中藥多糖對(duì)血糖和血脂的影響

迄今為止，已有300多種多糖類化合物從天然產(chǎn)物中被分離出來，其中從中藥中提取的多糖最為重要。以下介紹一些中藥多糖降血糖、降血脂的研究進(jìn)展。

降血糖

腹腔注射10、30、100毫克/千克劑量人參多糖（即PanaxansA、B、C、D、E等共21種），對(duì)正常小鼠均有降血糖作用，且與劑量呈正相關(guān)，含量較高的A、B、J、N、U、T、S、R、Q對(duì)四氧嘧啶誘發(fā)高血糖小鼠均有明顯降血糖活性。其中降血糖活性最高的是PanaxansA。研究發(fā)現(xiàn)，腹腔注射10毫克/千克Panax鄄ansA給藥7小時(shí)后，對(duì)正常小鼠的降糖率為71％，對(duì)四氧嘧啶誘發(fā)高血糖小鼠降糖率為38％，給藥24小時(shí)后降糖率為60％。

小鼠腹腔注射100毫克/千克從知母中分離得到的4種知母聚糖（AnemavansA、B、C、D），動(dòng)物血糖隨劑量增加而明顯降低，其中以AnemavansB作用最強(qiáng)。

腹腔給藥100毫克/千克紫草多糖（LithospermansA、B和C），均可降低正常小鼠血糖，其中以LithospermansC作用最強(qiáng)。此外給糖尿病小鼠注射Lithosperm-ansA發(fā)現(xiàn)，小鼠血糖隨劑量增加而下降。

腹腔注射10、30、100毫克/千克薏苡仁多糖（CorxanA、B和C），可降低正常小鼠血糖，其中以多糖A最顯著。給藥7小時(shí)后，降糖率分別為56％、45％和40％。對(duì)四氧嘧啶誘發(fā)的高血糖小鼠以30、100毫克/千克劑量腹腔注射給藥7小時(shí)后，A的降糖率分別為61％和26％。

以30、100毫克/千克劑量腹腔注射山藥多糖（即DioscoranA、B、C、D、E、F），對(duì)正常小鼠均有不同程度的降糖活性，其中以C、D活性最強(qiáng)。

刺五加多糖（EleutheranA、B、C、D、E、F、G）對(duì)正常小鼠均有不同程度的降糖活性，其中以F、G作用最強(qiáng)。腹腔注射F100毫克/千克、G300毫克/千克均有降糖活性。

甘蔗多糖（SaccharahA、B、C、D、E、F）中，A300毫克/千克，B～F為100毫克/千克均有降糖活性，C有顯著降血糖作用。

此外，黃芪多糖APSG，具有雙向調(diào)節(jié)血糖作用。靈芝多糖（A、B）、茶葉多糖T－6、黑木耳多糖PAA、猴頭菇多糖HP、紫菜多糖、從海帶中提取的褐藻多糖LaminarinLA、銀耳多糖等均具有降血糖作用。

降血脂

給實(shí)驗(yàn)性高血脂和動(dòng)脈粥樣硬化癥的三黃雞灌喂海帶多糖100毫克/千克4周，能明顯降低血清膽固醇和甘油三酯，并使主動(dòng)脈粥樣硬化斑塊發(fā)生率顯著下降，斑塊面積明顯縮小。其硫酸鹽也能改善狗、大鼠和兔的飲食性高膽固醇血癥，使血清膽固醇明顯下降，有預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化的作用。

褐藻多糖是一種酸性多糖，在大鼠膽固醇飼料中加入5％褐藻酸鉀鹽可使大鼠血清膽固醇的上升率降低20％，使肝臟膽固醇含量上升率降低10％，并改善微循環(huán)。

茶葉多糖，具有抗凝血、抗血栓和降血脂作用。灌胃50毫克/千克和100毫克/千克茶葉多糖，可明顯對(duì)抗小鼠實(shí)驗(yàn)性高膽固醇血癥的形成，血清膽固醇分別下降34％和43％。

木耳多糖、銀耳多糖和銀耳孢子多糖，可明顯降低高血脂癥大鼠血清游離膽固醇、膽固醇酯、甘油三酯、β－脂蛋白含量；降低高膽固醇血癥小鼠血清膽固醇含量，并可防止高膽固醇引起的小鼠高膽固醇血癥的形成。高血脂大鼠口服用鏈球菌發(fā)酵法生產(chǎn)的降甘油三酯多糖后，可減少血中甘油三酯40％以上。

