粒至綠豆大小,皰液清亮,嚴(yán)重時(shí)可呈血性,或壞死潰瘍。皮疹單側(cè)分布呈帶狀為該病的特點(diǎn)。
自覺癥狀自覺疼痛,劇烈難忍。疼痛可發(fā)生在皮疹出現(xiàn)前,表現(xiàn)為感覺過敏,輕觸誘發(fā)疼痛。疼痛常持續(xù)至皮疹完全消退后,有時(shí)可持續(xù)數(shù)月之久。
皮疹初起為皮膚發(fā)紅,隨之出現(xiàn)簇集成群的綠豆大小丘疹,1-2天后迅速演變成為水泡,水泡沿神經(jīng)近端發(fā)展排列呈帶狀,數(shù)天后,皰壁松弛,皰液混濁,而后逐漸吸收,干痼。愈后遺留暫時(shí)性的紅斑或色素沉著
1、男性生殖器皰疹好發(fā)于男性的龜頭、冠狀溝、尿道口、陰莖、陰囊、大腿和臂部等處。
2、一般從接觸到發(fā)病約2-10天,也就是潛伏期?;疾〔课幌扔袩聘?,很快在紅斑基礎(chǔ)上發(fā)生3-10個(gè)成群的紅色丘疹,伴有瘙癢,丘疹很快變成小水皰,3-5天后變?yōu)槟摪?,破潰后形成大片的糜爛和潰瘍,自覺疼痛,最后結(jié)痂愈合。整個(gè)病程可持續(xù)20天左右。大多數(shù)男性病人有雙側(cè)腹股溝淋巴結(jié)腫大的癥狀。
3、后期炎癥波及尿道、膀胱時(shí),可出現(xiàn)排尿困難、尿痛、尿頻、嚴(yán)重者可發(fā)生尿潴留等現(xiàn)象。
4、還可能有其它癥狀同時(shí)出現(xiàn),如發(fā)熱、全身不適、頭痛、頸項(xiàng)強(qiáng)直、腦膜炎和骶部神經(jīng)系統(tǒng)功能不全。
5、發(fā)病人中約10%有咽炎,10%男性生殖器皰疹病人同時(shí)伴有生殖器以外的病損,主要在臂部與手指,常見生殖器出現(xiàn)皰疹后的第2周,大多是受感染的生殖器部位的病毒自身接種而致。
6、在患有生殖器皰疹的病人中,男性同性戀者可出現(xiàn)直腸Ⅱ型皰疹病毒肛門直腸感染,其發(fā)病僅次于淋球菌引起的男性肛門直腸炎。臨床表現(xiàn)為肛門直腸疼痛嚴(yán)重、便秘、排膿和里急后重,肛門可有皰和潰瘍。
主要癥狀: 生殖器皰疹HSV感染后平均約4~5日,外陰患部先有灼熱感,旋即發(fā)生成群丘疹,可為一簇或多簇,繼之形成水皰。數(shù)日后演變?yōu)槟摪?,破潰后形成糜爛或淺潰瘍,自覺疼痛,最后結(jié)痂自愈,病程約2~3周。皮損多發(fā)于男性的包皮、龜頭、冠狀溝和陰莖等處,偶見于尿道口;女性則多見于大小陰唇、陰蒂、陰阜、子宮頸等處,亦見于尿道口。原發(fā)性生殖器皰疹,往往伴有全身不適,低熱、頭痛等全身癥狀,局部淋巴結(jié)腫大。本病常復(fù)發(fā),復(fù)發(fā)性生殖器皰疹較原發(fā)者輕,損害小,往往無全身癥狀。男性同性戀可出現(xiàn)肛門直腸HSV-2感染,其發(fā)病率僅次于淋球菌所致的肛門直腸炎,臨床表現(xiàn)為肛門直腸疼痛、便秘、分泌物增加和里急后重,肛周可有皰疹性潰瘍,乙狀結(jié)腸鏡檢常見直腸下段粘膜充血、出血和潰瘍。 原發(fā)性生殖器皰疹臨床表現(xiàn): 潛伏期2-10日,平均為6日。發(fā)病部位男性為包皮、龜頭、冠狀溝、陰莖。偶可見于尿道、前列腺和精囊,同性戀者可發(fā)生于肛門、直腸;女性則為外陰、大小陰唇、陰蒂、陰道、宮頸,也可發(fā)生于肛門、直腸及尿道。原發(fā)性感染的癥狀往往比較嚴(yán)重,水皰出現(xiàn)前接種部位常先有灼熱、瘙癢或感覺異常,女性白帶增多,隨之局部出現(xiàn)淡紅色斑或丘疹,在此基礎(chǔ)上迅速出現(xiàn)芝麻至綠豆大群集性緊張水皰,皰液開始較清,逐漸可變成混濁甚至程膿性。皰壁較薄,易破潰形成潰瘍面較大,自覺疼痛,觸動后更明顯。 復(fù)發(fā)性生殖器皰疹的臨床表現(xiàn):常發(fā)生于原發(fā)性生殖器皰疹后1-3個(gè)月內(nèi)。由HSV-2感染引起者復(fù)發(fā)率較高,發(fā)作的頻率也較高。第1次感染后1年內(nèi)約60%的患者復(fù)發(fā),第1年的發(fā)作次數(shù)為4-6次,有些多達(dá)10次以上。復(fù)發(fā)性生殖器皰疹的癥狀,比原發(fā)性生殖器皰疹輕。復(fù)發(fā)性生殖器皰疹可合并骶骨神經(jīng)根病:表現(xiàn)為臀部或股部疼痛或感覺異常、尿潴留、陰莖不能勃起等。其它合并癥還有直腸炎、前列腺炎、尿道炎綜合征等。婦女發(fā)生宮頸癌的危險(xiǎn)性比一般婦女大5-10倍。 