日前,由第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院血液科等單位的研究人員完成的一項(xiàng)國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目證明,氨基葡萄糖硫酸鹽(GS)能誘導(dǎo)白血病K562細(xì)胞凋亡。這一研究成果,為臨床治療白血病提供了理論依據(jù)。
現(xiàn)已證明,許多抗腫瘤藥物能誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡,Caspase(天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶)和bcl-2家族等分子在其中起重要作用。Caspase-3的活化是凋亡的早期現(xiàn)象,能啟動(dòng)細(xì)胞的凋亡損害。bcl-2基因是最早發(fā)現(xiàn)和研究較多的細(xì)胞凋亡抑制基因,其功能是抑制細(xì)胞凋亡,當(dāng)細(xì)胞凋亡時(shí)其表達(dá)減少。
氨基葡萄糖硫酸鹽(GS)是在氨基葡萄糖單體的基礎(chǔ)上進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾而得到的。為探討GS對(duì)慢性髓系白血病K562細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)作用和分子機(jī)理,研究人員采用臺(tái)盼藍(lán)拒染法測(cè)定細(xì)胞生長(zhǎng)曲線來觀察GS對(duì)K562細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用。取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期K562細(xì)胞,以0.5、1.0、5.0毫摩爾/升不同濃度的GS作用48小時(shí)后,利用細(xì)胞計(jì)數(shù)、電鏡、吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)染色、DNA梯狀電泳、流式細(xì)胞儀等方法來觀察GS對(duì)K562細(xì)胞的抑制效應(yīng)和促凋亡作用,并用West鄄ernblot檢測(cè)活化的Caspase-3和bcl-2基因的表達(dá)。
研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),0.5、1.0、5.0毫摩爾/升濃度的GS對(duì)K562細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用具有時(shí)間和劑量依賴性。隨著藥物作用時(shí)間的延長(zhǎng)和劑量的增加,GS對(duì)K562細(xì)胞的增殖抑制作用越明顯(P
研究結(jié)果表明,GS抑制慢性粒細(xì)胞白血病細(xì)胞的增殖可以通過誘導(dǎo)白血病細(xì)胞凋亡來實(shí)現(xiàn)的。GS能夠下調(diào)bcl-2蛋白水平和激活Caspase-3,推測(cè)GS誘導(dǎo)K562細(xì)胞凋亡的作用是通過線粒體途徑,下調(diào)bcl-2,改變跨膜電位,促進(jìn)膜通透孔開放,激活Caspase-3而完成的。
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