植物激素對(duì)附子多糖含量的影響

植物激素對(duì)附子多糖含量的影響

植物在生長(zhǎng)的過程中受到內(nèi)源激素(或外源激素)的調(diào)節(jié)作用，因此在植物的栽培過程中激素對(duì)其生長(zhǎng)發(fā)育、生理生化、產(chǎn)量、品質(zhì)、次生代謝產(chǎn)物等都可能會(huì)產(chǎn)生作用。

【摘要】目的研究植物激素對(duì)附子多糖含量的影響。方法在附子的苗期和子根膨大期噴施不同的激素，采用蒽酮-硫酸比色法測(cè)定多糖含量。結(jié)果不同的激素間差異明顯，赤霉素(GA)、?-萘乙酸(NAA)對(duì)多糖含量的增加也有作用;6-芐氨基嘌呤(6-BA)和6-糠氨基嘌呤(KT)對(duì)多糖含量的增加也有作用;吲哚乙酸(IAA)有抑制影響。結(jié)論植物激素對(duì)附子多糖的含量有顯著的影響。

【關(guān)鍵詞】 植物激素; 附子; 多糖

Abstract：ObjectiveTo study the effects of plant hormones on the determination of polysaccharide of Aconitum carmichaili.MethodsThe plant hormones were sprayed on the Aconitum carmichaili at the seedling growing period and tubers expanding period.The anthrone-sulfuric acid colorimetry was used to determine the polysaccharide.ResultsThe results showed that there was significant difference between the treatments.The effect on the increment of the content of polysaccharide with the treatments of GA and NAA were significant.6-BA and KT also improved the content of polysaccharide,but IAA had inhibitory effect on it.ConclusionThe effects of plant hormones on the determination of polysaccharide of Aconitum carmichaili are singificant.

Key words：Plant hormones; Aconitum carmichaili; Polysaccharide

附子是我國(guó)常用的中藥，為毛茛科烏頭Aconitum carmichaeli Deb.的子根，附子的主要有效成分為烏頭類生物堿:烏頭堿(aconitine)、中烏頭堿(mesaconitine) 與次烏頭堿(hypaconitine)等，具有抗炎、鎮(zhèn)痛、強(qiáng)心、抗心律失常、降血糖等藥理作用, 有回陽救逆、補(bǔ)火助陽、散寒除濕的功效 [1，2]。中草藥多糖在增強(qiáng)機(jī)體免疫功能及抗腫瘤、抗肝炎、抗?jié)?、調(diào)血脂、降血糖、抗衰老方面都有作用[3]。附子多糖提取液還具有抗癌、抗衰老和增強(qiáng)免疫機(jī)能等作用[4]。附子多糖高效低毒的生物學(xué)特性,近年來逐漸受到了人們的關(guān)注，是人們新藥研發(fā)方向之一。植物激素作為化控技術(shù)在農(nóng)業(yè)上發(fā)揮了重要的作用,對(duì)藥用植物次生代謝產(chǎn)物也有影響，但在附子上的研究尚未開展。因此，研究激素對(duì)多糖含量的影響，對(duì)附子的栽培管理、標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)和藥用價(jià)值的利用都有重要的意義。

1 材料與儀器

1.1 材料試驗(yàn)材料來自四川江油附子GAP基地的主要栽培種，由侯大斌教授鑒定。隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)，重復(fù)3次，種植在西南科技大學(xué)校內(nèi)實(shí)驗(yàn)田。試驗(yàn)田土壤特性：全氮含量為0.14%，速效氮含量為111.50 mg/kg，速效磷含量為32.785 mg/kg，速效鉀含量為89.29 mg/ kg,有機(jī)質(zhì)5.19 mg/kg。底肥：農(nóng)家肥30 000 kg/ha，油枯3 000 kg/ha，高效磷肥750 kg/ha，按附子生產(chǎn)要求進(jìn)行田間管理，每月除1次草。激素選用：GA(60 mg/L)，6-BA(40 mg/L)，NAA (30 mg/L)，IAA(20 mg/L)，KT (25 mg/L)，對(duì)照(清水)，分別在苗期和子根膨大期噴施，06-27收獲。

收獲附子先用自來水清洗干凈，在用蒸餾水漂洗兩次，裝入牛皮紙袋放入烘箱，在105℃下烘30 min，再在60～70℃下烘干至恒重，粉碎過60目篩，4℃冰箱保存，備用。