生殖器皰疹傳染源: 人是單純皰疹病毒的唯一自然宿主。發(fā)作期、恢復(fù)期患者,以及不顯癥狀的所謂健康帶菌者為本病的傳染源。主要通過病損處的水皰皰液、唾液及糞便中存在的病毒進(jìn)行傳播。本病主要通過性行為傳染,通過被污染物品的間接傳染較少。此外,患生殖器皰疹的母親,在分娩過程中,經(jīng)過產(chǎn)道可將病毒直接傳染給新生兒,或懷孕過程中患病,當(dāng)機(jī)體抵抗力低時(shí),病毒可通過胎盤傳給胎兒。某些因素如情緒激動、發(fā)熱、月經(jīng)來潮、性行為等,使?jié)摲谏窠?jīng)節(jié)內(nèi)的病毒活化后沿周圍神經(jīng)下行至表皮細(xì)胞引起局部病損。 【生殖器皰疹潛伏期】 HSV感染的潛伏期為1周至2個(gè)月。 HSV-1感染與HSV-2感染: 原發(fā)性生殖器皰疹感染者為HSV-1型,經(jīng)過一定的靜止時(shí)期,繼而復(fù)發(fā)病變?yōu)镠SV-2型,形成周期性復(fù)發(fā)。每次發(fā)作的病程也較短,不用藥通常7天左右也可消退,繼而再犯,發(fā)熱、月經(jīng)、精神創(chuàng)傷、酗酒、食物及藥物都有可能導(dǎo)致加快復(fù)發(fā)的時(shí)間。 HSV-1主要引起口唇皰疹,咽炎,角膜結(jié)膜炎和散發(fā)性腦炎,而HSV-2感染主要引起生殖器皰疹,但在臨床上也有相反情況。 HSV-1感染主要發(fā)生于口角、唇緣、鼻孔等皮膚粘膜交界處,亦可見顏面或口唇,開始局部先有灼癢及輕度緊張感,偶有伴發(fā)神經(jīng)痛。隨即出現(xiàn)紅斑,在紅斑基礎(chǔ)上發(fā)生簇集性小丘疹,迅速變?yōu)樗诹V辆G豆大小的水皰,內(nèi)容澄清,水皰破裂后出現(xiàn)糜爛面,數(shù)日后干燥結(jié)痂。自覺灼癢,偶有倦怠,不適和輕微發(fā)熱等全身癥狀,愈合可遺留暫時(shí)性色素沉著。全病程1-2周左右。 HSV-2感染主要發(fā)生于生殖器部位,患部先有燒灼感,很快在紅斑的基礎(chǔ)上發(fā)生成群的小水皰,多見男性包皮、龜頭、冠狀溝、陰莖等處,偶見于尿道;女性常見于陰唇、陰蒂、陰道、宮頸等處。水皰可逐漸變成膿皰,約6天左右破潰而形成糜爛或淺的潰瘍,自覺疼痛。病人可發(fā)生尿道炎,出現(xiàn)排尿困難。多數(shù)人有腹股溝淋巴結(jié)腫大疼痛,有的病人可出現(xiàn)發(fā)熱、肌肉痛及腦膜炎癥狀。如發(fā)于女性宮頸者可形成潰瘍壞死,陰道分泌物增多,可有下腹痛。應(yīng)注意有無宮頸癌發(fā)生。孕期患生殖器皰疹時(shí)易致流產(chǎn)、早產(chǎn)或死胎,并易使新生兒感染,發(fā)生新生兒單純皰疹。本病一般經(jīng)過3周左右可以痊愈,但常有反復(fù)發(fā)作,一般原發(fā)疹后2-5個(gè)月內(nèi)復(fù)發(fā),癥狀較原發(fā)者輕,范圍亦小,局限于生殖器部位,有時(shí)僅有1-2個(gè)皰疹,病程亦短,自發(fā)病至愈合6-10天。本病也可伴有生殖器以外部位的感染,如口唇、臂部及中樞神經(jīng)系統(tǒng)等。 【生殖器皰疹種類】 初次感染生殖器皰疹的患者中,80%~90%為隱性感染,即沒有臨床癥狀,顯性感染只是少數(shù),一般初次感染恢復(fù)后多數(shù)轉(zhuǎn)為潛伏感染。 1.原發(fā)性生殖器皰疹 潛伏期2~7天,原發(fā)損害是1個(gè)或多個(gè)小而瘙癢的紅丘疹,迅速變成小水皰,3~5天后可形成膿皰,破潰后形成糜爛、潰瘍、結(jié)痂,伴有疼痛。皮損單發(fā)或融合,男性好發(fā)于龜頭、冠狀溝、陰莖體或尿道口,女性多在陰唇、肛周或陰道發(fā)疹,約90%同時(shí)侵犯子宮頸,也可累及直腸粘膜。常伴有發(fā)熱、頭痛、乏力、肌痛、腹股溝淋巴結(jié)腫大和壓痛。癥狀持續(xù)1~2周,一般3~4周皮損結(jié)痂、愈合。 2.復(fù)發(fā)性生殖器皰疹 多在原發(fā)感染后1~4個(gè)月內(nèi)復(fù)發(fā)。復(fù)發(fā)性生殖器皰疹的臨床表現(xiàn)與原發(fā)性的相似,但癥狀輕,皮疹范圍小,病程也短,一般在數(shù)日內(nèi)可自愈。復(fù)發(fā)前1~2天,局部常有刺癢或燒灼感等前驅(qū)癥狀。臨床上所見到的復(fù)發(fā)性生殖器皰疹患者絕大部分為男性,女性患者由于癥狀不明顯常不來就診。