巨噬細胞吞噬作用_健康生活須知的事情

一、巨噬細胞吞噬作用的生命周期是

巨噬細胞(Macrophages，縮寫為m?)，是一種位于組織內(nèi)的白血球，源自單核細胞，而單核細胞又來源于骨髓中的前體細胞。巨噬細胞和單核細胞皆為吞噬細胞，在脊椎動物體內(nèi)參與非特異性防衛(wèi)(先天性免疫)和特異性防衛(wèi)(細胞免疫)。它們的主要功能是以固定細胞或游離細胞的形式對細胞殘片及病原體進行噬菌作用(即吞噬以及消化)，并激活淋巴球或其他免疫細胞，令其對病原體作出反應(yīng)。巨噬細胞屬免疫細胞，有多種功能，是研究細胞吞噬、細胞免疫和分子免疫學(xué)的重要對象。巨噬細胞容易獲得，便于培養(yǎng)，并可進行純化。巨噬細胞屬不繁殖細胞群，在條件適宜下可生活2-3周，多用做原代培養(yǎng)，難以長期生存。

一、生命周期

當(dāng)單核細胞經(jīng)血管的內(nèi)皮細胞層進入一已受損的組織時(這過程被稱為白血球外滲作用)，它經(jīng)過一連串轉(zhuǎn)變以成為巨噬細胞。單核細胞會因化學(xué)趨向性而被化學(xué)物質(zhì)的刺激吸引至受損處，這些刺激包括受傷細胞、病原體、由肥大細胞和嗜堿性細胞所釋放的組織胺，以及由已于該處的巨噬細胞釋出的細胞因子。在某些地方，如睪丸，巨噬細胞已被證實會透過增殖以移殖于此。

與壽命較短的嗜中性細胞不同，其壽命可達數(shù)個月至數(shù)年不等。

二、巨噬細胞的培養(yǎng)方法是什么呢

巨噬細胞也建有無限細胞系，大多來自小鼠，如P338D1、S774A.1、RAW309Cr.l等，均獲惡性，培養(yǎng)中呈巨噬細胞形態(tài)和吞噬功能，易于傳代和瓶壁分離，但難以建株。培養(yǎng)巨噬細胞可用各樣方法和各種來源來獲取細胞，以小鼠腹腔取材法最為實用，其法如下：

1、實驗前三天，向每只小鼠腹腔內(nèi)注入無菌硫羥乙酸肉湯1ml(勿注入腸內(nèi))。

2、引頸殺死動物，手提鼠尾將全鼠浸入70%酒精中3～5秒。

3、置動物于解剖臺上，用針頭固定四肢，雙手持鑷撕開皮膚拉向兩側(cè)，暴露出腹膜，但勿傷及腹膜壁。

4、再用70%酒精擦洗腹膜壁后，用注射器吸10mlEagle液注入腹腔中，同時從兩側(cè)用手指揉壓腹膜壁，令液體在腹腔內(nèi)充分流動。

5、用針頭輕輕挑起腹壁，使動物體微傾向一側(cè)，使腹腔中液體集于針頭下吸取入針管內(nèi)。

6、小心拔出針頭，把液體注入離心管中，250g4℃離心10分鐘，去上清，加10mlEagle培養(yǎng)基。

7、計數(shù)細胞，每只小鼠可產(chǎn)生20～30×105細胞，其中90%為巨噬細胞。

8、為獲取3×105帖附細胞/平方厘米，需接種2.5×106/ml。

9、為純化培養(yǎng)細胞，去除其它白細胞，接種數(shù)小時后，去除培養(yǎng)液，用Eagle液沖洗1～2次后，再加新Eagle培養(yǎng)液置37℃，5%CO2溫箱中培養(yǎng)。

三、巨噬細胞的培養(yǎng)環(huán)境是什么呢

細胞培養(yǎng)是無菌操作技術(shù)，要求工作環(huán)境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響。細胞培養(yǎng)室和設(shè)計原則是防止微生物污染和有害因素影響，要求工作環(huán)境清潔，空氣清新，干燥和無煙塵。細胞培養(yǎng)室的設(shè)計原則一般是無菌操作區(qū)設(shè)在室內(nèi)較少走動的內(nèi)側(cè)，常規(guī)操作和封閉培養(yǎng)于一室，而洗刷消毒在另一室。

常用設(shè)施及設(shè)備

超凈工作臺：也稱凈化工作臺，側(cè)流式，直流式和外流式三大類。

無菌操作間：一般由衣間，緩沖間和操作間三部分組成。操作間放置凈化工作臺及二氧化碳培養(yǎng)箱，離心機，倒置顯微鏡等。緩沖間可放置電冰箱，冷藏器及消毒好的無菌物品等。

操作間：普通培養(yǎng)箱，離心機，水浴鍋，定時鐘，普通天平及日常分析處理物

洗刷消毒間：烤箱，消毒鍋，蒸餾水處理器及酸缸等。

分析間：顯微鏡，計算機及打印機等。

培養(yǎng)器皿

常用細胞培養(yǎng)器皿有培養(yǎng)瓶，培養(yǎng)板，培養(yǎng)皿等。常準備量是使用量的三倍。器皿應(yīng)選擇透明度好，無毒，利于細胞粘附和生長的材料，常用一次性聚苯乙烯材料制品或中性硬度玻璃制品。常用的器皿有下面幾種。

四、巨噬細胞的主要功能有什么呢

在機體創(chuàng)傷修復(fù)過程中，巨噬細胞主要有兩方面的作用。

其一，一旦機體創(chuàng)傷活動開始,巨噬細胞就能大量分泌多種生物活性物質(zhì)以及多種酶類物質(zhì)，其中生物活性物質(zhì)又稱巨噬細胞源性生物因子，包括多肽轉(zhuǎn)換生長因子、白細胞介素、腫瘤壞死因子、血小板衍生生長因子以及一氧化氮等;酶類物質(zhì)主要包括膠原酶、彈性蛋白酶、纖溶酶原激活劑等;些生物活性物質(zhì)直接引導(dǎo)著機體修復(fù)的整進程。

其二，巨噬細胞作為炎癥階段的主要吞噬細胞，負責(zé)清除機體損傷處組織和細胞的壞死碎片以及病原體等，這些物質(zhì)對創(chuàng)傷愈合過程都有重要的調(diào)控作用。因此，研究創(chuàng)傷修復(fù)過程中巨噬細胞釋放的細胞因子的種類和含量在創(chuàng)傷后不同時間的變化規(guī)律，將可能從分子水平和細胞水平上提供一些與損傷時間相關(guān)的標(biāo)志性變化或依據(jù);而文獻報道巨噬細胞吞噬物的變化亦具有與時間相關(guān)的特點，巨噬細胞吞噬物在形態(tài)上易于觀察和檢測，這些特征使得巨噬細胞在損傷時間推斷過程中具有重要的法醫(yī)學(xué)意義。

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