1.2 儀器設(shè)備、試劑旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(Buchi公司)，BP211D電子分析天平(Storis公司)，T6普析通用新世紀(jì)紫外分光光度計(jì)(北京普析)，高速冷凍離心機(jī)(Backman公司)，中藥切片機(jī)(長(zhǎng)沙中南制藥機(jī)械廠)、中草藥粉碎機(jī)(天津泰斯特儀器有限公司)。

無水乙醇，丙酮，乙醚，氯仿，正丁醇，濃硫酸，蒽酮，葡萄糖等，以上試劑均為分析純。

2 方法

2.1 附子多糖的提取[5，6]稱取干燥的附子粉200 g,加入適量80%乙醇,回流提取3 h,抽濾，藥渣揮盡乙醇后,沸水提取2次,1 h/次,合并提取液,濃縮至200 ml,加95% 乙醇使醇含量達(dá)到80% ,于4℃冰箱中醇沉過夜，離心(5 000 r/min，10 min)，沉淀依次用無水乙醇、丙酮洗滌,得到粗多糖。用熱水將粗多糖溶于水,用Sevage法(氯仿∶正丁醇=5∶1)除蛋白,重復(fù)3次(用考馬斯亮藍(lán)法測(cè)得無蛋白為止)。流水透析后, 蒸發(fā)濃縮至200 ml, 加95%乙醇使醇含量達(dá)到80% ,于4℃冰箱中醇沉過夜。離心,沉淀依次用無水乙醇、丙酮洗滌,真空干燥，稱重計(jì)算得率。

2.2 多糖含量的測(cè)定采用蒽酮-硫酸法[7]。以糖濃度(C，?g /L)為橫坐標(biāo)，吸光度(A)為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程A=0.005 2X-0.002 7,r=0.999 2，葡萄糖在20～100 ?g/L與吸光度呈良好的線性關(guān)系。

2.3 換算因子的測(cè)定精密稱取附子多糖100 mg,溶于1L容量瓶中,稀釋至刻度,搖勻。精密吸取1 ml于具塞試管中,按照蒽酮-硫酸法方法測(cè)定吸光度,根據(jù)回歸方程計(jì)算多糖濃度中葡萄糖的濃度C,按下式計(jì)算出換算因子f。f= C?D/W。式中W為多糖質(zhì)量(mg) , C為葡萄糖濃度(?g /ml) ,D為稀釋倍數(shù)。測(cè)得換算因子f= 4.83 ( n= 5,RSD=2.67%)。

2.4 樣品溶液的制備精密稱取不同處理的附子樣品1.0 g(n=3)，加入150 ml 80 %乙醇回流提取3 h,抽濾，殘?jiān)鼡]盡乙醇后,用100 ml水提取1 h, 2次,離心，定容至250 ml的容量瓶中,為樣品液。

2.5 精確度實(shí)驗(yàn)精密稱取附子粉5份，每份1 g，按照?2.4?項(xiàng)下的方法同時(shí)制取5份樣品溶液。精密移取各樣品溶液各1 ml分別置于具塞試管中，按照?2.2?項(xiàng)下的方法測(cè)定吸光度，計(jì)算附子多糖含量。測(cè)得RSD=1.83%(n=5),說明該分析方法精密度良好。

2.6 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)按?2.4?項(xiàng)下樣品溶液制備方法制備，吸取1 ml試液于具塞試管中，按照?2.2?下的方法測(cè)定吸光度，每隔1 h測(cè)定1次，連續(xù)6 h，考察其穩(wěn)定性。測(cè)得吸光度在6 h內(nèi)無明顯變化，穩(wěn)定性較好(RSD=1.70%)。

2.7 數(shù)據(jù)處理數(shù)據(jù)用SAS軟件進(jìn)行方差分析和最小顯著差數(shù)法(LSD)分析。

3 結(jié)果

3.1 精制多糖的得率干燥的附子粉200 g,得到精制多糖10.82 g,得率為5.41%(n=3)。

3.2 回收率的測(cè)定精密稱取5份附子樣品液各1.0 g,分別加入30 mg左右的附子多糖,按照?2.4?項(xiàng)下樣品溶液的制備和?2.2?項(xiàng)下的測(cè)定方法操作,測(cè)得吸光度,計(jì)算回收率(R)?；厥章蔙=90.4%，RSD=1.58%(n=5)表1 回收實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.3 植物激素對(duì)附子多糖含量的影響精密吸取?2.5?項(xiàng)下樣品液1 ml于具塞試管中，按照蒽酮-硫酸法測(cè)定吸光度，按回歸方程計(jì)算樣品液中葡萄糖的濃度，按照下面公式計(jì)算附子粉中多糖的含量。樣品中含量(% ) = (CD /W Rf) ?100%。式中: C為樣品液中葡萄糖的濃度, D為稀釋倍數(shù), f為換算因子, W為樣品質(zhì)量,R為回收率。各處理樣品中多糖含量和方差分析表見表2。表2 方差分析表