復(fù)發(fā)與發(fā)熱、月經(jīng)、日曬、寒冷、某些病毒感染有關(guān)。 3.直腸肛門皰疹病毒感染 發(fā)生在男性同性戀者?;颊吒亻T直腸疼痛,肛門有分泌物,大便時(shí)有里急后重感。 4.孕婦、新生兒HSV感染 孕婦發(fā)生原發(fā)性生殖器皰疹??蓪?dǎo)致流產(chǎn)、早產(chǎn)、胎兒異常甚或死胎。50%新生兒感染是發(fā)生在經(jīng)原發(fā)感染孕婦產(chǎn)道分娩時(shí),可出現(xiàn)高熱、皰疹、肝脾淋巴結(jié)腫大、腦炎,甚或敗血癥,可致死亡。而孕婦復(fù)發(fā)感染時(shí),新生兒感染的機(jī)會只有5%。
一、癥狀
HSV感染是一種全身性疾病,病毒經(jīng)呼吸道、口腔、生殖器粘膜或破損皮膚進(jìn)入人體,可潛于人體正常粘膜、血液、唾液以及局部感覺神經(jīng)節(jié)和多數(shù)器官內(nèi),幾乎所有的內(nèi)臟和粘膜表皮內(nèi)都可分離到HSV。
原發(fā)感染多為隱性,大多無臨床癥狀或呈亞臨床表現(xiàn),僅有少數(shù)(約1-10%)可以出現(xiàn)臨床癥狀。主要見于免疫功能低下嬰幼兒或嚴(yán)重營養(yǎng)不良或有其它感染的兒童,成人罕見。原發(fā)感染消退后,病毒可持續(xù)潛居體內(nèi)。正常人中約有半數(shù)以上為本病毒的攜帶者,可通過口、鼻分泌物而成為傳染源,由于HSV在人體中不產(chǎn)生永久免疫力,故每當(dāng)機(jī)體抗病能力減退時(shí),如患某種發(fā)熱性傳染病,胃腸功能紊亂、月經(jīng)、妊娠、病灶感染、過度疲勞、情緒環(huán)境改變時(shí),體內(nèi)潛伏的HSV即被激發(fā)而發(fā)病。
HSV-1主要引起口唇皰疹,咽炎,角膜結(jié)膜炎和散發(fā)性腦炎,而HSV-2感染主要引起生殖器皰疹,但在臨床上也有相反情況。
HSV感染的潛伏期為1-45天,平均為6天,HSV-1感染主要發(fā)生于口角、唇緣、鼻孔等皮膚粘膜交界處,亦可見顏面或口唇,開始局部先有灼癢及輕度緊張感,偶有伴發(fā)神經(jīng)痛。隨即出現(xiàn)紅斑,在紅斑基礎(chǔ)上發(fā)生簇集性小丘疹,迅速變?yōu)樗诹V辆G豆大小的水皰,內(nèi)容澄清,水皰破裂后出現(xiàn)糜爛面,數(shù)日后干燥結(jié)痂。自覺灼癢,偶有倦怠,不適和輕微發(fā)熱等全身癥狀,愈合可遺留暫時(shí)性色素沉著。全病程1-2周左右。
HSV-2感染主要發(fā)生于生殖器部位,患部先有燒灼感,很快在紅斑的基礎(chǔ)上發(fā)生成群的小水皰,多見男性包皮、龜頭、冠狀溝、陰莖等處,偶見于尿道;女性常見于陰唇、陰蒂、陰道、宮頸等處。水皰可逐漸變成膿皰,約6天左右破潰而形成糜爛或淺的潰瘍,自覺疼痛。病人可發(fā)生尿道炎,出現(xiàn)排尿困難。多數(shù)人有腹股溝淋巴結(jié)腫大疼痛,有的病人可出現(xiàn)發(fā)熱、肌肉痛及腦膜炎癥狀。如發(fā)于女性宮頸者可形成潰瘍壞死,陰道分泌物增多,可有下腹痛。應(yīng)注意有無宮頸癌發(fā)生。孕期患生殖器皰疹時(shí)易致流產(chǎn)、早產(chǎn)或死胎,并易使新生兒感染,發(fā)生新生兒單純皰疹。本病一般經(jīng)過3周左右可以痊愈,但常有反復(fù)發(fā)作,一般原發(fā)疹后1-4個(gè)月內(nèi)復(fù)發(fā),癥狀較原發(fā)者輕,范圍亦小,局限于生殖器部位,有時(shí)僅有1-2個(gè)皰疹,病程亦短,自發(fā)病至愈合8-12天。本病也可伴有生殖器以外部位的感染,如口唇、臂部及中樞神經(jīng)系統(tǒng)等。
二、體征
皮損為紅斑基礎(chǔ)上可見成群的水皰或膿皰或成糜爛及潰瘍。女性患者約90%伴有HSV宮頸炎,宮頸可見發(fā)紅、糜爛、潰瘍,有膿性陰道分泌物。有的患者可有腹股溝淋巴結(jié)腫大壓痛或體溫升高。皮膚病變也可出現(xiàn)在口唇、手指、臀部、大腿、手臂,甚至眼部與咽喉。并發(fā)腦膜炎或橫貫性脊髓炎,一般于發(fā)疹后3-12天出現(xiàn)頸項(xiàng)強(qiáng)直等顱內(nèi)壓增高的現(xiàn)象。
三、潛伏感染和復(fù)發(fā)
HSV感染人體后1周左右,血中出現(xiàn)中和抗體,3-4周達(dá)高峰,可持續(xù)多年,這些抗體能清除病毒和使機(jī)體康復(fù),但大多數(shù)個(gè)體不能徹底消滅病毒,也不能阻止復(fù)發(fā),病毒以潛伏狀態(tài)長期存在宿主體內(nèi)。不同亞型HSV感染者急性首發(fā)生殖器皰疹的臨床過程相似,但生殖器病變復(fù)發(fā)率不同,首發(fā)HSV-2感染者約90%,在12個(gè)月內(nèi)會出現(xiàn)一次復(fù)發(fā)(平均復(fù)發(fā)4次),而初次感染HSV-1者僅50%出現(xiàn)類似復(fù)發(fā)(平均復(fù)發(fā)次數(shù)小于1)。不同個(gè)體及同一病人一生中生殖器HSV-2感染的復(fù)發(fā)率變化很大,大多數(shù)年復(fù)發(fā)5-9次,一般在原發(fā)皰疹消退后1-4個(gè)月內(nèi)發(fā)生,有些患者受到促發(fā)因素,如發(fā)熱、月經(jīng)、日曬、寒冷、某些病毒感染等的影響而復(fù)發(fā),其特點(diǎn)是每次復(fù)發(fā)往往發(fā)生在同一部位,復(fù)發(fā)前可有前驅(qū)癥狀如局部瘙癢,發(fā)疹前數(shù)小時(shí)感染部位有灼燒,麻刺感。
復(fù)發(fā)生殖器皰疹(GH)對患者心理影響較大,由于目前尚無預(yù)防復(fù)發(fā)的有效療法及可能有誘發(fā)生殖器惡變的危險(xiǎn)性,故給患者帶來心理影響,患者多有抑郁、恐懼等心理障礙,這又直接影響HSV的復(fù)發(fā)。我們的治療經(jīng)驗(yàn),只要患者堅(jiān)持規(guī)律治療,都能治愈。
四、HSV與HIV感染:
HSV常與HIV-1同時(shí)感染,并能促進(jìn)病情發(fā)展,引起嚴(yán)重的局部和播散性感染。目前認(rèn)為HSV是一種調(diào)節(jié)因素,能激活HIV復(fù)制,Heng對6例AIDS合并生殖系統(tǒng)HSV皮膚損害患者進(jìn)行皮膚活檢,發(fā)現(xiàn)角化細(xì)胞和巨噬細(xì)胞均有HIV-1和HSV-1雜交后使HIV-1保留其感染性,而無需與CD4分子結(jié)合即能進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。此外HSV-1能刺激潛伏型HIV-1,而增加HIV-1/HSV-1共同感染和在組織中的復(fù)制。
表皮細(xì)胞發(fā)生氣球樣變性,其中可見有嗜酸性包涵體。表皮開始為網(wǎng)狀變性形成的多房性水皰,以后聚合為單房性水皰。真皮乳頭層有輕度水腫,有輕重不等炎性細(xì)胞浸潤。反應(yīng)嚴(yán)重時(shí)可有嚴(yán)重血管炎表現(xiàn)。
HSV感染的診斷要依據(jù)病史、臨床表現(xiàn)和實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果而定。有不潔性交史,而且在生殖器部位出現(xiàn)皮膚紅斑和原發(fā)性水皰,易復(fù)發(fā)等不難診斷。必要時(shí)可作皰液涂片,培養(yǎng)、接種、免疫熒光檢查。血清免疫抗體測定等,均有助于診斷和確定病毒類型。
一、細(xì)胞學(xué)方法
對皮損刮片做Wright-Gemsa(Tzanck試驗(yàn))或Papanicolaou染色,可檢出HSV感染特征的巨細(xì)胞包函體,但不能區(qū)別HSV感染或水痘―帶狀皰疹病毒感染,敏感性僅為病毒分離的60%。
二、培養(yǎng)法
從水皰底部取材做組織培養(yǎng)分離病毒,為目前較敏感、最特異的檢查方法,需5-10天,因其技術(shù)條件要求高,價(jià)格昂貴,不能普遍使用。
三、抗體檢測
目前最廣泛的是HSV-2抗體檢測,如蛋白印跡法也可用gD2作抗原檢測HSV-2抗體,具有敏感性,且能區(qū)分HSV-1和HSV-2的優(yōu)點(diǎn)。
四、基因診斷
(一)用PCR分型檢測單純皰疹病毒
PCR是一種敏感性高,特異性強(qiáng)的快速檢測方法,標(biāo)本中含有1fgHSV-DNA就可以檢出,其在HSV感染的診斷研究中發(fā)展較快,且分型檢測HSV是發(fā)展的趨勢。
1、標(biāo)本采集和處理
(1)標(biāo)本采集
①腦脊液:直接無菌采取患者0.5ml腦脊液標(biāo)本于無菌試管送檢.如肉眼可見血色,應(yīng)離心取上清。
②羊水及嬰兒血清:同上,應(yīng)避免溶血.