激素對(duì)附子多糖的含量的影響見表3。區(qū)組間的方差分析可知，F(xiàn)=0.091F0.05,說明不同的激素間差異具有明顯的差異性，多糖對(duì)不同激素的敏感性存在差異。GA，NAA對(duì)多糖含量的提高最為顯著，平均含量分別是37.00 ，36.40 mg/g，比對(duì)照增加了10.68%，8.88%，與其它激素和對(duì)照的差異達(dá)到極顯著;兩種細(xì)胞分裂素對(duì)多糖含量的影響也有顯著的增加，但作用低于GA,NAA，含量分別為35.02 mg/g和34.90 mg/g，增加量分別是4.76%，4.40%和對(duì)照的差異也達(dá)到極顯著。IAA對(duì)多糖含量有明顯的抑制作用，多糖含量?jī)H為32.13 mg/g。幾種激素的作用效果GA，NAA>KT，6-BA>CK>IAA。表3 激素對(duì)附子多糖含量影響分析

字母表示處理間的差異顯著水平，相同的字母表示兩處理間沒有差異，不同的字母表示兩處理間差異顯著，大寫字母表示差異極顯著(1%)，小寫字母表示差異顯著(5%)

4 討論

植物在生長(zhǎng)的'過程中受到內(nèi)源激素(或外源激素)的調(diào)節(jié)作用，因此在植物的栽培過程中激素對(duì)其生長(zhǎng)發(fā)育、生理生化、產(chǎn)量、品質(zhì)、次生代謝產(chǎn)物等都可能會(huì)產(chǎn)生作用。多糖作為附子有效成分之一，是評(píng)價(jià)附子藥用價(jià)值的主要標(biāo)準(zhǔn)之一。目前對(duì)多糖含量的測(cè)定使用的方法還主要是經(jīng)典的紫外比色法，通過驗(yàn)證，該方法具有較好精密度和穩(wěn)定性，回收率也較高，是檢測(cè)多糖含量的優(yōu)良的方法之一。通過實(shí)驗(yàn)可以發(fā)現(xiàn)，激素對(duì)多糖的含量有調(diào)節(jié)作用。除IAA外其它幾種激素對(duì)多糖含量都有明顯的增加作用，說明IAA的作用具有不穩(wěn)定性，這與前人研究的激素IAA的調(diào)節(jié)作用具有不穩(wěn)定性比較相似[8]。IAA在植物生長(zhǎng)的不同時(shí)期易受到吲哚乙酸氧化酶的破壞而失去作用，對(duì)植物的生長(zhǎng)發(fā)育產(chǎn)生有影響，可能是抑制多糖含量的原因之一。由于激素對(duì)植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)機(jī)理目前還不是很清楚，激素對(duì)多糖含量的影響還有待進(jìn)一步研究。

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糖對(duì)糖尿病患者的影響有哪些？

食物中所含的碳水化合物根據(jù)其分子結(jié)構(gòu)可分為單糖、雙糖、多糖三大類。其中單糖、雙糖吸收得快。多糖必須經(jīng)過消化道各種酶的作用轉(zhuǎn)化成單糖，才有可能被腸道吸收，所以吸收較慢。

正常人由于胰腺分泌的胰島素可隨腸道吸收的葡萄糖量而增減，控制血糖的高低。但糖尿病患者則不然，他們由于胰島素分泌不足或相對(duì)不足，造成糖代謝紊亂，使全身的細(xì)胞不能充分利用葡萄糖，而血液中的葡萄糖又難以變成糖元貯存于肝臟，因此使飯后血糖增高，持續(xù)升高時(shí)間延長(zhǎng)。如果主食在限量之內(nèi)選擇含糖低的粗糧或米、面等含多糖的甜食物，吸收慢，可使血糖上升緩慢，相對(duì)控制病情如果吃糖果等含單糖的甜食，吸收快，使血糖迅速上升，上升到一定程度，即隨尿液排出。尿量和尿糖都增加，體內(nèi)電解質(zhì)也隨之丟失。而且長(zhǎng)期高血糖可刺激胰島，使之功能減退，胰島素分泌減少，加重病情。

所以，糖尿病的病人不宜吃糖，只有當(dāng)預(yù)防低血糖時(shí)例外。

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