③腦組織:腦組織尸檢、活檢標(biāo)本,加1mlPBS標(biāo)本緩沖液研磨后,待檢。
④眼及皮膚病灶分泌物:用預(yù)測(半干)棉拭子直接取患處分泌物,置1mlPBS標(biāo)本緩沖液中送檢。
⑤生殖器(宮頸、陰道、外陰、陰莖)標(biāo)本:先用消毒棉拭子擦去病變部位表面粘液、污垢,再用預(yù)潮棉拭子用力擦拭患處分泌物,置1mlPBS標(biāo)本緩沖液中送檢。
(2)標(biāo)本處理
①預(yù)處理:所有液體標(biāo)本均可直接進(jìn)行模板制備;可以取100μl標(biāo)本液,離心5000r/min×5min后,去上清,取沉淀物進(jìn)行模板制備。
②模板制備:a:蛋白酶K消化裂解法:沉淀物加100μl蛋白酶K消化裂解液,55℃1h后,煮沸10min,離心5000r/min×5min,收集上清。b:水煮法:沉淀物加100μl蒸餾水,搖均水煮20min,離心5000r/min×5min收集上清。c:1%TritonX-100裂解法:取采集的標(biāo)本液100μl,加入1μlTritonX-100,水煮20min,5000r/min×5min,收集上清。d:5%NP-40裂解法:取采集的標(biāo)本液100μl,加5μlNP-40,水煮20min,5000r/min×5min收集上清。e:如標(biāo)本溶血嚴(yán)重經(jīng)上述裂解處理后,再加等體積酚-氯仿抽提、冷乙醇沉淀DNA,加10μlDW溶解待檢。
2、PCR擴(kuò)增
(1)引物設(shè)計(jì)。以HSVDNA聚合酶的高保守區(qū)為檢測靶序列以確保特異性。設(shè)計(jì)3個(gè)引物,一個(gè)上游共同性引物,DNAP5(5′ATGGTGAAAACATCGACATGTACGG3′):二個(gè)下游特異性引物,DNAP3-1(5′CCTCGCGTTCGTCCTCGTCCTCC3′)和DNAP3-2(5′CCTCCTTGTCGAGGCCCCGAAAC3′),可以分別擴(kuò)增出HSV-1469bpDNA片段(1981~2359)、HSV-2391bp片段(1561~1953):從二型PCR擴(kuò)增產(chǎn)物中設(shè)計(jì)了一個(gè)不分型的特異性探針HSVP35‘GGCGTAGTAGGCGGGGATGTCGCG3‘)。
(2)PCR實(shí)驗(yàn)體系。取模板10μl:DNAP50.5(0.2μmol/L):DNAP3-10.5μl(0.2μmol/L):DNAP3-20.5μl(0.2μmol/L):4×dNTP8μl(4×200μmol/L):10×dNTP8μl(4×200μmol/L);10×緩沖液10μl:DMSO4μl;加DW65.5μl;石蠟油30μl.。
水煮(96℃~100℃)7min
加TaqDNA聚合酶1μl;(2.5U)
72℃4min
↓
95℃40s
↓
65℃60s→72℃70s
↓33個(gè)循環(huán)
70℃4min
3.擴(kuò)增產(chǎn)物的檢測和分析
(1)瓊脂糖凝膠電泳染色法:取擴(kuò)增產(chǎn)物20μl加樣品緩沖液4μl混勻后,點(diǎn)樣于2%瓊脂糖凝膠板,70V電泳15~20min,溴化乙錠(EB)染色5min,于紫外燈下觀察結(jié)果在溴酚藍(lán)后面有一條或二條亮紅帶為陽性結(jié)果,HSV-2帶在前,HSV-1帶在后,無帶則為陰性結(jié)果。
(2))XhoI酶譜法:取HSV-1型PCR產(chǎn)物50μl加XhoI50U,37℃1h后,置3%瓊脂糖凝膠中,70V電泳15~20min,可產(chǎn)生46bp片段帶(引物后面);與正常PCR產(chǎn)物比較,XhoI酶切后的大片段電泳位置前移。
(3)Southern印跡法:PCR產(chǎn)物20μl經(jīng)電泳分離后,用變性液處理60min,再用中和液處理90min,轉(zhuǎn)移至硝酸纖維素膜上:80℃烤膜2h,42℃預(yù)雜交(雜交液中)30min,加入32p標(biāo)記HSVP3探針后,42℃雜交過夜;次日用1%SDS/PBSpH7.2,42℃洗15min,0.5%SDS/PBSpH7.2,42℃洗15min;膜置X線暗盒內(nèi)放射性自顯影12~15h,顯影為陽性,不顯影為陰性。
(二)套式PCR
套式PCR(nestedprimers-polymerasechainreaction,NP-PCR)是通過“外側(cè)”、“內(nèi)側(cè)”兩對引物,即一對擴(kuò)增較大DNA片段的“外側(cè)”引物和一對位于擴(kuò)增產(chǎn)物中再擴(kuò)增小片段的“內(nèi)側(cè)”引物,這樣兩次連續(xù)放大可以提高PCR檢測的靈敏度,保證產(chǎn)物的特異性。但該方法不能分型,能100%檢出HSV-1,50%檢出HSV-2,應(yīng)改進(jìn)分型檢測HSV,更好地在臨床應(yīng)用和基礎(chǔ)研究中推廣應(yīng)用。
1、標(biāo)本處理:
(1)標(biāo)本采集同上
(2)DNA制備:①腦脊液:取100μlCSF水煮15min,加入250μl無水乙醇,放-30℃10min;離心10000g30min,去上清,30℃干燥后,加入10μlDW;②腦組織細(xì)胞:取沉淀物加100μl蛋白酶K消化裂解液,56℃作用1h,水煮10min;取上清加入等體積酚一氯仿(V/V),輕搖10min,離心10000r/min×10min;取水相,加入250μlDW溶解。
2、PCR擴(kuò)增
(1)引物設(shè)計(jì):選擇HSV1糖蛋白D基因?yàn)闄z測靶基因。
NP-PCR的引物和探針序列
“外”引物
BJHSV1.1ATCACGGTAGCCCGGCCGTGTGACA19-43
BJHGV1.2CATACCGGAACGCACCACACAA218-239
“內(nèi)引物”
BJHSV1.3CCATACCGACCACACCGACGA51-79
BJHSV1.4CGTAGTTGGTCGTTCGCGCTGAA166-188
探針
BJHSV-1PROTACGAGGAGGAGCTGTATAACAAAGTCTGT96-125
(2)PCR實(shí)驗(yàn)體系和程序:反應(yīng)體積為50μl;模板10μl;BJHSV1.10.5μl(0.2pmol/L);BJHSV1.20.5μl(0.2pmol/L);10×緩沖液5μl;4×dNTP4μl(4×200mmol/L);DW27μl;石蠟油30μl。循環(huán)參數(shù)為95℃30s;55℃30s;72℃60s;循環(huán)20次,取其擴(kuò)增產(chǎn)物1μl加入含有BJHSV1.3和BJHSV1.4反應(yīng)體系中進(jìn)行套式擴(kuò)增,先95℃變性2min,循環(huán)參數(shù)為95℃30s;55℃30s;72℃60s;循環(huán)30次后,72℃延伸5min;。
(3)擴(kuò)增產(chǎn)物分析:
①瓊脂糖凝膠電泳染色法:
取擴(kuò)增產(chǎn)物10μl點(diǎn)樣于2%瓊脂糖凝膠中,70V電泳15-20min,溴化乙錠染色5min,于紫外燈下觀察結(jié)果,在溴酚蘭后面有一條,或二條亮紅條帶為陽性結(jié)果,HSV-2帶在前,HSV-1帶在后,無帶則為陰性結(jié)果。
②Southern印跡法:
PCR產(chǎn)物20μl經(jīng)電泳分離后,用變性液處理60min,再用中和液處理90min,轉(zhuǎn)移至硝酸纖維素膜上,80℃烤膜2h,42℃預(yù)雜交(雜交液中)30min,加入32P標(biāo)記HSV探針后,42℃雜交過夜,次日用1%SDS/PBSpH7。2,42℃洗15min,0.5%SDS/PBSpH7.2,42℃洗15min;膜置X線暗盒內(nèi),放射性自顯影12-15h,,顯影為陽性,不顯影為陰性。
(三)、聚合酶鏈反應(yīng)―酶譜法(polymerasechainreaction-endonucleasecleavagePCR-EC)
具有經(jīng)濟(jì)廣泛等特點(diǎn);不僅能一次性分型檢測HSV-1,HSV-2,EBV,CMV四種病毒,而且方法本身快速、方便、無放射線損傷,易被實(shí)驗(yàn)室接受??蓹z出3個(gè)CFU的HSV1,靈敏度高,能檢測出中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染第1dCSF中HSVDNA陽性結(jié)果,并可用于藥物治療效果的評價(jià)。由于病毒的變異性,會出現(xiàn)酶切點(diǎn)突變丟失現(xiàn)象,從而造成酶切陰性結(jié)果。對此可以通過型特異性探針或序列分析解決。
1.標(biāo)本處理
(1)標(biāo)本采集,方法同上。
(2)DNA模板制備:每份標(biāo)本取200μl,按200μg/ml加入蛋白酶k,56℃作用1h;
加入等體積的酚―氯仿(v/v)輕搖10min,離心1000r/min×5min;取水相加入500μl(2.5倍體積)無水乙醇,-20℃過夜沉淀DNA,離心15000r/min×5min,吸去液體,30℃干燥后,加蒸餾水25μl溶解,待檢。
2.引物設(shè)計(jì):
P1,5′CGACTTTGCCAGCCTGTACC3′
P2,5′AGTCCGTGTCCCCGTAGATG3′
(1)PCR實(shí)驗(yàn)體系:
反應(yīng)體積100μl;模板10μl;P10.5μl(10pmol/L),P20.5μl(10pmol/L);4×dNTP4μl(4×200mmol/L);10×緩沖液10μl,DMSD5μl,DW65μl,循環(huán)參數(shù)為94℃60s;60℃60s;72℃60s;循環(huán)40次72℃延伸4min。
(2)擴(kuò)增產(chǎn)物檢測與酶切分型.
①第一步電泳鑒定:取10μlPCR產(chǎn)物加4μl樣品緩沖液,加入2%瓊脂糖凝膠板,70V電泳(5-20min)加EB染色5min后,紫外燈下觀察,可初步鑒定擴(kuò)增產(chǎn)物大小。
②酶切分析:分別取20μlPCR產(chǎn)物于2個(gè)Eppendorf管中,加入50μl無水乙醇,-20℃沉淀DNA,再分別用20μlSmal和BamHI反應(yīng)緩沖液溶解,加入SmaI或BamHI50U于相應(yīng)Eppendorf管內(nèi),37℃作用1h。
③第二步電泳分型,取10μlPCR酶切物加4μl樣品緩沖液,加到2%瓊脂糖凝膠中,70V電泳,15-20min后,EB染色5min,與同步加入未酶切的PCR產(chǎn)物相對照。紫外燈下觀察,結(jié)果如下:
PCR-EC法檢測四種病毒結(jié)果
病毒型號靶片段SmaIBamHI
HSV1518bp476bp+42bp
HSV2518bp―225+293bp
EBV524bp100bp+424bp277bp+247bp
CMV589bp不需酶切,第一步電泳就可以區(qū)分
(四)用RT-PCR檢測單純皰疹病毒
RNA的聚合酶鏈反應(yīng)(RNA-PCR),可能通過檢測HSV不同期的RNA,這不僅可診斷HSV感染,而且有利于HSV的潛伏期感染機(jī)制的深入研究。
RT-PCR是以RNA為模板經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)(RT)產(chǎn)生cDNA,再以cDNA為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增以達(dá)到檢測目的。因此,RNA-PCR也可稱為RT-PCR。
1、標(biāo)本處理:
組織塊細(xì)胞總RNA提取,取100mg組織標(biāo)本,加1ml硫氰酸胍變性液,于勻漿器中,室溫研磨均勻后,移入2.5mlEppendorf管中。依次加入0.1ml3mol/L(pH4.0)NaAc,1ml水飽和酚和0.2ml氯仿一異戊醇混勻,用力振搖10s,置冰浴15min。10000g4℃,離心20min,取上清水相(上層DNA、下層DNA和變性蛋白質(zhì))加入等體積異丙醇置-20℃1h,沉淀RNA。離心15000r/min×10min,棄上清,RNA重新用0.3ml硫氰酸胍變性液溶解,再加0.3ml異丙醇沉淀,-20℃1h,沉淀RNA.離心15000r/min×10min,去上清,沉淀RNA用75%冷乙醇洗一次,真空干燥。.加10μlTE緩沖液(pH7.4)溶解,低溫保存?zhèn)溆?臨用前冰浴溶解。
2、PCR擴(kuò)增:
(1)引物設(shè)計(jì):選擇HSV-1ICPO基因(極早期)為檢測靶基因.設(shè)計(jì)2個(gè)引物,
P15′GGATCCTCACGTGGTTACCCGCGGTCT3′
P25′AAGCTTCCGGGGCCGTCCCCGCGGGCG3′可以擴(kuò)增ICPO中266bp序列。
1個(gè)探針:5′CCGGCTGGAGCCGCCGCACCCTGCT3′。
(2)PCR實(shí)驗(yàn)體系:總反應(yīng)體積為50μl,模板10μl(0.25-1.0μg)P11μl(20pmol/L);P21μl(20pmol/L);4×dNTP4μl(200μmol/L);10×緩沖液5μl;AMV(逆轉(zhuǎn)錄酶)2μl(50U);DW26μl;循環(huán)參數(shù),94℃變性2min后94℃50s,60℃60,72℃60s,循環(huán)40次后72℃延伸5min。
3、擴(kuò)增產(chǎn)物的鑒定:
(1)瓊脂糖凝膠電泳染色法:取10μlPCR擴(kuò)增產(chǎn)物加4μl樣品緩沖液,混勻后加樣2%瓊脂糖凝膠板,70V電泳15-20min,EB染色5min。紫外燈下觀察擴(kuò)增條帶。
(2)Southern印跡雜交法:用32P標(biāo)記的特異性探針檢測PCR產(chǎn)物,方法同上。
總之,在HSV感染性疾病的臨床診斷中,PCR能對前病毒或潛伏期低復(fù)制的HSV特異性靶DNA片段進(jìn)行擴(kuò)增檢測,遠(yuǎn)較DNA探針敏感,并能在血清中抗體出現(xiàn)前就可以檢出。因此,PCR無論是作為基礎(chǔ)研究手段,還是作為臨床檢驗(yàn)診斷方法,均具有廣闊的前景。
五、病理組織學(xué)診斷
細(xì)胞內(nèi)水腫,基底層形成大水皰,病灶周圍有多核巨細(xì)胞浸潤,特別是多核白細(xì)胞與淋巴細(xì)胞充斥于病灶中間。
1.原發(fā)性GH
(1)潛伏期:為2~7天,常為3~5天。
(2)好發(fā)部位:男性多發(fā)生于龜頭、冠狀溝、尿道口、陰莖體及陰囊。女性好發(fā)于外陰、陰道及宮頸。兩性均可見于肛周、大腿及臀部。
(3)皮損形態(tài)及演變:患處先有燒灼感,隨即出現(xiàn)多個(gè)群集的紅色斑丘疹,并迅速變成小水皰。皰液起初清亮,以后漸變?yōu)槟撔?。水皰易破潰,形成糜爛或淺潰瘍,伴明顯疼痛。之后結(jié)痂而愈,病程約2~4周。
(4)全身癥狀:發(fā)病前或發(fā)病時(shí)可有全身癥狀,如發(fā)熱、頭痛、全身不適、頸項(xiàng)強(qiáng)直和骶2~4段感覺異常,或有排尿困難和白帶增多。幾乎所有患者均可伴腹股溝淋巴結(jié)腫大及壓痛。
2.復(fù)發(fā)性GH
約在原發(fā)性GH痊愈后1~4個(gè)月發(fā)生。首次HSV-2感染后1年內(nèi)近60%的患者復(fù)發(fā),第1年內(nèi)可復(fù)發(fā)4~6次,以后復(fù)發(fā)次數(shù)減少。eves等發(fā)現(xiàn)在生殖器感染者中,HSV-1感染者復(fù)發(fā)率為14%,而HSV-2感染者則有60%復(fù)發(fā)。
復(fù)發(fā)性GH患者可有上述激發(fā)因素,或有前驅(qū)癥狀,全身癥狀較輕,復(fù)發(fā)部位多在原處,病程也較短,皮損約經(jīng)10天左右即消退。由于病損反復(fù)發(fā)作,難以控制,患者易出現(xiàn)精神負(fù)擔(dān)和性功能障礙,甚至發(fā)生抑郁癥等。但其損害與原發(fā)性者甚為相似。
3.特殊型GH
(1)男性同性戀者GH:本病僅次于淋球菌引起的肛門直腸炎。有人從62例有肛門直腸癥狀但淋球菌檢查陰性的男性同性戀者中,29%檢出了HSV-2。臨床表現(xiàn)多為嚴(yán)重的肛門、直腸疼痛,其他癥狀為便秘、肛門內(nèi)有分泌物、里急后重和發(fā)熱等。部分病人肛周有水皰或潰瘍。
(2)孕婦和新生兒GH:孕婦患GH后,其后果嚴(yán)重。對妊娠GH患者HSV-2攜帶者來說,最重要的是傳染給新生兒。當(dāng)產(chǎn)道內(nèi)存在HSV-2時(shí),可有40%~60%的新生兒遭受感染,感染嚴(yán)重者可致死亡。
在妊娠早期,患GH的孕婦可影響胎兒,導(dǎo)致流產(chǎn)或死胎。新生兒的先天性感染,出生時(shí)可出現(xiàn)帶狀分布的皰疹、癲癇發(fā)作、出血傾向與肝脾腫大。如通過產(chǎn)道感染或胎膜早破而發(fā)生逆行感染時(shí),輕者出生后數(shù)日至數(shù)周可無臨床癥狀,早期可僅有吃奶較差、興奮,以后可發(fā)生病毒血癥或皰疹性腦炎,重者發(fā)生播散性HSV感染,可出現(xiàn)高熱、呼吸困難、出血及中樞神經(jīng)系統(tǒng)病變,預(yù)后不良。
因此,妊娠足月患GH者,如時(shí)間允許,應(yīng)每周從陰道及子宮頸取材,檢查有無病毒感染,若細(xì)胞學(xué)或病毒培養(yǎng)陽性而羊膜尚完整,或破裂后不足6h,建議剖宮產(chǎn),以避免胎兒經(jīng)陰道分娩而發(fā)生新生兒HSV感染。
HSV-2感染與宮頸癌:有證據(jù)表明,生殖器HSV-2感染可能與宮頸癌的發(fā)生有關(guān)。血清流行病學(xué)檢查發(fā)現(xiàn),宮頸癌患者血清中抗HSV-2抗體較對照組婦女明顯增高。Nahmias等發(fā)現(xiàn),GH患者發(fā)生宮頸非典型增生者為對照組的2倍,而發(fā)生原位癌者則為對照組的8倍。近年來研究證明,患侵襲性宮頸癌和癌前期病變的婦女宮頸脫落細(xì)胞中,HSV-2抗原陽性率明顯高于對照組,這種HSV-2抗原位于腫瘤細(xì)胞的胞質(zhì)內(nèi),提示為腫瘤細(xì)胞表達(dá)的病毒抗原。有人發(fā)現(xiàn),宮頸有高度非典型增生、原位癌及鱗狀細(xì)胞癌者的活檢組織中,用間接免疫熒光染色可發(fā)現(xiàn)其中的HSV-2抗原。應(yīng)用DNA-RNA原位雜交技術(shù)在宮頸癌和癌前期組織中67%可發(fā)現(xiàn)HSV-2特異性mRNA。Frenkel等在宮頸癌組織中檢出HSV-2的DNA。還有作者從手術(shù)切除后經(jīng)放射的宮頸癌病變組織中分離出了HSV-2。
HSV-2感染與HIV感染與其他生殖器潰瘍性疾病一樣,GH增加了HIV感染的危險(xiǎn)性。HSV感染是HIV感染的輔助因子。在HIV感染者尤其是HIV感染的同性戀者中,HSV-2感染率更高,且GH的并發(fā)癥多而嚴(yán)重。在AIDS患者中,耐阿昔洛韋(無環(huán)鳥苷)的HSV毒株感染多見。
根據(jù)病史、癥狀和皮膚或黏膜表現(xiàn),一般不難作出診斷。必要時(shí)可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢查,以明確病原體。
中醫(yī)病機(jī)和辨證本病多因體內(nèi)蘊(yùn)熱,外感毒邪,熱毒相結(jié),肝膽二經(jīng)濕熱下注而生;或因肌膚虛弱,邪毒留膚,遇熱即發(fā)。
中醫(yī)辨證分型
1.濕熱下注型
主證:患處水皰、糜爛、癢痛交作,大便秘結(jié),小便短赤。舌紅,苔黃膩,脈弦滑數(shù)。
辨證:濕熱下注,外感毒邪。
2.肝腎虧損型
主證:病情反復(fù)發(fā)作,兼有心煩寐少,腰酸頭昏,食少乏味,口干咽燥。舌質(zhì)淡,脈沉細(xì)。
辨證:清熱化濕,養(yǎng)肝滋腎。
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